肉桂精油复合壳聚糖乳液对采后芒果炭疽病的防治效果及作用机制.pdf
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1、热带作物学报 2023,44(7):14601467 Chinese Journal of Tropical Crops 收稿日期 2022-08-24;修回日期 2022-10-10 基金项目 中国热带农业科学院基本科研业务费专项(No.1630062022006);广东省优稀水果现代农业产业技术体系创新团队建设项目(No.2022KJ116)。作者简介 方 静(1991),女,硕士,研究方向:热带果蔬采后生理与贮运保鲜。*通信作者(Corresponding author):谷 会(GU Hui),E-mail:。肉桂精油复合壳聚糖乳液对采后芒果炭疽病的防治效果及作用机制 方 静1,2,谷
2、 会1*,姚全胜1,杜丽清1 1.中国热带农业科学院南亚热带作物研究所/海南省热带园艺产品采后生理与保鲜重点实验室,广东湛江 524091;2.海南大学园艺学院,海南海口 570228 摘 要:芒果风味独特、营养丰富,被誉为“热带果王”,但芒果在采后后熟过程中极易腐烂变质,其中由炭疽病引起的腐烂损失最为严重。因此,如何防治芒果采后炭疽病,成为制约芒果产业健康发展的瓶颈问题。以台农 1 号芒果为试材,研究绿色环保的肉桂精油复合壳聚糖乳液对采后芒果炭疽病的防治效果及作用机制。研究结果表明:0.5%肉桂精油+0.3%壳聚糖处理对芒果炭疽病的防治效果最好,0.03%肉桂精油处理可完全抑制离体芒果炭疽菌
3、的生长和产孢,0.01%、0.02%肉桂精油处理对芒果炭疽菌菌丝有明显的破坏作用;复合处理显著抑制了芒果炭疽病病斑的扩大,提高了抗病相关物质木质素、总酚(TP)和过氧化氢(H2O2)的含量,提高了抗病相关酶苯丙氨酸解氨酶(PAL)、过氧化物酶(POD)、-1,3 葡聚糖酶(-1,3-GA)、几丁质酶(CHI)的活性。由此可见,肉桂精油复合壳聚糖乳液对芒果炭疽病有较好的防治效果,一方面是由于复合处理抑制或破坏了芒果炭疽菌菌丝的生长和产孢,另一方面是复合处理诱导芒果果实提高了抗病性。因此,适宜浓度的肉桂精油复合壳聚糖乳液处理为防治芒果采后炭疽病提供了一种绿色新途径,研究结果可为我国芒果采后贮运保鲜
4、产业的发展提供理论依据和应用参考。关键词:芒果;炭疽病;肉桂精油;壳聚糖;防治效果 中图分类号:TS255.3 文献标识码:A Control Effect and Mechanism of Cinnamon Essential Oil Compound Chitosan Lotion on Postharvest Mango Anthracnose FANG Jing1,2,GU Hui1*,YAO Quansheng1,DU Liqing1 1.Institute of Subtropical Crops,Chinese Academy of Tropical Agricultural S
5、ciences/Hainan Key Laboratory of Postharvest Physi-ology and Preservation of Tropical Horticultural Products,Zhanjiang,Guangdong 524091,China;2.College of Horticulture,Hainan University,Haikou,Hainan 570228,China Abstract:Mango is known as the“king of tropical fruits”for its unique flavor and rich n
6、utrition.However,mango is extremely perishable during postharvest ripening,and the decay loss caused by anthracnose is the most serious.There-fore,how to prevent and control mango anthracnose after harvest has become a bottleneck problem restricting the healthy development of mango industry.In this
