sICOS和sPD-1在H...及宫颈癌中的表达及临床意义_孙珍.pdf
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1、J Med Theor PracVol.36,No.8,Apr20232023年第36卷第8期医学理论与实践sICOS 和 sPD-1 在 H-HPV 感染、CIN 及宫颈癌中的表达及临床意义*基金项目:深圳市宝安区医疗卫生基础研究项目(2019JD328)。通信作者:孙珍孙珍郭夏娜宝安中医院(集团)检验科,广东省深圳市518100摘要目的:目的:探讨可溶性共刺激分子(sICOS)和可溶性程序性死亡蛋白 1(sPD-1)在 H-HPV 感染、CIN 及宫颈癌间的表达差异及临床意义。方法:方法:将 240 例高危型人乳头状瘤病毒(H-HPV)感染患者分为 H-HPV 感染组 80 例、CIN组
2、80 例、宫颈癌组 80 例,同时选取 80 例健康体检者作为对照组,通过酶联免疫吸附试验(ELISA)方法检测各组外周血中 sPD-1、sICOS 的表达情况,并应用 SPSS26.0 软件进行统计学分析。结果:结果:与健康对照组相比,CIN 组、宫颈癌组的 sPD-1 表达水平均升高,差异具有统计学意义(P 0 01),而 H-HPV 感染组与健康组血清中 sPD-1 表达水平的差异无统计学意义(P 0 05);与健康对照组相比,各病例组血清中 sICOS 水平均升高,较健康对照组差异具有统计学意义(P 0 01),但 H-HPV 感染组与 CIN 组血清中 sICOS 表达水平的差异无统
3、计学意义(P 0 05);研究对象的血清中 sICOS 和 sPD-1 呈正相关关系(r=0 755,P 0 01),其中 H-HPV 组、CIN 组、宫颈癌组的 sICOS 和 sPD-1 间均有显著的正相关关系(P 0 01),而健康组的 sICOS 和 sPD-1 无相关关系(P 0 05);OC 分析 sPD-1、sICOS 对 H-HPV、CIN、宫颈癌的鉴别效能,AUC 分别为 0 852 0、0 836 4。结论:结论:在 H-HPV 感染后的免疫中,sPD-1 和 sICOS 存在上调表达,且 H-HPV 组、CIN 组及宫颈癌组的 sICOS 与 sPD-1 的正相关关系显著
4、,提示可能存在协同刺激,促进病原的免疫逃逸,影响疾病的发生发展。关键词sPD-1sICOSH-HPV 感染CIN宫颈癌中图分类号:737.33文献标识码:Adoi:10.19381/j.issn.1001-7585.2023.08.004The Expression and Significance of sICOS/sPD-1 among the H-HPV Infection and CIN and Cervical CancerSUN Zhen,GUO Xia na Department of Clinical Laboratory,Baoan Traditonal Chinese Me
5、dicine Hospital Group,ShenzhenCity,Guangdong Province518100ABSTACT Objective:To investigate the expression differences and clinical significance of soluble molecule programmeddeath 1(sPD-1)and soluble inducible costimulator(sICOS)among H-HPV infection,CIN and cervical cancer Methods:240 patients wit
6、h high-risk human papilloma virus(H-HPV)infection were divided into three case groups:80 patients withH-HPV infection and no cervical lesions(H-HPV infection group),80 patients with cervical intraep-ithelial neoplasia(CIN)and existing or past H-HPV infection(CIN group),80 patients with cervical canc
7、er and existing or past H-HPVinfection(cervical cancer group),80 healthy people were selected as the control group The expressions of sPD-1 and sICOSwas detected by enzyme-linked immuno sorbent assay(ELISA)SPSS26 0 software was used for statistical analysis esults:Compared with healthy control group
8、,the expression level of SPD-1 in CIN group and cervical cancer group were increased,the difference was statistically significant(P 0 01),but there was no significant difference in serum expression betweenH-HPV infection group and healthy group(P 0 05)Compared with the healthy control group,the expr
9、ession level of sI-COS in case groups were increased,and the difference were statistically significant(P 0 01),but there was no significantdifference in the expression between H-HPV infection group and CIN group(P 0 05)There was a moderate positive cor-relation between sICOS and SPD-1 in the serum o
