转BtCry1Ac与API...物群落多样性及稳定性的影响_任敏霞.pdf
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1、第 58 卷 第 4 期2 0 2 2 年 4 月林业科学SCIENTIASILVAESINICAEVol.58,No.4Apr.,2 0 2 2doi:10.11707/j.1001-7488.20220412收稿日期:2020-12-17;修回日期:2021-10-13。基金项目:国家林业和草原局科技发展中心项目(KJZXSA202001);河北省重点研发计划(21326301D)。刘军侠为通讯作者。转 BtCry1Ac 与 API 基因 107 杨对节肢动物群落多样性及稳定性的影响任敏霞1李探2张子恒1曾月霞3王利峰1杨敏生1,4刘军侠1,4(1.河北农业大学林学院保定 071000;2
2、.河北省承德市兴隆县行政审批局承德 067000;3.湖南省衡阳市林业科学研究所衡阳 421200;4.河北省林木种质资源与森林保护重点实验室保定 071000)摘要:【目的】研究转基因 107 杨的生态安全性,为其进一步推广应用提供科学依据。【方法】对嫁接转基因107 杨(BtCry1Ac 与 API 基因)和对照 107 杨,连续 5 年调查其节肢动物群落的组成、结构、多样性与稳定性。【结果】共获得节肢动物 54091 头,分属 13 个目,其中鳞翅目、鞘翅目、双翅目、膜翅目与蜘蛛目为主要类群,个体数量上鳞翅目占优势。与对照 107 杨相比,转基因 107 杨的害虫亚群落个体数量显著降低(
3、P0.05),靶标害虫杨扇舟蛾、美国白蛾的个体数量明显减少(P0.05);瓢虫、蜘蛛类天敌及家蚁和蝇类等中性昆虫的个体数量随年份增加表现出一定程度的增多,转基因 107 杨亚群落物种及个体数年际差异显著(P0.05)。转基因 107 杨的节肢动物群落的特征指数表现为多样性、均匀度指数高于对照 107 杨,优势度指数低于对照 107 杨;转基因 107 杨群落特征指数的年际差异均显著(P0.05)。稳定性分析表明,转基因 107 杨的总群落物种数与群落总个体数比值 Ss/Si、植食性昆虫物种数与个体数比值 Sp/Sb、捕食性天敌与植食性昆虫个体数比值 Sa/Sb均显著高于对照 107 杨(P0.
4、05),表明转基因 107 杨捕食性天敌物种数与个体数与对照 107 杨无明显差异(P0.05),转基因 107 杨群落结构相对稳定。【结论】转基因 107 杨具有持续抗虫效果,对天敌及中性节肢动物亚群落未产生明显不利影响,生态安全性较高。关键词:转基因 107 杨;节肢动物群落;多样性;稳定性;生态安全性中图分类号:S763.42文献标识码:A文章编号:1001-7488(2022)04-0110-09Effects of Transgenic BtCry1Ac and API gene in Poplar 107 on Diversity and Stability of Arthropo
5、d CommunityRen Minxia1 Li Tan2 Zhang Ziheng1Zeng Yuexia3Wang Lifeng1Yang Minsheng1,4Liu Junxia1,4(1.College of Forestry,Hebei Agricultural UniversityBaoding 071000;2.Administrative Examination and Approval Bureau of Xinglong County of Chengde,Hebei ProvinceChengde 067000;3.Forestry Research Institut
6、e of Hengyang City,Hunan ProvinceHengyang 421200;4.Hebei Key Laboratory of Forest Germplasm Resources and ProtectionBaoding 071000)Abstract:【Objective】This study aims to investigate the ecological safety of transgenic poplar 107(Populus euramericana Neva),and to provide scientific basis for further
7、popularization and application.【Method】In this study,the composition,structure,diversity and stability of arthropod community in grafted transgenic 107 poplar(Btcry1Ac and API gene)and control 107 poplar were investigated for five consecutive years.【Result】A total of 54 091 arthropods belonging to 1
8、3 orders were collected,of which,Lepidoptera,Coleoptera,Coleoptera,Diptera,Hymenoptera and Araneae were the main groups.Lepidoptera is dominant in individual number.Compare with the control 107 poplar,the quanity of pest sub-communities in transgenic 107 poplar was significantly lower(P0.05).The num
