miR-145、miR-210、Lp-PLA2与缺血性脑卒中患者颈动脉狭窄的关联性分析.pdf
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1、论著545脑与神经疾病杂志2 0 2 3年第31卷第9 期miR-145、mi R-2 10、Lp-PLA 2 与缺血性脑卒中患者颈动脉狭窄的关联性分析陈燕童天夫季丰邵良发戴建刚夏柏田志明许立新【摘要】目的探讨微小RNA-145(m i R-145)、微小RNA-210(m i R-2 10)、脂蛋白相关磷脂酶A2(Lp-PLA 2)与缺血性脑卒中(IS)患者颈动脉狭窄的关联性。方法选取东南大学附属中大医院江北院区2 0 19 年8 月至2 0 2 2 年8 月IS患者10 6 例,按照颈动脉超声检查分为狭窄组(存在颈动脉狭窄)、无狭窄组(无颈动脉狭窄)。采集两组一般资料,检测比较两组miR-
2、145、m i R-2 10、Lp-PLA 2 水平,应用Logistic回归分析观察IS患者颈动脉狭窄的影响因素,并比较不同颈动脉狭窄程度患者miR-145、mi R-210、Lp-PLA 2 水平,分析miR-145、mi R-2 10、Lp-PLA 2 水平间相关性。结果狭窄组血清miR-145、miR-210水平低于无狭窄组,血浆Lp-PLA2水平高于无狭窄组(P0.05);Lo g i s t i c 回归分析发现,吸烟史、糖尿病、高血压、三酰甘油、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、C反应蛋白、miR-145、mi R-2 10、Lp-PLA2水平、NIHSS评分均属IS患者颈动脉狭窄的
3、影响因素(P0.05);血清miR-145、m i R-2 10 水平组间比较,重度狭窄患者 中度狭窄患者 中度狭窄患者 轻度狭窄患者(P0.05);Sp e a r ma n 相关性分析显示,血清miR-145、mi R-2 10 水平与患者颈动脉狭窄程度呈负相关,血浆Lp-PLA2水平与患者颈动脉狭窄程度呈正相关(P0.05);Pe a r s o n 相关性分析显示,IS颈动脉狭窄患者血清miR-145与miR-210水平呈正相关,与血浆Lp-PLA2水平呈负相关,miR-210水平与血浆Lp-PLA2水平呈负相关(P0.05)。结论miR-145、mi R-2 10、Lp-PLA 2
4、水平与IS患者颈动脉狭窄发生及狭窄程度有关,可能协同参与了颈动脉狭窄进展过程。【关键词】微小RNA-145;微小RNA-210;脂蛋白相关磷脂酶A2;缺血性脑卒中;颈动脉狭窄中图分类号:R743.32文献标识码:A文章编号:10 0 6-351X(2 0 2 3)0 9-0 545-0 6Association analysis of miR-145,miR-210,Lp-PLA2 and carotid artery stenosis in patients with ischemicstrokeChen Yan,Tong Tianfu,Ji Feng,Shao Liangfa,Dai Ji
5、angang,Xia Bai,Tian Zhiming,Xu lixinDepartonent of Labaratory,Jiangbei Hospital,Zhongda Hospital Affiliated to Southeast University,Nanjing 210000,ChinaCAbstract1 Objective To investigate the association between microRNA-145(miR-145),microRNA-210(miR-210),lipoprotein-associated phospholipase A2(Lp-P
6、LA2)and carotid artery stenosis in patients withischemic stroke(IS).Methods A total of 106 patients with IS from August 2019 to August 2022 in the Departmentof Laboratory,Jiangbei Hospital of Zhongda Hospital Affiliated to Southeast University were enrolled and divided intostenosis group(carotid art
7、ery stenosis)and no stenosis group(no carotid artery stenosis)according to carotid ultrasound.The general data of two groups were collected,the levels of miR-145,miR-210 and Lp-PLA2 were detected andcompared,and the influencing factors of carotid artery stenosis in ischemic stroke patients were obse
8、rved by Logisticregression analysis.The levels of miR-145,miR-210 and Lp-PLA2 in patients with different degrees of carotid arterystenosis were compared,and the relationship between miR-145,miR-210 and Lp-PLA2 levels were analyzed.ResultsThe serum levels of miR-145 and miR-210 in the stenosis group
