MS-222对鲢鱼种麻醉效果及生理生化指标的影响.pdf
《MS-222对鲢鱼种麻醉效果及生理生化指标的影响.pdf》由会员分享,可在线阅读,更多相关《MS-222对鲢鱼种麻醉效果及生理生化指标的影响.pdf(11页珍藏版)》请在咨信网上搜索。
1、Open Journal of Fisheries Research 水产研究水产研究,2023,10(3),99-109 Published Online September 2023 in Hans.https:/www.hanspub.org/journal/ojfr https:/doi.org/10.12677/ojfr.2023.103012 文章引用文章引用:罗相忠,童杰,梁宏伟,李晓晖,邹桂伟,崔峰.MS-222 对鲢鱼种麻醉效果及生理生化指标的影响J.水产研究,2023,10(3):99-109.DOI:10.12677/ojfr.2023.103012 MS-222对对鲢鱼
2、种麻醉效果及鲢鱼种麻醉效果及 生理生化指标的影响生理生化指标的影响 罗相忠罗相忠1,童童 杰杰2,梁宏伟梁宏伟1,李晓晖李晓晖1,邹桂伟邹桂伟1,崔崔 峰峰2*1中国水产科学研究院长江水产研究所,湖北 武汉 2安徽科技学院生命与健康科学学院,安徽 凤阳 收稿日期:2023年8月1日;录用日期:2023年8月22日;发布日期:2023年9月5日 摘摘 要要 为研究麻醉剂为研究麻醉剂MS-222对对鲢鲢的麻醉效果的麻醉效果,比较分析了比较分析了MS-222在高浓度分别为在高浓度分别为50、70、90、110、130 mg/L下诱导下诱导鲢鲢进入各个阶段麻醉期以及复苏期的时间,及施麻后呼吸频率的变化
3、。进入各个阶段麻醉期以及复苏期的时间,及施麻后呼吸频率的变化。研究了研究了10、20、30 mg/L MS-222低浓度下对鲢肝脏、脾脏、鳃组织的碱性磷酸酶低浓度下对鲢肝脏、脾脏、鳃组织的碱性磷酸酶(AKP)、酸性磷酸酶、酸性磷酸酶(ACP)、过氧化氢酶、过氧化氢酶(CAT)的活性影响。结果表明:的活性影响。结果表明:MS-222溶液在高浓度条件下,溶液在高浓度条件下,110130 mg/L为有效浓度,麻醉效果最好,适为有效浓度,麻醉效果最好,适合对合对鲢鲢进行短时间操作;在低浓度条件下,进行短时间操作;在低浓度条件下,2030 mg/L浓度试验组酶活高于对照组浓度试验组酶活高于对照组,且在一
4、定时间内且在一定时间内保持稳定,说明对保持稳定,说明对鲢鲢鱼鱼种在长时间内保持麻醉效果,适宜对种在长时间内保持麻醉效果,适宜对鲢鲢进行长途运输进行长途运输。关键词关键词 长丰长丰鲢鲢,MS-222,呼吸频率呼吸频率,碱性磷酸酶碱性磷酸酶,酸性磷酸酶酸性磷酸酶,过氧化氢酶过氧化氢酶 Effect of MS-222 on Anesthesia and Physiological and Biochemical Indicators of Silver Carp Fingerling Xiangzhong Luo1,Jie Tong2,Hongwei Liang1,Xiaohui Li1,Guiw
5、ei Zou1,Feng Cui2*1Yangtze River Fisheries Research Institute,Chinese Academy of Fishery Sciences,Wuhan Hubei 2College of Life and Health Science,Anhui Science and Technology University,Fengyang Anhui Received:Aug.1st,2023;accepted:Aug.22nd,2023;published:Sep.5th,2023 Abstract In order to analyze th
