中药养胃粉发酵饲料对脂多糖应激黄羽肉鸡免疫功能、肠道挥发性脂肪酸和微生物区系的影响.pdf
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1、动物营养学报,():中药养胃粉发酵饲料对脂多糖应激黄羽肉鸡免疫功能、肠道挥发性脂肪酸和微生物区系的影响马艳华 赵桂玲 冯 杰 牛 玉(濮阳职业技术学院,濮阳;浙江农林大学动物科技学院动物医学院,杭州;浙江大学动物科学学院,杭州)摘 要:本试验旨在研究中药养胃粉发酵饲料()对脂多糖()应激黄羽肉鸡免疫功能、肠道挥发性脂肪酸和微生物区系的影响。选择 日龄黄羽肉鸡 只,随机分为 组,分别为 组(基础饲粮)、组(基础饲粮 )和 组(基础饲粮 ),每组 个重复,每个重复 只,统计不同阶段(日龄、日龄和 日龄)的生长性能。日龄时从 组和 组的每个重复中选择 只肉鸡,分别记为 组和 组,在、日龄腹腔注射 ;
2、组剩余肉鸡(每个重复 只)记为 组,在、日龄腹腔注射等体积的生理盐水。在 日龄 应激处理 后屠宰取样。结果显示:)饲粮添加 可以显著降低 日龄和 日龄肉鸡的料重比(),提示 是 在肉鸡饲粮中的最佳添加剂量。)与 组相比,组胸腺指数和法氏囊指数显著降低(),血清白细胞介素()、白细胞介素()、白细胞介素()和肿瘤坏死因子()含量显著提高(),血清白细胞介素()和免疫球蛋白()、免疫球蛋白()、免疫球蛋白()含量显著降低();与 组相比,组肉鸡血清、和 含量显著降低(),血清 和、含量显著提高()。)与 组相比,组盲肠内容物中异丁酸、异戊酸和戊酸的含量显著降低();与 组相比,组盲肠内容物中上述挥
3、发性脂肪酸的含量均显著提高()。)盲肠微生物 多样性分析结果显示,组与 组肉鸡盲肠微生物区系更相似。与 组相比,组普雷沃氏菌科()和普雷沃氏菌科 不可培养细菌()的相对丰度显著升高();组互养菌门()的相对丰度显著升高(),未分类的毛螺菌科()的相对丰度显著降低()。由此可见,能增强 应激黄羽肉鸡的免疫功能,提高盲肠内容物中挥发性脂肪酸含量,调节肠道微生物区系平衡。关键词:中药养胃粉发酵饲料;黄羽肉鸡;免疫功能;挥发性脂肪酸;微生物区系中图分类号:文献标识码:文章编号:()收稿日期:基金项目:浙江省领军型创新创业团队项目();浙江省重点研发计划项目();浙江省重点研发计划项目();国家重点研发
4、计划政府间国际创新合作项目()作者简介:马艳华(),女,河南汝南人,讲师,硕士,研究方向为生物工程与技术。:通信作者:牛 玉,讲师,:中 药 养 胃 粉 发 酵 饲 料(,动 物 营 养 学 报 卷)是以优选的特定乳酸菌和特定酵母菌为发酵菌种,以黄芪、党参、陈皮、香附、白芍、山药、乌梅、甘草等经典养胃中药组方为发酵底物,通过深度固态发酵而获得的一种新型酵母培养物(,)。由于具有广泛的生物学功能、绿色环保等优势,酵母培养物逐渐被应用于畜牧生产中。研究发现,饲粮添加 (只)能够显著提高奶山羊的养分表观消化率、产奶性能,对血清抗氧化指标和免疫功能也具有显著的提高作用。等研究表明,能够有效提高肉鸡的生