7、paper,Tainong No.1 mango was used as the experimental material,and the green cinnamon essential oil composite chitosan lotion was used as the treatment means to study its control effect and mechanism on postharvest mango anthracnose,which would provide theoretical basis and practical reference for t
8、he development of postharvest mango storage,transportation and preservation industry in China.The results showed that the treatment of 0.5%cinnamon essential oil+0.3%chitosan had the best control effect on mango anthracnose,the treatment of 0.03%cinnamon essential oil could completely inhibit the gr
9、owth and spore production of mango anthrac-nose in vitro,and the treatment of 0.01%and 0.02%cinnamon essential oil had obvious destructive effect on mango 第 7 期 方 静等:肉桂精油复合壳聚糖乳液对采后芒果炭疽病的防治效果及作用机制 1461 anthracnose mycelium.The complex treatment significantly inhibited the expansion of mango anthracno
10、se disease spot,increased the content of disease resistance related substances lignin,total phenol(TP)and hydrogen peroxide(H2O2),and increased the content of disease resistance related enzymes phenylalanine ammonia lyase(PAL),peroxidase(POD),-1,3 glucanase(-1,3-GA)and chitinase(CHI).It can be seen
11、that cinnamon essential oil composite chitosan lotion has a good control effect on mango anthracnose by inhibiting or destroying the growth and spore production of mango an-thracnose mycelium,and inducing mango fruit to improve disease resistance.Therefore,the proper concentration of cinnamon essent
12、ial oil combined with chitosan lotion treatment would provide a new green way to control mango an-thracnose after harvest.Keywords:mango;anthracnose;cinnamon oil;chitosan;control effect DOI:10.3969/j.issn.1000-2561.2023.07.017 芒果(Mangifera indica L.)属漆树科芒果属植物,因果实营养丰富,风味独特,含有丰富的碳水化合物、糖、蛋白质、维生素及微量元素,被