6、e anesthetic effect of the anesthetic MS-222 on silver carp,the time of MS-222 罗相忠 等 DOI:10.12677/ojfr.2023.103012 100 水产研究 inducing silver carp to entering various stages of anesthesia and resuscitation at high concentra-tions of 50,70,90,110,130 mg/L were studied.Effects of alkaline phosphatase(AK
7、P),acid phos-phatase(ACP)and catalase(CAT)in liver,spleen and gill tissues of silver carp at low concentra-tions of 10,20,30 mg/L were observed.The results showed the anesthesia effect is the best at the effective concentration 110130 mg/L under high concentration groups,which is suitable for short-
8、term operations on silver carp,such as surgery.Under the concentration ranged from 20 to 30 mg/L,the enzyme activity of the experimental group is higher than that of the control group,which may remain stable for a certain period of time,such as fish transportation.Keywords Silver Carp,MS-222,Respira
9、tory Rate,Alkaline Phosphatase,Acid Phosphatase,Catalase Copyright 2023 by author(s)and Hans Publishers Inc.This work is licensed under the Creative Commons Attribution International License(CC BY 4.0).http:/creativecommons.org/licenses/by/4.0/1.引言引言 鲢(Hypophthalmichthys molitrix)广泛分布于我国长江、珠江、黑龙江流域,
10、是我国重要的大宗淡水养殖鱼类之一1。其具有营养丰富、食物链短、成活率高、养殖成本低,兼具低碳、水生生物资源养护、修复水域生态环境等优良特性;且对国内大宗水产品的稳定有效供给、食品安全及大食物观发展理念的贯彻,人们膳食结构改善方面起着至关重要的作用。据统计,2021 年全国鲢养殖产量达 383.66 万吨,居我国淡水鱼类养殖产量的第二位,仅次于草鱼(575.51 万吨)2,可见鲢养殖在促进渔民增收、渔业增效及产业高质量发展方面成效显著。长丰鲢(Changfeng silver carp)为中国水产科学研究院长江水产研究所选育的我国“四大家鱼”的第一个水产新品种;与鲢相比,具有生长快、体型好、出肉
11、率高、耐低氧、遗传稳定等优良性状3,自 2010 年通过全国水产原种和良种审定委员会审定以来,已推广至全国 27 个省市、自治区可控的淡水水域进行增、养殖,产生显著的经济、社会与生态效益。此外,长丰鲢性情较鲢稍显温和,但受刺激亦易跳跃,在运输过程中往往造成鲢不同程度的损伤影响其成活率。为了减少鱼的应激反应,提高鲢运输途中的成活率,运输前对其进行麻醉是较好的策略。鱼用麻醉剂有很多,包括 MS-222(间氨基苯甲酸乙酯甲磺酸盐)、丁香酚、CO2、喹哪啶、美托味酯等,其中 MS-222 应用较为普遍。MS-222(分子式 C10H15NO5S)其为白色结晶或粉末,易溶于水,水溶液透明无色,呈微酸性、