5、长性能,改善肠道绒毛形态,增强机体免疫力。陈脊宇等也发现,在五黑鸡饲粮中添加 对于提高五黑鸡的生长性能、改善蛋品质和调节血清生化指标均具有较好的效果。等的研究表明,在热应激生长公牛饲粮中添加 可稳定瘤胃内环境,修复肠道屏障,提高免疫功能,改善机体代谢以及热应激状态。肉鸡由于生长周期短、饲养密度大,易受到多方面的应激,造成机体健康和免疫功能下降。脂多糖(,)又被称为内毒素,是革兰氏阴性菌细胞外壁的主要成分。通过腹腔注射 来构建肠道损伤模型已经获得广泛认可,大量研究证实 会造成肠道绒毛萎缩、改变肠道菌群、引起肠道炎症及免疫力降低等诸多不利影响。然而,中药养胃粉发酵饲料这种新型的 能否改善 应激黄羽
6、肉鸡的生长性能和健康状态尚不清楚。因此,本试验通过构建 应激模型来研究中药养胃粉发酵饲料对 应激黄羽肉鸡免疫功能和肠道微生物的影响,为应激条件下肉鸡的生长发育及肠道健康的营养调控策略提供理论依据。材料与方法 试验材料 本试验所使用中药养胃粉发酵饲料为褐色粉末状,发酵用的菌株为酿酒酵母和乳酸菌(总活菌数为 ),发酵底物为中药养胃粉(由黄芪、党参、陈皮、香附、白芍、山药、乌梅、甘草等组成)、豆粕及谷物副产品(玉米喷浆皮)。该中药养胃粉发酵饲料的营养成分含量如下:粗蛋白质,小肽 (占蛋白质的比例),甘露聚糖,总酸,中药多糖,水分。试验设计 试验选取 日龄健康黄羽肉鸡 只,随机分为 个组,每组 个重复
7、,每个重复 只肉鸡。组饲喂参照()营养需要配制而成的基础饲粮,该基础饲粮组成及营养水平见表。组和 组分别在基础饲粮基础上添加 和 中药养胃粉发酵饲料。饲喂 ,测定各阶段(日龄、日龄和 日龄)生长性能。根据生长性能结果,日龄时从 组和生长性能最佳组(组)的每个重复中随机选择 只肉鸡,分别记为 组和 组,在、日龄腹腔注射 ;组剩余肉鸡(每个重复 只)记为 组,在、日龄腹腔注射等量的生理盐水。试验鸡群采用单层笼养方式饲养于封闭鸡舍,饲养管理和免疫程序按常规进行。试验期间保证鸡只自由采食和饮水,每天光照。前 天鸡舍温度保持在 ,然后每周降低 直至(),相对湿度维持在。表 基础饲粮组成及营养水平(风干基
8、础)()项目含量 日龄 日龄 原料 玉米 豆粕 膨化大豆 玉米酒糟 米糠 玉米麸 豆油 石粉 发酵豆粕 磷酸氢钙 氯化钠 预混料)合计 营养水平 )代谢能 ()期马艳华等:中药养胃粉发酵饲料对脂多糖应激黄羽肉鸡免疫功能、肠道挥发性脂肪酸和微生物区系的影响续表 项目含量 日龄 日龄 粗蛋白质 赖氨酸 蛋氨酸半胱氨酸 钙 总磷 )预混料为每千克饲粮提供 :,泛 酸 ,烟 酸 ,生物 素 ,氯 化 胆 碱 ,载体为沸石 。)代谢能为计算值,其余为实测值。,样品采集 日龄时,在 应激处理 后,每个重复选择 只肉鸡先进行称重,然后颈部放血并采集 血液,在 下 离心 ,收集上层血清置于 保存,用于血清免疫
9、指标的测定;剖开腹腔后取胸腺、脾脏、法氏囊,用于计算免疫器官指数;无菌条件下取盲肠内容物,用于挥发性脂肪酸含量和微生物区系的测定。指标测定 生长性能 于试验第、和 天:(断料 ),分别以重复为单位对肉鸡进行称重,并统计余料量,计算平均日增重()、平均日采食量()和料重比()。试验期间,每天观察肉鸡的健康状况。如果有鸡只死亡,则立即称余料量和死鸡重,并记录数据,以消除死鸡对试验结果的影响。(平均终末体重平均初始体重)饲喂天数;平均阶段采食量 饲喂天数;平均阶段采食量 平均阶段增重。免疫器官指数 取胸腺、脾脏、法氏囊进行称重,用以下公式计算免疫器官指数:免疫器官指数()免疫器官重量()宰前活重()