13、誉为“热带果王”1。芒果在高温多雨季节采收,果实中水分含量较高,在采后极易受到病原菌侵袭引起腐烂变质,严重影响果实的商品货架期2。目前,用于芒果保鲜的方法主要有物理保鲜和化学保鲜,物理保鲜的方法主要有热处理、低温贮藏、气调贮藏等,但物理保鲜需要特殊的设备,成本高,难以在生产中推广应用;化学保鲜的方法主要有杀菌剂、抗生素和激素等,但化学保鲜会有药剂残留,对人体健康存在潜在的危害,并对环境造成不良影响3-4,随着人们食品安全意识的逐渐增强,以及持续用药导致病原菌的耐药性提高,杀菌剂的药效不断降低5-6。因此,急需研发一些安全高效、绿色环保、易推广应用的芒果采后炭疽病防治方法。壳聚糖(chitosa
14、n,CTS)是从虾、蟹、昆虫等低等动物和菌、藻类等动植物为原料提取出来的一种天然高分子化合物,因其具有无毒、成膜性好、抗菌性能广、对气体有选择渗透性等优点,已广泛应用于水果涂膜保鲜,可为水果提供良好的气调微环境,减少气体交换,延缓果实成熟7。已有研究表明,壳聚糖在甜瓜8、桃9、猕猴桃10等果实上具有良好的保鲜效果。然而,壳聚糖单独使用作为涂膜保鲜剂仍具有一定的局限性,由于亲水性基团的存在,强度、韧性不够,机械性能较差,一段时间后涂膜易断裂破碎,壳聚糖的抑菌性能也有限,不能很好地应用于果蔬保鲜。为了进一步提高壳聚糖的成膜性和抑菌性,通常会加入一些植物精油,在果实上涂膜形成可食用性薄膜。肉桂精油作
15、为天然提取物的植物精油,具有挥发性,无毒无害,因其具有良好的抗氧化性和抗菌活性,成为果蔬保鲜的研究热点。肉桂精油和壳聚糖联合使用可以提高单一壳聚糖涂膜的水汽渗透性能,增加其结构的稳定性,在果实表面形成一个高 CO2、低 O2的微环境,减少肉桂精油的蒸气扩散和损失,能够更好地抑制微生物生长和保持果实的贮藏品质。MA 等11研究发现,哈密瓜在 21 下贮藏 14 d,1%壳聚糖和 1%肉桂精油复合涂膜对病原菌和微生物的抑制效果最好。XING 等12利用 1%壳聚糖复合 0.25%肉桂精油涂膜处理甜椒,在 8 下贮藏 35 d 后,甜椒的病情指数低于 5%。BASAGLIA 等13利用 2%壳聚糖复
16、合 0.5%肉桂精油对鲜切菠萝进行涂膜处理,能够明显抑制病原菌的生长。黄文佳14研究发现,0.5%壳聚糖复合 0.3%肉桂精油对番木瓜炭疽病的防治效果最好,在 25 下贮藏15 d 后的防治效果为 92.5%。赵亚珠等15研究发现,用肉桂精油和壳聚糖等材料制备抗菌纸,可明显抑制甜樱桃病原真菌的生长,降低腐烂率。可见,肉桂精油和壳聚糖复合处理在采后果蔬上有明显的抗病及保鲜效果,但肉桂精油和壳聚糖复合处理在芒果保鲜上的应用鲜有报道,本研究以此为切入点,探索肉桂精油复合壳聚糖乳液对芒果炭疽菌的防治效果以及相关作用机制,为芒果采后贮运保鲜产业发展提供理论依据。1 材料与方法 1.1 材料 1.1.1
17、供试品种 台农 1 号芒果(Mangifera indica L.Tainong No.1),采收成熟度为七八分熟果实,留约 12 cm 果柄,挑选大小均匀、表面光滑、无病虫害、无机械损伤的果实,采后立即运回中国热带农业科学院南亚热带作物研究所采后保鲜实验室进行处理。1.1.2 化学试剂 马铃薯葡萄糖琼脂培养基1462 热带作物学报 第 44 卷(PDA),广东环凯微生物技术有限公司;壳聚糖(低粘度50%);1 级(病斑面积20%50%);2 级(病斑面积 10%20%);3 级(病斑面积10%);4 级(无病斑)。病情指数=(发病等级病害果数)/(发病最高级值总果数)100;防治效果=(对照
18、病情指数-处理病情指数)/对照病情指数100%。1.2.3 肉桂精油对芒果炭疽菌菌丝生长和产孢的影响 制作 PDA 平板,其中处理组 PDA 平板中分别含有 0.005%肉桂精油、0.01%肉桂精油、0.015%肉桂精油、0.02%肉桂精油、0.025%肉桂精油、0.03%肉桂精油,空白 PDA 平板为对照。取提前培养好的芒果炭疽菌平板,在菌落边缘打取直径为 5 mm 的菌块,接种到含肉桂精油的PDA 平板中央,28 恒温培养,用十字交叉法每天测量炭疽菌菌落直径,并在培养 7 d 后用血球计数板计量每个培养皿的产孢量,重复 3 次。1.2.4 菌丝形态结构观察 含肉桂精油的 PDA平板制作方法
19、同 1.2.3,用镊子将无菌盖玻片以45角斜插入 PDA 平板培养基中,并在平板上放入菌块,菌块与插片的间距为 1.01.5 cm,每皿插入 2 排 2 列载玻片,倒置放入 28 恒温培养箱培养,7 d 后取出附有炭疽菌菌丝的载玻片,用擦镜纸擦去载玻片背面的菌丝和培养基,置于显微镜下进行观察记录。1.2.5 芒果果实抗病相关物质含量和抗病相关酶活性的测定 芒果果实处理方法同 1.2.2,处理组为 0.5%肉桂精油+0.3%壳聚糖,清水处理为对照,分别在采后 0、3、6、9、12、15 d 时取样,取样部位为果实病健交界处的果皮组织,每处理 6 个果实,重复 3 次。木质素含量、总酚(TP)含量