12、耐高温。国际商品名称为 Fingudi、Matacaine、Tricaine,麻醉时具有浓度低,诱导鱼体入麻时间快且复苏时间短,无毒副作用等优点,是当前世界各国广泛应用于水生动物中安全、有效的麻醉药物。在美国,经美国食品和药物管理局(FDA)认可,MS-222 为唯一可用于食用鱼的麻醉剂4,已经广泛用于鱼类的活体运输、标志放流。MS-222 的大量使用可能导致其在水产品中产生残留,给水产品的食用安全性带来潜在的风险。为了保证水产品的食用安全性,国际上对 MS-222 在水产品中的使用进行了严格规定。如美国 FDA 规定经 MS-222 麻醉的食用鱼必须经 21 d 休药期才可在市场上销售,加拿
13、大规定的休药期为 5 d 5 6。有关 MS-222 的检测方法主要有比色法7、气相色谱法、液相色谱法8、液相色谱串联质谱法、高效液相色谱串联质谱法等9。国内,目前利用 MS-222 对水生动物进行麻醉的研究及生理生化影响已有相关报道,如半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)、中华鲟(Acipenser sinensis)、施氏鲟(Acipenser schrenckii)、美洲鲥(Alosa sapidissima)、刀鲚(Coilia nasus Schlegel)、黄颡鱼(Pelteobagrus Open AccessOpen Access罗相忠 等 DOI:10.1
14、2677/ojfr.2023.103012 101 水产研究 fulvidraco)、尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)、四川华吸鳅(Sinogastromyzon szechuanensis)、草鱼(Ctenopharyngodon idellus)、鲫(Carassius auratus)、翘嘴鲌(Culter alburnus)、鲢、鳜(Siniperca chuatsi)、花鲈(Lateolabrax maculatus)、大口黑鲈(Micropterus salmoides)、红鳍东方鲀(Takifugu rubripes)、大黄鱼(Larimichthys c
15、rocea)、珍珠龙胆石斑鱼(E.fuscoguttatus()x E.lanceolatus()、长蛸(Octopus minor)等10-26。而鲜有研究鲢在 MS-222 麻醉下其效果及组织内酶活性的变化。本研究以鲢新品种为研究对象,通过比较 MS-222 在不同麻醉浓度、不同施麻时间条件下对鲢麻醉效果与组织内酶活指标的影响。参考杜浩等的研究方法12,将 50130 mg/L 浓度定义为高浓度,将 1030 mg/L 浓度定义为低浓度,对鲢在高浓度下的生理指标的变化和在低浓度下麻醉剂溶液对肝脏、脾脏、鳃的抗氧化酶活性进行研究,探究高浓度条件下急性麻醉,低浓度条件下长效麻醉的最合适浓度,为
16、在鲢和长丰鲢的运输中得到应用提供参考。2.试验材料与方法试验材料与方法 2.1.试验材料试验材料 2.1.1.试验鱼试验鱼 试验鲢采自中国水产科学研究院长江水产研究所梁子湖试验场,其规格体重为(105 5.0)g,体长为(18 2.0)cm,暂养试验场养鱼车间塑料桶(容积为 200 L)中 1 周,每个桶放 20 尾,气泵持续通气以维持氧浓度,水温为(17.8 0.5),溶氧量保持在(7.77 0.30)mg/L。在试验中,选择健康、无伤、规格整齐的鲢进行试验。试验用水来自曝气后的自来水。2.1.2.试验试剂试验试剂 本试验使用的试剂 MS-222 麻醉剂购买自于上海希格玛高技术有限公司,CA
17、T 试剂盒,ACP 试剂盒,AKP 试剂盒购自南京建成生物工程研究所;蛋白浓度测定试剂盒购自北京索莱宝科技有限公司合成。2.2.麻醉方法麻醉方法 试验鱼使用 MS-222 麻醉时使用一定量的碳酸氢钠调节实验容器水体的 pH 值,控制在 7.07.5 范围。2.2.1.高浓度麻醉方法高浓度麻醉方法 试验时,在塑料桶注入 30L 经曝气的自来水,分别加入 1.5、2.1、2.7、3.3、3.9 g 的 MS-222 粉末,充分搅拌使其溶解,配置成浓度为 50、70、90、110、130 mg/L 的麻醉剂溶剂,并设对照组。每个浓度设置三组重复。每个塑料桶中投放鲢 5 尾,同时计时观察。2.2.2.
