刺梨果渣天然替抗的制备及其在饲料添加剂中的应用.pdf
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1、饲料营养与饲草692023.120 引言近年,非洲猪瘟等疫病蔓延流行,饲料抗生素滥用,严重威胁着人们的健康,国家农业农村部公告自2020年1月1日起,禁止生产除中药外所有促生长类药物饲料添加剂,抗生素危及人类健康,畜牧养殖业禁用抗生素,饲料禁抗成为定局,中药抑菌物质的提取替代抗生素已成为当下的研究热点。天然替抗剂的研发成为当下研究热点,中药中很多天然抑菌物质具有抗菌、抗应激、改善肠胃生态及提高畜禽免疫力等功能。由于中草药天然提取物受成本高昂、季节性要求强等因素制约1。开发低投入、高安全、性能稳供试用推广的天然替抗剂成为农副食品加工业的重要研究方向2。刺梨是一种水果,也是一种中药材,有健胃、消食
2、及止泻等功效。刺梨果渣是贵州省的一种重要的农业原材料,产量可达750104 t,可以提供30104 t的果渣,根据万州汇源的柑橘渣的经济效益利润计算,将这些果渣作为可再次使用的原材料,可以为贵州省带来超过2亿元的经济效益3。研究发现,刺梨果渣富含黄酮、维生素C(简称VC)、总酚等功能性物质,其总酚含量是菠萝渣的4.4倍,苹果渣的3.7倍;维生素C含量是菠萝渣的23.8倍,是苹果渣的20.7倍;其中占比较大的总酚、黄酮、维生素C能够有效地抑制金黄色葡萄球菌、霉菌收稿日期:2023-11-03作者简介:杨胜红(2000-),男,贵州台江人,苗族,专科,研究方向:饲料添加剂资源化开发利用、香猪养殖喂
3、养。*通信作者简介:周聃(1986-),女,安徽马鞍山人,汉族,博士,教授,研究方向:教育领导力、职业教育管理。杨胜红,洪源,兰方林,等梨果渣天然替抗的制备及其在饲料添加剂中的应用J现代畜牧科技,2023,103(12):69-72 doi:10.19369/ki.2095-9737.2023.12.018YANG Shenghong,HONG Yuan,LAN Fanglin,et alPreparation of Natural Substitute of Roxburgh Rose Fruit Residue and Its Application in Feed AdditivesJM
4、odern Animal Husbandry Science&Technology,2023,103(12):69-72刺梨果渣天然替抗的制备及其在饲料添加剂中的应用杨胜红,洪源,兰方林,宋吉琴,陈潘慧,杨沛杰,邓斌,曹贵霞,沈丹,周聃*(贵州轻工职业技术学院,贵州 贵阳 550025)摘要:刺梨产业当下发展盛行,加工中产生的刺梨果渣占果实重量50%,仍残留大量维生素、黄酮、总酚等功能性物质。该文采用溶剂法进行制备刺梨果渣天然替抗试验,测定提取物的抑菌活性并应用于饲料添加剂中探究提取物的抑菌力,提取刺梨果渣中的天然抑菌物质替代抗生素,量化研究分析其在饲料添加剂中的应用。结果表明,得出刺梨果查天
5、然抑菌提取物能够对细菌、霉菌等产生抑制作用,可以作为天然添加剂原料应用于饲料及其他农副产品中。关键词:刺梨果渣;替抗制备;饲料添加剂;资源化利用中图分类号:S816.7文献标识码:Adoi:10.19369/ki.2095-9737.2023.12.018Preparation of Natural Substitute of Roxburgh Rose Fruit Residue and Its Application in Feed AdditivesYANG Shenghong,HONG Yuan,LAN Fanglin,SONG Jiqin,CHEN Panhui,YANG Peiji
6、e,DENG Bin,CAO Guixia,SHEN Dan,ZHOU Dan*(Guizhou Light IndustryTechnical College,Guiyang Guizhou 550025,China)Abstract:The development of Roxburgh Rose Fruit is popular currently,the processing of Roxburgh Rose Fruit residue accounted for 50%of the fruit weight,with abundant vitamins,flavonoids,tota
7、l phenols and other functional substancesThe solvent method was used to prepare natural antibiotics substitute of Roxburgh Rose Fruit residue,and to determine the antibacterial activity of the extract and then apply it to feed additives to explore antibacterial motives of the extract,in order to ext
