鬼伞属中国新记录种——椰枣色孢鬼伞.pdf
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1、书书书第 卷 第 期东北林业大学学报 年 月 )山 西 省 黄 土 高 原 食 用 菌 重 点 实 验 室 项 目();食 用 菌 山 西 省 科 技 创 新 重 点 团 队 项 目()。第一作者简介:武艳群,女,年 月生,山西农业大学食品科学与工程学院,硕士研究生。:。通信作者:王术荣,山西农业大学食品科学与工程学院、山西省食用菌工程技术研究中心,副教授。:。收稿日期:年 月 日。责任编辑:韩有奇。鬼伞属中国新记录种 椰枣色孢鬼伞)武艳群何轶榕刘淑琴王腾云孟俊龙常明昌王术荣(山西农业大学,太谷,)摘要对采自山西省五台山自然保护区的一份鬼伞属标本进行详细的形态学观察,包括其菌盖、菌柄、菌褶等宏
2、观结构以及孢子、担子、囊状体等微观结构。结果表明:其主要特征为子实体较小;菌盖白色至黄褐色,直径 ;菌褶直生,微微发黄,从白色逐渐变成黑褐色,致密,长度不一,不等长;孢子为暗褐色,椭圆形至宽椭圆形,表面光滑,()();担子()(),具有 个担子小梗;缘囊体()(),无其他囊状体。通过 内转录间隔区()的特异性扩增、序列比对,发现该标本的序列与椰枣色孢鬼伞()的序列相似度高达 。基于内转录间隔区序列,采用最大似然法()、贝叶斯分析法()构建的系统发育树也支持此物种为椰枣色孢鬼伞(),支持值分别为 、。综合形态学、分子鉴定以及系统发育树的分析,确定采自山西省五台山自然保护区的大型真菌标本为鬼伞属中
3、国新记录种 椰枣色孢鬼伞。关键词鬼伞属;鉴定;分子系统发育;新记录种分类号 ;:,(,),():,:;,;,;,()(),;()();()(),(),()(),()(),;鬼伞属()隶属于伞菌纲(),伞菌目(),伞菌科(),是 于 年创立的。鬼伞属的模式种是灰色鬼伞()。鬼伞属是高等担子菌里研究较为集中的一个属,该属的特点是具有自溶的片层以及深色的孢子 ,经常食用的鸡腿菇就是鬼伞属的一种 毛头鬼伞()。国外对鬼伞属的研究始于 年,对晶粒鬼伞()进行了详细的观察,未发现菌褶腔;年 研究了古巴鬼伞()的个体发育过程,认为其与绒毛鬼伞()亲 缘 关 系 相 近;年,将鬼伞属分成 、三个部分,并对部分
4、物种进行了详细的描述;年 研究了鬼伞属 个种的个体发育组织结构的形成,并试图建立这些种的系统发育关系。国内对鬼伞类的研究最早始于周宗璜 ,年,他先后发表了关于鬼伞菌子实体的发育、茸毛鬼伞菌的个体发育、鬼伞菌类个体发育的 篇文章,在鬼伞类的个体发育研究中取得了重要进展;年邓叔群 在 中国的真菌 描述了我国鬼伞属真菌 种,随后 年戴芳澜 在其著作 中国真菌总汇 中记录了该属 种;年卯晓岚 收录了该属 种,之后臧穆 、毕志树 、张东柱 、张树庭等 分别在其论著中对鬼伞属真菌物种进行了补充。五台山是国家 级旅游景区,国家地质公园,是国家自然与文化的双重遗产 ,位于山西省忻州市、五台县东北部,地处北纬
5、、东经 ,属于太行山系的北端,总面积 。五台山地层主要是以前寒武系地层为主,植被主要以草地为主,全年平均气温为 。五台山完整的地层、多样化的植被类型、适宜的气候,赋予了五台山生物的丰富性,蕴藏着丰厚的菌物资源 。年,研究者在对山西省五台山自然保护区的野生大型真菌资源进行调查时,发现一种鬼伞属的物种,并对其进行了详细的形态学观察和分子系统发育分析,鉴定结果显示,该物种与 在 年发表的椰枣色孢鬼伞()是同一物种,属于中国鬼伞属的一个新记录物种。鉴于此,本研究对其进行了详细的形态描述,并与其近似种进行了比较。材料与方法供试验的鬼伞属标本(份)采自于山西省五台山自然保护区,编号 (),现存放于山西农业
6、大学菌物标本馆()中。形态学鉴定采用宏观观察和显微观察相结合的方法。宏观特征的观察主要包括子实体颜色、形状、大小等;显微结构观察在光学显微镜()下进行,用质量分数为 的 溶液作为浮载剂,主要观察孢子和担子的颜色、形状以及测量其大小等。在 倍物镜下,随机选择 个成熟孢子、担子进行测量,计算孢子的大小范围、长宽比()。的提取、扩增和测序:使用 试剂盒,从干燥的真菌子实体中提取基因组 ,测定 质量摩尔浓度后,将提取的 置于 条件下保存,备用。以提取的基因组 作为模板,遵循 和 协议 ,使用引物对 用于内转录间隔区域的聚合酶链式反应()扩增,反应扩增程序:,;个循环(,;,;,);,。扩增后的产物进行
7、琼脂糖凝胶电泳检测,电泳程序为 ,检测合格的产物用 试剂盒纯化后,送往生物工程(上海)有限公司进行正反向测序。内转录间隔区序列处理和系统发育分析:将测序得到的内转录间隔区序列在分子进化遗传学分析软件()中进行复检,经过人工校正排除程序误读。然后将序列放入国家生物技术信息中心()网站的基于局部比对算法的搜索工具()中进行比对,得到序列的相似度信息,确定其所在属和相似种。将测序所得的序列和从 中得到的近似种序列用 软件中的多序列比对工具()进行比对,进行手工调整对齐。以烟云杯伞(序列号 )做外类群,用 软件采用最大似然法(),选择 作为最佳模型,自举值 次构建系统发育树。用简约性系统发育分析软件(
8、)对序列进行格式转换,用核苷酸替换模型 、等对片段进行模型选择,基于赤池信息量准则()选择 为最佳模型,采用贝叶斯分析法 (),使用贝叶斯软件()构建系统发育树,形成的树文件用软件 查看并编辑,节点支持值由最大似然法支持率或贝叶斯后验概率共同组成。结果与分析 椰枣色孢鬼伞的形态学分析子实体(图 )小型。未成熟时菌盖是钟形,中央为黄褐色,边缘颜色逐渐呈白色;成熟后菌盖会慢慢展开,展开后菌盖中央呈现褐色,边缘变为灰色;菌盖直径 ;表面附有许多黄褐色鳞片,具条纹,成熟后沿着条纹开裂,逐渐自溶。菌肉较薄,白色至浅灰色。菌褶直生,致密,初期为白色,成熟后颜色渐深,呈灰色至黑色,不等长。菌柄中生,白色,长
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