18、低浓度麻醉方法低浓度麻醉方法 试验时,在塑料桶注入曝气的自来水 200 L,并分别在塑料桶中加入 2.0、4.0、6.0 g 的 MS-222 粉末,充分搅拌使其溶解,配置成浓度为 10、20、30 mg/L 的麻醉剂溶剂,同时设空白对照组。每个浓度设置三组重复。每个塑料桶中放入鲢 20 尾,同时开始计时观察。放鱼后分别在 1、3、6、12、24 h 时间点每个塑料桶中各取出 5 尾鲢进行解剖,采集肝、脾、鳃组织后立即放入液氮中保存备用。2.3.样品处理方法样品处理方法 取低浓度 MS-222 麻醉处理 1、3、6、12、24 h 的组织样品解冻。将其肝脏、脾脏、鳃组织分别称取0.1 g 以组
19、织样:生理盐水=1 g:10 ml 混合。混合后在高速组织研磨仪中 60 HZ 低温研磨 30 s。匀浆后将匀浆液置高速冷冻离心机 4,2500 r/min,离心 10 min。取上清液即为 10%的组织匀浆,测定不同 MS-222麻醉处理时间的鲢肝脏、脾脏、鳃组织中过氧化氢酶(CAT)、酸性磷酸酶(ACP)、碱性磷酸酶(AKP)活性,所有试剂盒均购自南京建成生物工程有限公司,参照说明书进行检测。吸光度使用 NP80 型超微量分光罗相忠 等 DOI:10.12677/ojfr.2023.103012 102 水产研究 光度计进行测定。得到结果代入公式 1、公式 2、公式 3 计算。由于酶活计算
20、时需要各组织的蛋白浓度,所以使用试剂盒对各组织蛋白浓度进行测定并代入公式(见图 1)计算。()()()121CATU mgprot271mgprot ml60=+组织的活力待测样品蛋白浓度取样量XX (公式 1)注释:X1代表对照 OD 值,X2代表测定 OD 值,下同。()()()2343ACPgprot0.1mg mlgprot ml=活力 金氏单位酶标准品浓度待测样品蛋白浓度xxxx(公式 2)()()()2343AKPgprot0.1mg mlgprot ml=活力 金氏单位酶标准品浓度待测样品蛋白浓度xxxx(公式 3)Figure 1.Standard protein curve
21、图图 1.标准蛋白曲线 2.4.数据处理数据处理 使用 WPS office 和 SPSS 22.0 软件对数据进行处理及图表、表格的制作。统计值为平均值 标准差,在单因素方差分析的基础上采用多重比较,P 0.05 代表数据之间存在显著差异。3.结果结果 3.1.MS-222 麻醉下鲢生理行为观察麻醉下鲢生理行为观察 3.1.1.鲢麻醉及复苏阶段行为特征鲢麻醉及复苏阶段行为特征 在麻醉剂 MS-222 对鲢持续作用条件下,不同浓度麻醉下鲢的行为特征及生理状态往往差别较大。本试验观察,参照杜浩、刘长琳等12 27对鱼类麻醉与苏醒的分期,可将鲢的麻醉期间分为五个阶段,其行为特征见表 1、苏醒期分为
22、三个阶段,其特征详见表 2。并结合本试验,将 3 min 内进入麻醉阶段A4期,5 min 内进入恢复 R3期的浓度定义为有效浓度。3.1.2.麻醉状态下鲢呼吸频率变化麻醉状态下鲢呼吸频率变化 呼吸频率是鲢生理指标中重要的一部分,能够较为直观的反应其麻醉程度。鲢在 MS-222 药物不同浓度下的呼吸频率如图 2 所示。在 MS-222 浓度为 50 mg/L 的溶液中,鲢的呼吸频率出现小幅度上升后平稳下降。浓度分别为 70、90、110、130 mg/L 的溶液中,鲢的呼吸频率呈明显下降趋势且未出现小幅度上升,与对照组相比具有显著差异,期间伴随着强烈的应激反应,如迅猛游动,撞击桶壁等。在 MS
23、-222罗相忠 等 DOI:10.12677/ojfr.2023.103012 103 水产研究 浓度为 110 mg/L、130 mg/L 的溶液中,呼吸频率分别与对照组、50 mg/L、70 mg/L 浓度组相比差异显著。由此证明,随着 MS-222 麻醉剂浓度的不断增加,鲢的呼吸频率下降速度不断增加。这与郭丰红等研究MS-222 对鳜的麻醉效果的研究结果一致20。Table 1.Behavior pattern of silver carp anesthetized during anesthetic stages 表表 1.鲢麻醉各阶段的行为状况 麻醉阶段 Stages of anae