20、、过氧化氢(H2O2)含量及苯丙氨酸解氨酶(PAL)、过氧化物酶(POD)、-1,3 葡聚糖酶(-1,3-GA)、几丁质酶(CHI)活性均采用苏州科铭生物技术有限公司生产的试剂盒进行测定。1.3 数据处理 采用 Excel 2010 软件统计试验数据,计算平均值和标准误差并制图;采用 SPSS 22.0 软件进行方差分析(ANOVA),利用 Duncans 多重比较分析显著性差异(P0.05)。2 结果与分析 2.1 肉桂精油复合壳聚糖乳液对芒果炭疽病的防治效果 由图 1 可知,对照组在贮藏第 6 天开始发病,各处理组在贮藏第 9 天开始发病,各处理组的病情指数明显低于对照组,在贮藏第 12、
21、15 天时,0.5%肉桂精油+0.3%壳聚糖的病情指数显著低于第 7 期 方 静等:肉桂精油复合壳聚糖乳液对采后芒果炭疽病的防治效果及作用机制 1463 其他处理组(P0.05),在贮藏第 15 天时,0.7%肉桂精油+0.3%壳聚糖、0.5%肉桂精油+0.3%壳聚糖、0.3%肉桂精油+0.3%壳聚糖和 0.3%壳聚糖处理 组 的 防 治 效 果 分 别 为 15.25%、22.03%、13.56%、10.17%,其中以 0.5%肉桂精油+0.3%壳聚糖处理组的防治效果最好,因此后续试验采用该组合处理。不同小写字母表示相同贮藏时间不同处理间 差异显著(P0.05)。Different smal
22、l letters indicate significant difference between different treatments at the same storage time(P0.05).图 1 肉桂精油复合壳聚糖乳液对芒果病情指数的影响 Fig.1 Effect of cinnamon essential oil and chitosan lotion on mango disease index 2.2 肉桂精油复合壳聚糖乳液对芒果炭疽病病斑直径的影响 由图 2 可知,从贮藏第 6 天开始,处理组的炭疽病病斑直径均显著低于对照组,其中以 0.5%肉桂精油+0.3%壳聚糖处
23、理的效果最佳,在贮藏6、9、12、15 d 时,0.5%肉桂精油+0.3%壳聚糖处理的病斑直径分别为 8.25、12.25、18.81、30.50 mm,分别比对照组低 33.03%、26.60%、22.85%、24.22%。2.3 肉桂精油对芒果炭疽菌菌丝生长和产孢的影响 由表 1 可知,芒果炭疽菌在含有不同浓度肉桂精油的平板上培养 7 d 后,处理组的菌落直径均显著小于对照(P0.05),随着精油浓度的增加,菌落抑制率逐渐增大,精油浓度为 0.03%时的菌落抑制率为 100.00%,说明肉桂精油的最低抑菌浓度为 0.03%。肉桂精油促进芒果炭疽菌产孢,其中 0.015%肉桂精油处理的产孢最
24、多,0.005%、0.01%、0.02%肉桂精油处理的产孢量也显著高于对照(P0.05),0.03%肉桂精油完全抑制产孢。不同小写字母表示相同贮藏时间不同处理间差异显著(P0.05)。Different small letters indicate significant difference between dif-ferent treatments at the same storage time(P0.05).图 2 肉桂精油复合壳聚糖乳液对芒果病斑直径的影响 Fig.2 Effect of cinnamon essential oil combined with chitosan lo
25、tion on diameter of diseased spots of mango 表 1 肉桂精油对芒果炭疽菌菌丝生长和产孢的影响 Tab.1 Effects of cinnamon essential oil on mycelial growth and sporulation of C.gloeosporioides 处理 Treatment 菌落直径 Colony di-ameter/mm菌丝抑制率 Mycelial inhi-bition rate/%产孢量 Spore numbersCK 84.0a 0.00 7.3106d 0.005%肉桂精油76.0b 9.52 23.91
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