LncRNA HULC在结直肠癌组织中的表达及临床意义%28附50例%29.pdf
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1、消化肿瘤【】在结直肠癌组织中的表达及临床意义(附 例)陈存宝肖瑞雪李建祺甄亚男山东第一医科大学第三附属医院(山东省医学科学院附属医院)胃肠外科山东 济南 山东第一医科大学(山东省医学科学院)胃肠病研究所(临床中心)山东 济南 山东第一医科大学第三附属医院病理科山东 济南【摘要】目的:研究长链非编码()在结直肠癌()组织和癌旁组织中的表达及其与 患者临床特征的相关性评价其作为 诊断标志物的可能性 方法:收集 至 于我院行 根治术且经病理确诊的 例原发性 患者癌及癌旁正常组织(距癌周)通过实时荧光定量聚合酶链反应()分析 对相匹配的 组织和癌旁组织中 的表达 通过配对 检验分析 组织和癌旁组织之间
2、的差异性 进行单因素 方法分析 的表达与患者临床病理特征的关系通过建立 曲线以评估 用于 诊断的价值 结果:在 组织中的 值(.)较癌旁组织中 值(.)低说明 在癌组织中的真正表达高于癌旁组织差异有统计学意义(.)癌组织中 的表达与 的分化程度(.)、淋巴结转移(.)、分期(.)相关差异有统计学意义 在 组织及癌旁组织中表达的 曲线下面积为.差异有统计学意义 结论:在结直肠癌组织中呈过表达且癌组织中 的表达与 的分化程度、分期、淋巴结转移有关对 的诊断可能有一定的参考价值【关键词】长链非编码 结直肠癌肿瘤标志物荧光定量聚合酶链反应【中图分类号】.【文献标识码】:./.【文章编号】()()().
3、【】:().:().().:(.)(.)(.).(.)(.)(.).:【收稿日期】【修回日期】【作者简介】陈存宝()男山东聊城人硕士医师主要从事胃肠肿瘤研究工作 :.【通信作者】甄亚男()男山东德州人博士副主任医师主要从事胃肠肿瘤研究工作 :.陈存宝等 在结直肠癌组织中的表达及临床意义(附 例).【】():随着人们生活水平质量的提高饮食结构的改变中国人群结直肠癌()的发病率正在逐年上升尤其是年轻人群的发病率升高极为明显有数据显示:的发生率和死亡率在全部恶性肿瘤中分别位居第 和第 位 中国目前已经成为全球 每年新发病例数和死亡病例数最多的国家我国人民群众的身体健康正在被 严重威胁 目前 患者的预
4、后主要依赖于肿瘤的病理分期有可靠数据显示:期 患者的 年总生存率较高几乎可以达到 而期 患者的 年生存率仅仅不超过 因此在人群中筛查出早期 患者并进行治疗是改善 患者预后的最佳方式 长链非编码()是一类转录长度大于 个核苷酸的 大分子它最早发现于 世纪 年代初期起初 被认为是基因组转录的“噪音”是 聚合酶 转录的副产物不具有生物学功能 随着高通量测序技术及生物信息学的发展人们发现 可以充当 的“海绵”它具有与 表达相关的一些特异性结合位点通过吸附结合特定的 竞争性抑制 与靶标的结合进而调控靶基因的表达 ()是一 种 公 认 的 在 肝 癌 组 织 中 呈 显 著 高 表 达 的研究表明 可能作
5、为一种内源性的“海绵”下调了一系列()的活性包括 抑制 可以减少其靶基因 的翻译作用进而诱导 的磷酸化大大加强了 的转录活性最终加强了肝癌细胞的增殖和侵袭能力 等人研究发现 在胃癌组织中的表达显著高于癌旁组织中的表达且 的相对表达量与胃癌的 分期()、分化程度和肿瘤淋巴结转移密切相关目前 在 中的表达及作用机制尚不明确因此本研究针对 在 组织中的表达进行了研究本研究通过实时荧光定量 法检测了 在 组织及癌旁组织中的表达分析了 与 患者临床病理特征的相关性探讨了 是否具有成为 患者全新的诊断标志物的潜力为 的早诊早治提供新的思路和见解 材料与方法.标本组织的收集所有 组织及癌旁组织均来自于 年
6、月 年 月在我院行 根治术且经病理证实的 例原发性 患者其中男性 例女性 例中位年龄 岁直肠癌 例结肠癌 例病理分型均为腺癌 所有标本均放置于 冰箱中储存 患者纳入标准:病理诊断为原发性结直肠腺癌无远处转移临床资料完整入组的 组织标本在显微镜下肿瘤坏死比例 排除标准:术前接受过放疗、化疗、免疫和靶向等辅助治疗合并其他恶性肿瘤患者患有自身免疫性疾病和慢性疾病的患者 本 研 究 获 得 我 院 伦 理 委 员 会 批 准(伦 理 号:)患者均签署知情同意书.主要试剂与仪器 试剂、逆转录试剂盒及 试剂均购自 公司引物由上海生工生物工程公司合成 通过 实时荧光定量 仪器检测通过 序列检测系统分析获得的
7、实时荧光定量聚合酶链反应()数据.提取应用 法提取 及癌旁组织标本细胞总 操作如下:标本裁剪为 样本置入离心管管内滴注 研磨打碎室温静置 分钟 环境下离心机 /工作()移液器取上清液至新离心管加样本液.倍体积乙醇(.)涡旋 秒 装入 收集管中离心机 /工作 ()过滤废液取 混合液移至收集管剩余混合液加 /离心机 /工作 ()倒弃滤液 柱中央区滴注 反应液室温 静置 滴注 /静置 离心机 /工作 过滤废液滴注 再次离心工作 移液至收集管空管离心 甩干管中的基质 移液至新的.离心管加入 静置 再次离心 将制备出的 用核酸蛋白分析仪 测定浓度后储存在 冰箱.合成提取各标本 到 管中进行反转录:每只
8、管同时加入 、纯水 孵育 分钟 孵育 分钟 取出 管加入 、.、纯水.孵育 分钟 孵育 分钟 孵育 分钟 孵育 分钟 将制备好的 储存在 冰箱.实时荧光定量聚合酶链反应()本实验以 为内参对照实验中所用引物均由上海生工生物工程公司设计合成(表)以 总 进行反转录 以反转录产物为模板进行 反应体系为 反应条件为 预变性 分钟 变性 秒退火 秒 延伸 秒 个循环.统计学方法使用 .软件(美国)和 .软件(美国)对数据结果进行统计分析计量资料数据采 检验数据服从正态分现代肿瘤医学 年 月 第 卷第 期 .布采用平均值 标准差()表示两组数据均值间比较采用独立样本 检验组内前后数据均值间比较采用配对
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