9、were lower than those in the stenosis group,and theplasma Lp-PLA2 levels were higher than those in the non-stenosis group(P0.05);Logistic regression analysis showedthat smoking history,diabetes,hypertension,triacylglycerol,total cholesterol,LDL cholesterol,C-reactive protein,基金项目:江苏省科研计划项目(8 0 8 59
10、9 YK21)作者单位:2 10 0 0 0 南京,东南大学附属中大医院江北院区检验科通信作者:许立新,Email:d c e x u li x i n 12 6.c o m546脑与神经疾病杂志2 0 2 3年第31卷第9 期miR-145,miR-210,Lp-PLA2 levels,and NIHSS scores were all influencing factors for carotid artery stenosis inpatients with IS(P0.05);Serum miR-145 and miR-210 levels were compared between
11、groups,patients with severestenosis patients with moderate stenosis moderate stenosis patients with mild stenosis(P0.05);Spearmancorrelation analysis showed that serum miR-145 and miR-210 levels were negatively correlated with the degree ofcarotid artery stenosis,and plasma Lp-PLA2 levels were posit
12、ively correlated with the degree of carotid artery stenosis(P0.05);Pearson correlation analysis showed that serum miR-145 was positively correlated with miR-210 levels andnegatively correlated with plasma Lp-PLA2 levels and miR-210 levels negatively associated with plasma Lp-PLA2levels in patients w
13、ith IS carotid artery stenosis(P0.05).Conclusion The levels of miR-145,miR-210 and Lp-PLA2 are related to the occurrence and degree of carotid artery stenosis in patients with IS,and may be synergistic inthe progression of carotid artery stenosis.Key words MicroRNA-145;MicroRNA-210;Lipoprotein-assoc
14、iated phospholipase A2;Ischemic stroke;Carotid artery stenosis微小RNA(m i c r o RNA,m i RNA)可通过介导氧化应激、血管生成及调亡等途径参与缺血性脑卒中(i s c h e mi c s t r o k e,IS)病程进展-2 。miR-145可调节血管平滑肌细胞表型与增殖,其低表达可促进平滑肌细胞过度增殖与迁移3。miR-210为低氧激活因子,低氧条件下其可促进新生血管生成,表达降低提示脑缺血严重,且与平滑肌细胞凋亡有关4-5。脂蛋白相关磷脂酶A2(l i p o p r o t e i n-a s s o
15、c i a t e d p h o s p h o l i p a s eA2,Lp-PLA 2)为炎性标志物,可参与低密度脂蛋白代谢为氧化型游离脂肪酸与溶血磷脂酰胆碱过程,经由介导损害血管内膜完整性、增强氧化应激反应等机制,促进动脉粥样硬化发生、进展6 。本研究分析miR-145、m i R-2 10、Lp-PLA 2 与IS患者颈动脉狭窄的关系,旨在观察三者在颈动脉狭窄发生、进展中的可能作用。资料及方法1.一般资料选取东南大学附属中大医院江北院区2 0 19 年8月-2 0 2 2 年8 月IS患者10 6 例,其中男性6 1例,女性45例,年龄36 8 1岁,平均年龄(6 2.0 16.
16、37)岁。采集患者性别、年龄、体质量指数(bodymassindex,BM I)吸烟史、饮酒史、冠心病、糖尿病、高血压等情况;并入院后次日清晨采血,采用全自动生化分析仪(迈瑞医疗,BS3280)检测三酰甘油、总胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、C反应蛋白水平;入院2 4h内使用美国国立卫生院卒中量表(National Institutes of Health stroke scale,NIH SS)评估患者神经功能情况,得分越低神经缺损程度越低。纳人标准:符合中国急性缺血性脑卒中诊治指南2 0 18 7 IS诊断标准,且经颅脑CT检查确诊;初诊患者;可配合完成有关检查;对本研究知
17、晓,签订知情同意书,并经本院医学伦理委员会经审查批准。排除标准:合并颅脑损伤、颅脑肿瘤、颅内感染、脑积水、癫痫;合并痴呆、阿尔茨海默症、帕金森病、精神病;合并肝肾功能严重障碍;合并血液系统疾病、免疫系统疾病、贫血、甲状腺功能异常;既往存在颅脑手术史;近期应用抗炎药、免疫抑制剂、他汀类药物。2.miR-145、m iR-2 10、Lp-PLA 2 水平检测入院后次日清晨采集空腹静脉血,取3ml离心取血浆,以酶联免疫吸附法测定血浆Lp-PLA2水平,试剂盒购自上海酶联生物科技有限公司;将另3ml血样4下离心15min(30 0 0 r/m i n,10 c m),取上清液,-8 0 下冻存待检。应