9、ber of target pests Clostera anachoreta and Hyphantria cunea decreased significantly(P第 4 期任敏霞等:转 BtCry1Ac 与 API 基因 107 杨对节肢动物群落多样性及稳定性的影响0.05)in species and individual number of natural enemies and neutral arthropod community.The natural enemies of Coccinellidae,Araneae and the other neutral insect
10、s of Monamorium pharaonis and flies showed increased to a certain degree year by year.There were significant interannual differences in species and individual numbers of transgenic 107 poplar sub-community(P0.05).The characteristic index of arthropod community in transgenic 107 poplar forest showed
11、that the diversity and evenness index was higher than that in the control 107 poplar forest,and the dominance index was lower.There were significant interannual differences in the community characteristic index of transgenic 107 poplar forest(P0.05).Stability analysis showed that the ratio of total
12、community species to total community individual(Ss/Si),the ratio of herbivorous insects species to herbivorous insects individuals (Sp/Sb),and the ratio of predatory natural enemies individuals to herbivorous insects individuals(Sa/Sb)in transgenic 107 poplar forest were significantly higher than th
13、ose in the control 107 poplar forest(P 0.05),indicating that the number of predatory natural enemies species and individuals in the transgenic 107 poplar forest were not significantly different from those in the control 107 poplar forest(P0.05),and the community structure of arthropod in the transge
14、nic 107 poplar forest was relatively stable.【Conclusion】Transgenic 107 poplar has a continuous insect resistance,and has no obvious adverse effects on natural enemies and neutral arthropod sub-communities.The transgenic 107 poplar has high ecological safety.Key words:transgenic 107 poplar;arthropod
15、community;diversity;stability;ecological safety长期采用常规农药防治农林害虫,会导致害虫产生抗药性、害虫再猖獗及杀虫剂污染环境等严重问题,转基因植物应用为防治虫害提供了一条新途径(周晓静等,2018;赵蓬晖等,2010)。目前已成功将抗虫基因转入多种植物,且部分已进入田间释放与商业化种植阶段(杨双,2018),但其对靶标、非靶标生物及生态环境的影响存在争论(姜韬,2018;夏敬源等,1999;武二忠,2011;凌闵,2020),转基因植物在带来经济效益的同时,其生态安全性问题不容忽视。对其生态安全性研究主要集中于:外源基因的稳定性、靶标害虫是否产生
16、抗性、对非靶标生物的影响、对群落结构的影响、对土壤微生物的影响、是否会产生基因漂移与水平转移及其直接或间接的环境影响。有研究发现外源基因能稳定存在于植物中(李立,2009),也有研究发现转基因杨树外源基因表达量产生变化,发生了基因沉默现象(吕威等,2018)。目前研究表明转基因杨树对靶标害虫表现出较高抗性,个体数量显著减少(任亚超,2013;王璞等,2020),且抗虫性可以持续到下一代,延缓下一代幼虫的发育(刘冬艳等,2015)。转基因杨树(Populus)在抑制靶标害虫的同时,对非靶标生物的影响存在一定争论,多数研究结果表明未对非靶标害虫及天敌产生明显不利影响(胡建军等,2010;田亚坤,2
17、014),甚至对天敌具有一定增殖作用(姚丽等,2016),但也有研究表明转基因杨树对靶标害虫的持续控制作用导致非靶标害虫叶蜂(李探等,2018)及刺吸类害虫数量有所增加(陈辉惶等,2012),寄生性天敌种类与数量相对减少(张芳,2004;胡建军等,2007)。到目前为止的研究未发现对群落、土壤微生物及环境的明显不利影响(Wang et al.,2018;胡建军等,2010)。杨树因其速生、用途广泛、基因组小、易离体操作等特点,被用作转基因林木研究的模式树种(睢韡等,2019;丁莉萍,2016)。转基因林木生态安全性及对环境的影响,可能需较长时间才能显现出来,因此需对其进行长期监测。此外,采用常
