内生真菌Alternaria sp.GHX-P17代谢产物防治广藿香青枯病及保护酶的变化.pdf
《内生真菌Alternaria sp.GHX-P17代谢产物防治广藿香青枯病及保护酶的变化.pdf》由会员分享,可在线阅读,更多相关《内生真菌Alternaria sp.GHX-P17代谢产物防治广藿香青枯病及保护酶的变化.pdf(8页珍藏版)》请在咨信网上搜索。
1、广藿香是著名药材青枯病是威胁广藿香生产和质量的主要病害 针对从广藿香茎叶中分离出的 株有抑菌活性的内生真菌 .研究其代谢产物对广藿香青枯病的防治作用及耐病机制 在室内通过人工接种 .菌株与喷施粗提物稀释液 种方式于不同时间调查广藿香青枯病的发病率和严重度并计算其病情指数()同时对处理后不同时间的广藿香苯丙氨酸 解 氨 酶()、过 氧 化 物 酶()和 超 氧 化 物 歧 化 酶()种保护酶活性进行测定 结果表明:().处理后青枯病 显著降低与对照比较 后 降低为.方差分析呈显著性差异(.)()随着处理时间延长青枯病严重度升高缓慢严重度等级降低到 时处理组的严重度明显低于对照防治效果达到.()处
2、理后的广藿香 种保护酶、和 活性均增强但 种酶活性高峰出现时间不同即 随时间逐渐升高 先升高后降低然后又升高出现 个峰值 快速升高后逐渐降低这表明内生真菌菌株 .可以提高广藿香 种保护酶活性延缓了青枯菌的侵染过程降低了青枯病的发病程度 该研究结果为植物内生真菌次级代谢产物活性成分研究及生物农药开发提供了参考关键词:内生真菌 代谢产物 防治作用 青枯病 广藿香 保护酶中图分类号:.文献标识码:文章编号:().收稿日期:基金项目:国家自然科学基金()国家中医药管理局全国中药资源普查项目()国家公共卫生服务补助资金项目财社()号第一作者:程小卿()硕士研究生主要从事药用植物与中药药剂研究().通信作
3、者:王利国博士主要从事中药材种质资源鉴定研究().(.):.().()()().:().(.).().().:广藿香()为唇形科刺蕊草属一年生草本植物干燥全草可入药是著名南药具有芳香化浊开胃止呕发表解暑之功效(李薇和徐鸿华)新的临床研究发现以广藿香为主打成分的宣肺败毒基础方剂在预防新型冠状病毒肺炎()方面也有不错的疗效(王钏等徐旭等)生产上广藿香青枯病()是威胁广藿香生产和质量的主要病害每年减产 广藿香青枯病是由茄科雷尔氏菌()引起的一种细菌性病害该菌被认为是热带与亚热带地区最重要的病原细菌之一可危害多种作物 茄科雷尔氏菌主要从根部伤口入侵穿过皮层进入维管束产生侵填体()和胼胝质()堵塞导管和
4、筛管引起寄主青枯死亡 青枯病属于土传病害较难防治除常规的农业防治和化学防治外多人也从生防角度对青枯病防治进行了研究 例如烟草作为典型青枯病指示植物()张欣悦等()从烟草根际分离出 株拮抗细菌菌株 和 用于防治室内烟草青枯病具有一定的防效 等()用 基因插入突变获得的无致病力青枯菌突变株番茄青枯病病情显著降低内生菌因长期定殖于宿主植物组织内与宿主协同进化二者形成了一种非常复杂的共生关系并影响着宿主植物各种成分的积累和对胁迫的应激反应()几乎所有被研究过的植物中均能检测到内生菌的存在这些内生菌分布广且具有丰富的生物多样性 药用植物是挖掘活性内生菌资源的重要宝库其内生菌群落组成丰度、定殖率、分离频率
5、、优势种群数量超过其他非药用植物 目前已从铁皮石斛()(胡 克 兴 等 周 琢 艳 等)、甘 草()(陈 静 等)、杜 仲()(梁 雪 娟 等)、拐枣()(.)、期程小卿等:内生真菌 .代谢产物防治广藿香青枯病及保护酶的变化茅苍术()(吕立新等)等药材中分离出具有不同生理活性的内生菌并通过对活性代谢物组分分析筛选出一批有新颖化学结构的潜在先导物为抗氧化、抗肿瘤、抗菌药物的研发开辟了新途径内生菌与宿主互作间产生的小分子次生代谢物对宿主的生长发育、系统防御以及宿主代谢产物的合成起着关键的调控作用(.)活性内生菌能够产生与宿主植物相同或相似的活性代谢物这些活性物质通过调控宿主防御酶合成关键基因的表达