10、。血清免疫指标 血清白细胞介素(,)、白细胞介素(,)、白细胞介素(,)、肿瘤坏死因子(,)、白细胞介素(,)、免疫球蛋白(,)、免疫球蛋白(,)和免疫球蛋白(,)含量均采用酶联免疫吸附试验()法进行测定,测定所用试剂盒购自南京建成生物工程研究所,按照试剂盒说明书进行操作。盲肠内容物中挥发性脂肪酸含量 盲肠内容物 解冻后,准确称取 加入超纯水 ,旋涡混匀,离心 。取上清液 ,加入 偏磷酸,旋涡混匀,并置于冰水浴中 ,下 离心 ,取上清液。采用安捷伦 气相色谱仪测定盲肠内容物中挥发性脂肪酸(乙酸、丙酸、丁酸、异丁酸、戊酸和异戊酸)含量。盲肠微生物区系 将无菌采集的盲肠内容物送至上海美吉生物医药科
11、技有限公司进行 测序。利用 测序平台对样品进行质控和过滤,然后根据 的相似度对序列进行扩增子序列变异(,)聚类,并进行 多样性(指数、指数、指数和 指数)和 多样性分析主成分分析(),并基于 在门水平、属水平和种水平上分析盲肠内容物中微生物的相对丰度及差异菌群。数据处理与分析 试验数据采用 软件进行单因素方差分析(),并用 氏法进行多重比较,结果用平均值标准误表示。表示差异显著。结果与分析 中药养胃粉发酵饲料对黄羽肉鸡生长性能的影响 由表 可知,与 组相比,组 日龄和 日龄的 显著降低()。肉鸡不同阶段的 和 在各组间均无显著差异()。动 物 营 养 学 报 卷表 中药养胃粉发酵饲料对黄羽肉鸡
12、生长性能的影响 项目组别 值平均日增重 ()日龄 日龄 日龄 平均日采食量 ()日龄 日龄 日龄 料重比 日龄 日龄 日龄 同行数据肩标不同小写字母表示差异显著()。()中药养胃粉发酵饲料对 应激黄羽肉鸡免疫器官指数的影响 由图 可知,与 组相比,应激显著降低了肉鸡的胸腺指数和法氏囊指数();与 相比,饲粮中添加 中药养胃粉发酵饲料有提高 应激肉鸡法氏囊指数和胸腺指数的趋势,但差异不显著()。数据柱形标注不同小写字母表示差异显著()。下图同。()图 中药养胃粉发酵饲料对 应激黄羽肉鸡免疫器官指数的影响 中药养胃粉发酵饲料对 应激黄羽肉鸡血清炎性因子含量的影响 由图 可知,与 组相比,组血清、和
13、 含 量 显 著 升 高(),血清 含量显著降低();与 组相比,饲粮中添加 中药养胃粉发酵饲料显著降低了血清、和 含量(),显著升高了血清 含量()。中药养胃粉发酵饲料对 应激黄羽肉鸡血清免疫球蛋白含量的影响 由图 可知,与 组相比,应激显著降低了肉鸡血清、和 含量();与 组相比,饲粮中添加 中药养胃粉发酵饲料能够显著提高 应激肉鸡血清、和 含量()。期马艳华等:中药养胃粉发酵饲料对脂多糖应激黄羽肉鸡免疫功能、肠道挥发性脂肪酸和微生物区系的影响图 中药养胃粉发酵饲料对 应激黄羽肉鸡血清炎性因子含量的影响 图 中药养胃粉发酵饲料对 应激黄羽肉鸡血清免疫球蛋白含量的影响 中药养胃粉发酵饲料对
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