18、规方式及嫁接方式繁殖的转基因杨树抗虫性均较高;嫁接繁殖的转基因杨树还可有效避免或降低外源基因发生漂移及 转 移 的 风 险,提 高 其 环 境 安 全 性(王 智,2014)。目前对嫁接繁殖转基因杨树的群落影响研究较 少,本 研 究 以 嫁 接 转 基 因 107 杨(Populus euramericana Neva)为对象,探讨嫁接转基因杨树对节肢动物的群落组成、多样性及稳定性的影响,为转基因杨树生态安全性评价积累数据,并为其推广与应用提供科学依据。1材料与方法1.1试验材料本 试 验 林 分 为 伐 根 嫁 接 的 转 基 因 107 杨(BtCry1Ac 和 API 基因),株系#1、
19、#2、#3、#9 均为经室内 筛 选,对 鳞 翅 目 害 虫 美 国 白 蛾(Hyphantria cunea)和杨扇舟蛾(Clostera anachoreta)等具有高抗111林业科学58 卷虫性,转入基因的毒蛋白表达水平为#1#2#9#3(杨艳丽等,2012)。于 2014 年在 107 杨伐根上嫁接转基因 107 杨各株系及对照(未转基因 107 杨为欧美杨 107 号,属于美洲黑杨欧洲黑杨“无性系”,P.euramericana cv.74/76)1 年生枝条,成林后用于试验调查。20152019 年的林龄分别为 2、3、4、5、6 年。1.2试验地概况试验地位于唐山市滦南县国营林场
20、苗圃,滦南县属暖温带沿海半湿润区大陆性气候,年均气温11,年均降水量约 660 mm,年均日照 2 853 h,无霜期 186 天。试验样地采用随机区组设计,划分为4 个区组,每个区组种植转基因 107 杨株系#1、#2、#3、#9 及对照 107 杨(CK)各 30 株(5 列 6 行),区组内株系间随机块状排列,株距为 2 m,行距 5 m,区块面积为 300 m2,不同区组以黑杨(美洲黑杨欧洲黑杨“无性系”)作为隔离带,隔离带宽度 4 m,整块地地形地貌气候一致,除正常的水肥管理外,均未施用化学农药。1.3调查方法调查于 20152019 年 410 月进行,每 2025天调查 1 次。
21、采用随机取样方法,在每个区组中各株系分别随机选取 5 株样树,调查其上节肢动物种类与数量。树冠调查:在选取的植株东、西、南、北 4个方向,上下各选取 50 cm 样枝,观察并记录样枝上节肢动物种类与数量。主干调查:调查样株距地表3 m 内主干上节肢动物种类与数量。地面调查:在选取的样地内按照五点式取样法,选取 5 个 1 m1 m 的样方,记录节肢动物种类与数量。对于野外调查不能鉴定的种类,将其编号,装入酒精试管中,带回实验室进行鉴定(张巍巍等,2011;胡金林,1983)。1.4试验林基本生长情况采用随机取样的方法,每个小区随机选取 5 株树,共 100 株,对试验林基本生长状况进行了调查。
22、随年份的变化,树高、胸径及枝下高均表现为一定程度的增长,不同年份转基因 107 杨生长量产生波动,#2 株系相对稳定,#3 株系生长量相对较低。1.5数据分析方法 通过以下公式进行群落特征指数分析。1)Shannon-Wiener多 样 性 指 数(diversity index):H=-si=1PilnPi。式中:S 为物种数;Pi为相对多度。2)Pielou 均匀度指数(evenness index):J=H/Hmax,Hmax=lnS。式中:Hmax为给定物种完全均匀时的群落多样性指数;S 为物种数。3)Berger-Parker优 势 度 指 数(dominance index):C=
23、Nmax/N。式中:Nmax为优势类群的数量;N 为群落中总的个体数。4)通过以下指标比较群落中不同株系的稳定性,值越大说明在种间数量上的制约作用相对较大,天敌物种数相对较多,对植食性昆虫有较强的制约作用,表明群落相对稳定。Ss/Si:总群落物种数与群落总个体数比值;Sn/Sp:捕食性天敌与植食性昆虫物种数比值;Sa/Sb:捕食性天敌与植食性昆虫个体数比值;Sp/Sb:植食性昆虫物种数和个体数比值;Sn/Sa:天敌物种数和个体数的比值。1.6数据处理依据转基因 107 杨调查数据,逐年统计节肢动物组成以及节肢动物不同功能类群种类和数量,比较不同株系不同年度间转基因 107 杨节肢动物群落及各功
24、能类群组成、群落特征指数及稳定性差异。采用 PAST2.17 计算转基因 107 杨群落特征指数,利用 SPSS 21.0 中单因素(One-way ANOVA)方差分析对转基因 107 杨亚群落组成、群落特征指数进行差异显著性分析。双因素(Two-way ANOVA)方差分析对转基因 107 杨不同株系和不同年份亚群落组成及群落特征指数进行差异显著性分析。相关数据整理、绘图与制表在 Microsoft Excel 2010 中完成。2结果与分析2.1节肢动物群落基本组成节肢动物群落基本组成见表 1。共获得节肢动物 54 091 头,分属 13 个目。节肢动物群落物种数以鳞翅目(Lepidop
25、tera)、鞘翅目(Coleoptera)、双翅目(Diptera)、膜 翅 目(Hymenoptera)与 蜘 蛛 目(Araneida)占优势。个体数量以鳞翅目占优势,其次为半翅目(Hemiptera)、膜翅目、蜘蛛目、鞘翅目、双翅目,分别占 5 年数据总和的 48.2%、15.0%、14.2%、8.5%、8.4%、4.1%。脉翅目(Neuroptera)、直翅目(Orthoptera)与其他类群个体数量相对较少,趋于稳定。211第 4 期任敏霞等:转 BtCry1Ac 与 API 基因 107 杨对节肢动物群落多样性及稳定性的影响表 1节肢动物群落基本组成 Tab.1The basic
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