18、用实时荧光定量聚合酶链反应(polymerasechainreaction,PCR)法测定血清miR-145、m i R-210水平。操作如下:应用美国Invitrogen公司生产的TRIzolReagentRNA提取试剂盒提取总RNA,美国Thermo公司生产的ND-1000N紫外分光光度计测定总RNA纯度,而后以日本Takara公司提供的反转录试剂盒将总RNA反转录成为cDNA;PCR反应条件:95下变性5min,9 4下30 s,6 0 下30 s,40 个循环;反应结束后,以2-C计算血清miR-145、miR-210相对表达量。3.颈动脉狭窄情况评价对患者在入院后3d内以多普勒彩色超
19、声监测仪(美国GE,V7 30 Ex p e r t)进行颈动脉彩色多普勒超声检查,筛查后通过数字减影血管造影明确诊断,将无颈动脉狭窄患者归为无狭窄组,存在颈动脉狭窄患者归为狭窄组。并参照北美症状性颈动脉内膜4-+A547脑与神经疾病杂志2 0 2 3年第31卷第9 期切除试验法评估颈动脉狭窄程度。狭窄率=(1-颈内动脉最窄处宽度/颈动脉膨大部远处正常管腔内径)10 0%。狭窄程度分级:处于7 0%9 9%判定为重度狭窄;30%6 9%判定为中度狭窄;1%2 9%判定为轻度狭窄。4.统计学方法使用SPSS21.0软件,符合正态分布计量资料以(元s)表示,多组间比较行单因素方差分析,两两比较采用
20、LSD-t检验,两组间比较行独立样本t检验;计数资料以率(%)表示,行检验;Logistic回归分析观察IS患者颈动脉狭窄的影响因素;Spearman相关性分析探讨miR-145、mi R-2 10、Lp-PLA 2 水平与患者颈动脉狭窄程度的关系;Pearson相关性分析探讨miR-145、mi R-2 10、Lp-PLA 2 之间的相关性。以P0.05;两组吸烟史、糖尿病、高血压比例、三酰甘油、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、C反应蛋白水平、NIHSS 评分相比,P 0.05。2.两组miR-145、mi R-2 10、Lp-PLA 2 水平比较(表2)表2 两组miR-145、m iR-2
21、 10水平比牧(xS)组别miR-145miR-210Lp-PLA2(ng:mL-l)狭窄组580.52 0.141.53 0.38230.92 62.23无狭窄组480.67 0.17 1.94 0.34147.27 45.58值4.9835.7977.748P值0.0000.0000.000注:狭窄组血清miR-145、mi R-2 10 水平低于无狭窄组,血浆Lp-PLA2水平高于无狭窄组,P0.053.IS患者颈动脉狭窄的影响因素(表3)表3IS患者颈动脉狭窄的影响因素变量S.E.Waldx值OR值95%CIP值吸烟史0.714 0.2846.3162.0421.3593.0670.0
22、5糖尿病0.873 0.26111.1782.3931.2714.5060.05高血压0.9100.25013.2392.4831.3054.7260.05三酰甘油0.807 0.2967.4292.2411.3973.5940.05总胆固醇0.859 0.2759.7512.3601.4063.9620.05低密度脂蛋0.8660.3137.6632.3791.6283.4750.05白胆固醇C反应蛋白0.7420.2479.0342.1011.0844.0720.05NIHSS 评分1.1210.22724.3953.0681.5795.9630.05miR-145-0.8630.2231
23、4.9660.4220.2570.6930.05miR-210-0.8860.20618.5040.4120.1940.8760.05Lp-PLA20.735 0.22410.7772.0861.1833.679 平均值赋值为2平均值赋值为1Logistic回归分析发现,吸烟史、糖尿病、高血压、三酰甘油、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、C反应蛋白、miR-145、m i R-2 10、Lp-PLA 2 水平、NIHSS评分均属IS患者颈动脉狭窄的影响因素(P0.05)。4.不同颈动脉狭窄程度患者miR-145、m iR-210、Lp-PLA 2 水平比较(表4)表4不同颈动脉狭窄程度患者miR-
24、145、m i R-2 10、Lp-PLA2水平比较(s)组别miR-145miR-210Lp-PLA2(ng mL-)重度狭窄170.41 0.12a.h1.24 0.29a.b278.76 64.76ab中度狭窄200.50 0.13b1.47 0.35b235.39 60.31b轻度狭窄210.63 0.161.82 0.41187.94 56.92F值12.09612.77410.685P值0.0000.0000.000注:与中度狭窄患者比较*P0.05;与轻度狭窄患者比较p0.05血清miR-145、m i R-2 10 水平组间比较,重度狭窄患者 中度狭窄患者 中度狭窄患者轻度狭窄
25、患者(P0.05)。5.miR-145、m i R-2 10、Lp-PLA 2 水平与患者颈动脉狭窄程度的关系(表5)表5miR-145、m i R-2 10、Lp-PLA 2 水平与患者颈动脉狭窄程度的关系指标值P值miR-145-0.7040.000miR-210-0.7920.000Lp-PLA20.6350.000Spearman相关性分析显示,血清miR-145、miR-210水平与患者颈动脉狭窄程度呈负相关(P0.05);血浆Lp-PLA2水平与患者颈动脉狭窄程度呈正相关(P0.05)6.IS颈动脉狭窄患者miR-145、m i R-2 10、Lp-PLA2之间的相关性(表6)表6
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