8、ract the natural antibacterial substances in Roxburgh Rose Fruit residue instead of antibiotics and to quantitatively study and analyze its application in feed additivesThe results showed that the natural antibacterial extract of Roxburgh Rose Fruit can inhibit bacteria and mold,and can be used as a
9、 natural additives in forages and other subsidiary agricultural productsKeywords:Roxburgh Rose Fruit residue,antibiotics substitute preparation,feed additives,resource utilization饲料营养与饲草70 2023.12等细菌的生长4-7。相比于其他果渣农副产物,刺梨果渣具有较高的药用价值和开发价值8。因此选用废物刺梨果渣为原材料,提取刺梨果渣中天然的抑菌物质,研究其对常温下的抑菌能力,以果渣或其他地源性农副产物综合利用提供
10、思路,将刺梨果渣饲料资源化利用,为我国饲料行业的发展献出一份力,也将推动中国的畜牧业发展。1 材料与方法1.1 材料、试剂与设备材料:刺梨果渣;大肠杆菌、金黄葡萄球菌、酵母菌、霉菌由学院生物发酵试验室提供。试剂:氯化钠、草酸、碳酸氢钠、无水碳酸钠、亚硝酸钠(95%)、氢氧化钠500 g、平板计数琼脂(PCA)、营养琼脂(NA)、L-半胱氨酸、胰蛋白胨250、芦丁、偏磷酸(38%)、磷酸三钠(分析纯、无水乙醇、马铃薯葡萄糖琼脂、磷酸二氢钾(分析纯)、福林酚、高岭土(化学纯)、酵母浸膏500 g(广东环凯微生物科技有限公司);LS85 200 g(北京清源食品添加剂有限公司);食用葡萄糖粉(优级,
11、黑龙江金象生化有限责任公司);甲醇500 mL(分析纯,广州市锦源化学有限公司);没食子酸(99%,上海麦克林生化科技股份有限公司)。设备:粉碎机;数显恒温水浴锅;KS-500DE液晶超声波清洗器;202-3AB 电热恒温干燥箱;SPX-150B生化培养箱;电子分析天平;紫外光分光光度计;MA110电子天平。1.2 方法1.2.1 果渣提取液的制备流程干燥后的刺梨果渣经粉碎过筛(60目筛)称重(50 g)乙醇混合(65%)采用溶剂法提取过滤选取滤液真空浓缩提取液。经串联与并联试验得出的最佳提取工艺对刺梨果渣进行提取,将提前烘干的刺梨果渣,用粉碎机进行粉碎,用60目筛来对刺梨果渣粉末进行筛选,筛
12、选出30 g刺梨果渣粉末作为备用,将农副产物果渣粉末加入其体积分数65%乙醇溶液中进行混合搅拌,然后使用超声波清洗器设备进行果渣物质的提取,设定温度45、提取时间65 min将得到的混合液过滤,后将所得的滤液置于水浴中加热处理,蒸发浓缩至没有乙醇味后用容量瓶进行存放,然后低温保存备用。1.2.2 刺梨果渣最佳提取条件研究设计出串联与并联的最佳提取工艺寻找试验,总共做出36组试验。通过这36组提取工艺得到提取液进行抑菌试验,最后通过试验结果对比分析得到最佳的提取工艺(提取温度45、料液比115、提取时间65 min、乙醇体积分数65%)。采用最佳提取工艺对刺梨果渣进行制作提取液,测定提取液中的V
13、C、总酚、黄酮含量。1.2.3 果渣提取液抑菌物质的相关含量测定(1)刺梨果渣提取液之中的VC含量的测定。在VC的含量测定中,为测定刺梨果渣中VC的含量,使用2,6-二氯靛酚标准溶液进行还原滴定,以测定L(+)-抗坏血酸的提取液中VC的含量。滴定终点为2,6-二氯靛酚被还原为无色透明物质使。在酸性环境下多余的2,6-二氯靛酚将呈现淡粉色。可以计算2,6-二氯靛酚的消耗量,进而推算出刺梨果渣中VC的含量。其中VC含量X1见公式(1)计算:X1=(1)公式(1)中:试样L(+)的抗坏血酸含量简称为X1,对2,6-二氯靛酚溶液的滴定体积简称为V,对滴定前的2,6-二氯靛酚初始体积简称为V0,对2,6
14、-二氯靛酚的滴定浓度简称为T,对稀释倍数简称为A。m代表刺梨果渣质量(g)。(2)提取物总酚含量的测定。采用福林酚分光光度法,测定刺梨果渣提取液中的总酚含量。酚类化合物在碱性条环境下将磷钨钼酸还原成蓝色化合物,吸光度与酚类化合物的含量在一定浓度范围内成正比,结合果渣提取液的吸光度绘制标准曲线。通过刺梨果渣提取液的稀释倍数可以计算出提取液中的总酚含量。提取液中总酚含量X2见公式(2)计算:X2=(2)c表示标准曲线计算所得的果渣提取液中总酚含量(mg/L),10为滤液稀释倍数;n表示果渣提取液的稀释倍数。图1为刺梨果渣提取液中总酚含量吸光度标准曲线。图1 吸光度标准曲线(3)刺梨果渣提取液的总黄
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