10、f the subjects(r=0 755,P 0 01).It was a significant correlation betweensICOS and sPD-1 in H-HPV group,CIN group and cervical cancer group(P 0 01),but no correlation between sICOS andsPD-1 in the healthy group(P 0 05)Conclusion:In the immunity after H-HPV infection,the expression of sPD-1 andsICOS is
11、 up-regulated,and the correlation between sICOS and sPD-1 in H-HPV group,CIN group and cervical cancer groupis significant.It is suggested that there may be synergistic stimulation to promote the immune escape of pathogens,so as to af-fect the occurrence and development of diseasesKEY WODSsPD-1sICOS
12、H-HPV infectionCINCervical cancer在全球女性恶性肿瘤排名中,宫颈癌仅次于乳腺癌位居第二,严重威胁女性的生命健康,且发病人2721医学理论与实践2023年第36卷第8期Vol.36,No.8,Apr2023J Med Theor Prac群年龄具有不断年轻化的趋势。目前已证实高危型人乳头状瘤病毒(High risk Human papilloma virus,H-HPV)感染是导致宫颈上皮内病变(Cervical in-traep-ithelial neoplasia,CIN)及宫颈癌发生的主要危险因素1。人体正常的免疫系统大多可以清除 H-HPV 的感染,但仍有
13、部分女性因病毒的持续感染而导致疾病进展,甚至最终发展成为宫颈癌。多数研究认为 H-HPV 的感染或发生发展为宫颈上皮内病变(CIN)乃至宫颈癌均与免疫缺陷有着密切联系,尤其与细胞免疫显著相关。诱导性共刺激分子(Inducible co-stimulator,ICOS)和程序性死亡受体 1(Programmed death-1,PD-1)主要调控表达于 T 淋巴细胞而发挥效应,与细胞免疫功能关系密切,从而影响感染、炎症、肿瘤及自身免疫性疾病等的发生发展。共刺激分子,不论是受体或配体,都存在膜型和可溶性两种形式,表达于细胞膜上和分泌于体液中,均参与了共刺激信号的介导和自身调节2。目前,有关 ICO
14、S 和 PD-1 在宫颈疾病患者外周血中的表达变化未见报道,本研究旨在探讨可溶性共刺激分子(sICOS、sPD-1)在 H-HPV 感染、CIN 及宫颈癌患者中的表达和临床意义,尝试寻找新的血液学筛查指标,为宫颈疾病诊疗及预后提供新的研究方向。1资料与方法1 1一般资料选取医院 2020 年 3 月2021 年 9月收治的 240 例 H-HPV 感染患者,根据临床检验及病理报告差异分为 3 个病例组:其中 H-HPV 感染且无宫颈病变患者(简称为 H-HPV 感染组)80例,年龄(46 93 14 03)岁;CIN 且存在或既往存在H-HPV 感染患者(简称为 CIN 组)80 例,年龄(4
15、6.01 12 91)岁;宫颈癌且存在或既往存在 H-HPV 感 染 患 者(简 称 为 宫 颈 癌 组)80 例,年 龄(49.61 10 34)岁。纳入标准:患者年龄均 18岁;检验及病理检查报告等临床资料完整。排除标准:合并肿瘤、感染或自身免疫性疾病的患者;合并有机体多器官严重功能障碍的患者;处于妊娠或哺乳期的患者;对本次研究不配合的患者。另选取 80例健康体检者作为健康对照组,年龄(46 08 12.57)岁,多次检测 HPV 阴性且排除宫颈病变。各组间的年龄比较差异无统计学意义(P 0.05)。所有受试者均对本研究知情,并签署知情同意书,本研究经医院伦理委员会批准。1 2样本处理收集
16、所有受试者的外周血,将全部样本经 3 000r/min 离心 15min,吸取上层血清至1.5ml EP 管中分装保存并做好标记,冻存于 80冰箱中,检测前需将血清样品放置室温溶解并混匀。1 3sICOS 与 sPD-1 水平的检测采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测健康对照组、H-HPV 感染组、CIN 组、宫颈癌组血清中 sICOS 和 sPD-1 水平,试剂盒均购自武汉云克隆科技股份有限公司,具体操作步骤严格按照试剂盒说明书进行。空白调零后,使用酶标仪(Thermo 公司)在 450nm 波长下测定吸光度(OD 值),以标准品的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,绘制标准曲线,计算血清样本中
17、 sPD-1和 sICOS 的含量。1 4统计学方法采用 SPSS26 0 软件对所得数据进行统计学分析,先进行正态性和方差齐性检验,正态分布用(x s)表示,非正态分布用中位数(四分位数)表示,各组间比较采用 Kruskal-Wallis 检验,两组间比较采用 Mann-Whitney U 检验,相关性分析采用 Spearman rank 相关分析,相关系数 r 的取值范围为1,+1,以 P 0 05 为差异有统计学意义。2结果2 1各病例组与健康对照组血清中 sPD-1 的表达水平ELISA 检测 H-HPV 感染组、CIN 组、宫颈癌组及健康对照组的 sPD-1 水平,结果分别为 2 2
18、0(1 74 2 90)ng/ml、5 27(4 32 6 91)ng/ml、9.60(8 44 12 25)ng/ml、2 15(1 37 2 72)ng/ml。结果显示,与健康对照组相比,CIN 组、宫颈癌组的 sPD-1 表达水平均升高,差异有统计学意义(P0 01),而 H-HPV 感染组与健康组血清中 sPD-1表达水平差异无统计学意义(P=0 172),见图 1。图 1各组 sPD-1 表达水平比较2 2各病例组与健康对照组血清中 sICOS 的表达水平ELISA 检测 H-HPV 感染组、CIN 组、宫颈癌组及健康对照组的 sICOS 水平,结果分别为 421 50(394 25
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