24、sthesia 行为特征 Behavioral characteristics A0正常期 呼吸频率正常,对外界刺激反应迅速 Normal opercular open and close,react to extemal stimuli A1轻度镇定期 呼吸频率降低,对外界刺激反应降低,身体平衡性较好 Decrease in opercular open and close rate,slightly loss of reactivity to extemal stimuli,equili-brium open normal A2深度镇定期 呼吸频率有规律缓慢,对外界刺激反应弱,身体失去平衡
25、 Slow but regular opercular rate,loss of reactivity to extemal stimuli except strong pressure,loss of equilibrium A3中度麻醉期 吸呼频率微弱无规律,失去反应能力,不再持续游动 Slow opercular movements and irregular,complete loss of reactivity without continuously swimming A4深度麻醉期 呼吸停止,鱼侧躺底部 Opercular movements cease,the fish lay
- 配套讲稿:
如PPT文件的首页显示word图标,表示该PPT已包含配套word讲稿。双击word图标可打开word文档。
- 特殊限制:
部分文档作品中含有的国旗、国徽等图片,仅作为作品整体效果示例展示,禁止商用。设计者仅对作品中独创性部分享有著作权。
- 关 键 词:
- MS 222 鲢鱼 种麻 效果 生理 生化 指标 影响
1、咨信平台为文档C2C交易模式,即用户上传的文档直接被用户下载,收益归上传人(含作者)所有;本站仅是提供信息存储空间和展示预览,仅对用户上传内容的表现方式做保护处理,对上载内容不做任何修改或编辑。所展示的作品文档包括内容和图片全部来源于网络用户和作者上传投稿,我们不确定上传用户享有完全著作权,根据《信息网络传播权保护条例》,如果侵犯了您的版权、权益或隐私,请联系我们,核实后会尽快下架及时删除,并可随时和客服了解处理情况,尊重保护知识产权我们共同努力。
2、文档的总页数、文档格式和文档大小以系统显示为准(内容中显示的页数不一定正确),网站客服只以系统显示的页数、文件格式、文档大小作为仲裁依据,平台无法对文档的真实性、完整性、权威性、准确性、专业性及其观点立场做任何保证或承诺,下载前须认真查看,确认无误后再购买,务必慎重购买;若有违法违纪将进行移交司法处理,若涉侵权平台将进行基本处罚并下架。
3、本站所有内容均由用户上传,付费前请自行鉴别,如您付费,意味着您已接受本站规则且自行承担风险,本站不进行额外附加服务,虚拟产品一经售出概不退款(未进行购买下载可退充值款),文档一经付费(服务费)、不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。
4、如你看到网页展示的文档有www.zixin.com.cn水印,是因预览和防盗链等技术需要对页面进行转换压缩成图而已,我们并不对上传的文档进行任何编辑或修改,文档下载后都不会有水印标识(原文档上传前个别存留的除外),下载后原文更清晰;试题试卷类文档,如果标题没有明确说明有答案则都视为没有答案,请知晓;PPT和DOC文档可被视为“模板”,允许上传人保留章节、目录结构的情况下删减部份的内容;PDF文档不管是原文档转换或图片扫描而得,本站不作要求视为允许,下载前自行私信或留言给上传者【自信****多点】。
5、本文档所展示的图片、画像、字体、音乐的版权可能需版权方额外授权,请谨慎使用;网站提供的党政主题相关内容(国旗、国徽、党徽--等)目的在于配合国家政策宣传,仅限个人学习分享使用,禁止用于任何广告和商用目的。
6、文档遇到问题,请及时私信或留言给本站上传会员【自信****多点】,需本站解决可联系【 微信客服】、【 QQ客服】,若有其他问题请点击或扫码反馈【 服务填表】;文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“【 版权申诉】”(推荐),意见反馈和侵权处理邮箱:1219186828@qq.com;也可以拔打客服电话:4008-655-100;投诉/维权电话:4009-655-100。