6、而增强宿主的抗性反应(彭淑萍等)前期该文 团队对 种广藿香栽培品种牌香(.)和 湛 香(.)内生真菌群落结构组成进行了研究(王利国等)从牌香中分离出 株具有活性的内生真菌 鉴定为链格孢属真菌(.)通过室内平板对峙实验发现该菌株产生的代谢产物有较明显的抑菌活性 为进一步了解 .菌株及其代谢物对植物病害的防治作用机理探究内生菌与宿主防御酶基因表达之间的关系本文通过室内人工接种孢子悬浮液和喷施代谢产物粗提物两种方法测定处理后不同时间、和 种酶活性的变化方式及对广藿香青枯病的防治效果材料与方法.样品来源供试材料选用广藿香组培苗移栽于花盆室内培养至 以上 接种用青枯菌菌株 由广州中医药大学贺红教授提供菌
7、株购自广东省科学院微生物研究所菌种保藏中心 供试内生真菌菌株 由广州中医药大学中药种质资源与分子鉴定 团队从牌香上分离获得.菌株活化与样品提取青枯菌 菌株活化采用平板划线培养培养基 为 营 养 琼 脂 培 养 基()(北京奥博星)内生真菌 代谢产物采用悬浮液振荡培养用内径 的打孔器切取 平板上产孢的内生真菌菌块放于 液体培养基中振荡培养其中一组培养液振荡培养 后配成孢子数达 的孢子悬浮液备用另一组连续振荡培养 将已发酵的菌液在 下冻融 次后用超声波细胞破碎仪破壁(宁波新芝)以释放胞内产物 过滤去除菌丝体 滤液冷冻干燥 甲醇浸提配成母液备用.接种青枯菌接种参考刘丹等()的伤根浸泡方法 内生真菌接
8、种采用拇指蘸取含石英砂的孢子悬浮液轻轻涂抹在组培苗叶片的正面于饱和湿度下 暗培养 待侵染成功后将广藿香苗放回光照培养箱(上海一恒)照光培养光照强度 照光时长 同时将内生真菌提取液母液用无菌水稀释成.、.、.于接种保湿结束后喷施在组培苗叶片上隔天再喷施 次 实验设对照组对照组为同一批广藿香组培苗但未接种青枯菌()和喷施 代谢物实验重复 次每次每浓度处理 株.调查方法与数据处理接种后于、调查广藿香青枯 病 发 病 率()和 严 重 度 计 算 病 情 指 数()发病率()发病株数/调查总株数 病情指数()(各级病株数各级严重度)/(调查总株数最高严重度)广藿香青枯病严重度划分标准参考中华人民共和国
9、国家标准/关于烟草青枯病分级调查方法及芝麻青枯病严重度分级标准(李信申等)广藿香青枯病标准如下:级为全株无病 级为茎基部病斑散射状、病斑不连续呈狭长型叶片不凋萎 级为茎基部病斑合并环绕茎围不超过/的叶片轻度凋萎下部少数叶片出现青枯 级为病斑超过茎围的/但未全部环绕茎围/叶片青枯 级为茎部病斑环绕茎围/以上叶片凋萎或青枯 级为病株青枯死亡用 .软件中的皮尔森相关系数()法对处理组和对照组发病率和病情指数相关性进行分析采用单因素方差分析()中的 检验进行差异显著性分析 当.时差异显著.、及 活性测定接种 后 定 时 取 样 测 定 超 氧 化 物 歧 化 酶()、过 氧 化 物 酶广 西 植 物
10、卷()和 苯 丙 氨 酸 解 氨 酶()活性 测定参照李合生等()的方法以 下 值变化.为 个酶活性单位()活性大小以每克蛋白的酶单位()表示 活性采用愈创木酚法进行测定以每分钟每克蛋白的 值()表示 活性以抑制 光还原 为 个酶活性单位以每克蛋白的单位数()表示 使用日本岛津公司的 型紫外可见分光光度计测定 值以标准牛血清蛋白为对照计算总可溶性蛋白含量以未接种和未喷施 的广藿香为空白对照 实验重复 次结果与分析.青枯病严重度变化接种青枯菌 后对照广藿香靠近茎基部开始出现少量褪色斑病斑呈散点状达到严重度 级(图:)到 时严重度为 级的广藿香达到症状显示为茎基部病斑向上延伸扩大环绕茎围超过/下部
