HPLC-UV法同时测定胡萝卜中5种有机酸的含量.pdf
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1、现代食品XIANDAISHIPIN185/分析检测AnalysisandTestingdoi:10.16736/41-1434/ts.2023.15.046HPLC-UV 法同时测定胡萝卜中 5 种有机酸的含量Simultaneous Determination of 5 Organic Acid in Carrot by HPLC-UV 吕文超,周春红,沈莹萍,杨 阳,段筱筠,令宾强,马芮萍(甘肃省产品质量监督检验研究院,甘肃 兰州 730050)L Wenchao,ZHOU Chunhong,SHEN Yingping,YANG Yang,DUAN Xiaoyun,LING Binqian
2、g,MA Ruiping(Gansu Province Product Quality Supervision and Inspection Research Institute,Lanzhou 730050,China)摘 要:本研究建立了高效液相色谱-紫外检测器同时测定胡萝卜中5种有机酸的方法,其在各自的范围内线性关系良好,检出限范围为 0.015 8 0.060 7 gkg-1,定量限范围为 0.052 6 0.202 4 gkg-1,回收率范围为 85%115%,RSD范围为0.46%3.20%。胡萝卜样品中均含有5种有机酸,该方法的准确性较好,可用于胡萝卜中有机酸的测定。关键词:高效
3、液相色谱-紫外检测器;胡萝卜;有机酸Abstract:In this study,high performance liquid chromatography-ultraviolet absorption detector method was established for the simultaneous determination of five organic acids in carrot.The linear relationships were good in their respective ranges.The detection limits ranged from 0.0
4、15 8 gkg-1 to 0.060 7 gkg-1,The limits of quantification ranged from 0.052 6 gkg-1 to 0.202 4 gkg-1,the recovery rates ranged from 85%to 115%,RSD ranged from 0.46%to 3.20%.Carrot samples all contain five organic acids,the method is accurate and can be used for the determination of organic acids in c
5、arrot.Keywords:high performance liquid chromatography-ultraviolet absorption detector;carrot;organic acid中图分类号:TS207.3胡萝卜(Daucus carota var.sativa Hoffm.),属伞形科胡萝卜属胡萝卜种的一年生或二年生双子叶草本植物,亦称红萝卜、金笋或甘荀,在全球范围内种植面积很广。胡萝卜属于根菜类蔬菜,生熟皆可食用,含有多种维生素、氨基酸、微量元素等,其性平、味甘,具有保护呼吸道等的上皮细胞组织的功能,降低慢性疾病的发生率和增强人体免疫力,预防肺癌、强心、降压等
6、功效,因此也称胡萝卜为“土人参”1-3。有机酸是植物的重要组成成分,常用的检测方法有离子色谱法4-5、气相色谱法6、毛细管电泳法7、液相色谱法8等。气相色谱法上机分析测试前需要进行衍生化处理,操作烦琐,重现性较差;毛细管电泳法速度较快、成本低,但相比于液相色谱法,精密度和灵敏度较差9-10。液相色谱法由于操作简单、准确度高、精密度好而广泛应用于食品中有机酸的测定。目前对胡萝卜的研究主要集中在不同工艺、不同种植方式对胡萝卜品质的影响方面,而对其有机酸的含量的研究较少。本研究旨在建立胡萝卜中 5 种有机酸的液相色谱检测方法,为加强胡萝卜的质控及后续的产业化发展提供数据支持。基金项目:甘肃省市场监督
7、管理局重点研发项目(SSCJG-SP-202102)。作者简介:吕文超(1994),女,本科,助理工程师,研究方向为色谱技术。通信作者:周春红(1965),女,硕士,正高级工程师,研究方向为食品及食品相关产品监测。E-mail:。现代食品XIANDAISHIPIN186/分析检测Analysis and Testing1 材料与方法1.1 仪器与试剂U3000 高效液相色谱仪及二极管阵列检测器,赛默飞世尔公司;C18色谱柱(250 mm4.6 mm,5 m),北京迪马科技有限公司;TLE204E 分析天平(精密度为 0.000 1 g),梅特勒公司;MS3D 涡旋振荡器,IKA 公司;KQ-6
8、00DE 台式数控超声清洗器,科桥超声波设备有限公司。酒石酸(CAS:133-37-9)、苹果酸(CAS:6915-15-7)、乳酸(CAS:50-21-5)、柠檬酸(CAS:77-92-9)、丁二酸(CAS:110-15-6)标准品,酒石酸、苹果酸纯度均 99%,柠檬酸、乳酸、丁二酸浓度为100 gmL-1,购于天津阿尔塔科技有限公司;甲醇、甲酸均为色谱纯,sigma 公司;其他试剂均为色谱纯。1.2 试验方法1.2.1 标准溶液配制标准储备液(100 gmL-1):准确称取 10 mg 标准 品,加入甲醇使其溶解并用甲醇定容至 10 mL。混合标准溶液的配制(10 gmL-1):将标准储备
9、液逐级稀释至 10 gmL-1。1.2.2 样品前处理参考马芮萍等11的方法,根据实验要求略有修改:称取粉碎试样 2.0 g(精确至 0.000 1 g)置于 50 mL 离心管中,加入20 mL 70%乙醇水溶液,充分匀浆1 min,40 超 声 提 取 30 min,4 000 rmin-1离 心 5 min,将上清液转移至50 mL容量瓶中,在残渣中加入20 mL 70%乙醇水溶液复提一次,合并上清液,用 70%乙醇水溶液定容后过 0.22 m 滤膜,待上 HPLC 测定。1.2.3 仪器条件色谱条件。色谱柱:C18(250 mm4.6 mm,5 m);柱温:25;流速 1.0 mLmi
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