11、叶片出现少量青枯死亡(图:)到 时病斑连片绕茎呈黑褐色大部分广藿香青枯死亡严重度为 级(图:).代谢产物对青枯病的防治作用由表 可知不同浓度处理的广藿香与对照比较青枯病发病率变化不大 检验表明处理组与对照组无显著性差异(.)后平均发病率为.到 时处理组发病率为.对照组发病率为 随着处理时间的延长 提取液可以有效减缓广藿香青枯病发病程度表现为青枯病严重度降低 减少 由表 可知随着喷施浓度增加和时间的延长防治效果开始显现 处理后 喷施了浓度为.和.的广藿香青枯病 显著低于对照组和.处理组 检验呈显著性差异(.)到 时.和.处理组的广藿香平均 为.而对照组为.防效达.保护酶活性变化.广藿香接种青枯菌
- 配套讲稿:
如PPT文件的首页显示word图标,表示该PPT已包含配套word讲稿。双击word图标可打开word文档。
- 特殊限制:
部分文档作品中含有的国旗、国徽等图片,仅作为作品整体效果示例展示,禁止商用。设计者仅对作品中独创性部分享有著作权。
- 关 键 词:
- 内生真菌Alternaria sp.GHX-P17代谢产物防治广藿香青枯病及保护酶的变化 真菌 Alternaria sp GHX P17 代谢 产物 防治 广藿香 青枯病 保护 变化
1、咨信平台为文档C2C交易模式,即用户上传的文档直接被用户下载,收益归上传人(含作者)所有;本站仅是提供信息存储空间和展示预览,仅对用户上传内容的表现方式做保护处理,对上载内容不做任何修改或编辑。所展示的作品文档包括内容和图片全部来源于网络用户和作者上传投稿,我们不确定上传用户享有完全著作权,根据《信息网络传播权保护条例》,如果侵犯了您的版权、权益或隐私,请联系我们,核实后会尽快下架及时删除,并可随时和客服了解处理情况,尊重保护知识产权我们共同努力。
2、文档的总页数、文档格式和文档大小以系统显示为准(内容中显示的页数不一定正确),网站客服只以系统显示的页数、文件格式、文档大小作为仲裁依据,平台无法对文档的真实性、完整性、权威性、准确性、专业性及其观点立场做任何保证或承诺,下载前须认真查看,确认无误后再购买,务必慎重购买;若有违法违纪将进行移交司法处理,若涉侵权平台将进行基本处罚并下架。
3、本站所有内容均由用户上传,付费前请自行鉴别,如您付费,意味着您已接受本站规则且自行承担风险,本站不进行额外附加服务,虚拟产品一经售出概不退款(未进行购买下载可退充值款),文档一经付费(服务费)、不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。
4、如你看到网页展示的文档有www.zixin.com.cn水印,是因预览和防盗链等技术需要对页面进行转换压缩成图而已,我们并不对上传的文档进行任何编辑或修改,文档下载后都不会有水印标识(原文档上传前个别存留的除外),下载后原文更清晰;试题试卷类文档,如果标题没有明确说明有答案则都视为没有答案,请知晓;PPT和DOC文档可被视为“模板”,允许上传人保留章节、目录结构的情况下删减部份的内容;PDF文档不管是原文档转换或图片扫描而得,本站不作要求视为允许,下载前自行私信或留言给上传者【自信****多点】。
5、本文档所展示的图片、画像、字体、音乐的版权可能需版权方额外授权,请谨慎使用;网站提供的党政主题相关内容(国旗、国徽、党徽--等)目的在于配合国家政策宣传,仅限个人学习分享使用,禁止用于任何广告和商用目的。
6、文档遇到问题,请及时私信或留言给本站上传会员【自信****多点】,需本站解决可联系【 微信客服】、【 QQ客服】,若有其他问题请点击或扫码反馈【 服务填表】;文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“【 版权申诉】”(推荐),意见反馈和侵权处理邮箱:1219186828@qq.com;也可以拔打客服电话:4008-655-100;投诉/维权电话:4009-655-100。