不同浓度丙泊酚对人乳腺癌雌激素受体阳性MCF-7细胞增殖、迁移及侵袭的影响.pdf
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1、基金项目:新疆维吾尔自治区自然科学基金项目(2 0 2 0 D 0 1 C 0 9 7)作者简介:张雪蓉(1 9 7 6-),女,硕士,主任医师,研究方向:临床麻醉。通信作者:朱 钧,女,硕士,主任医师;研究方向:小儿麻醉;E-m a i l:1 5 6 4 1 7 8 0 2 2q q.c o m。本文引用:张雪蓉,万丽萍,阿孜古丽阿吉,等.不同浓度丙泊酚对人乳腺癌雌激素受体阳性MC F-7细胞增殖、迁移及侵袭的影响J.新疆医科大学学报,2 0 2 3,4 6(1 1):1 4 3 8-1 4 4 3,1 4 4 9.d o i:1 0.3 9 6 9/j.i s s n.1 0 0 9-5
2、 5 5 1.2 0 2 3.1 1.0 0 5不同浓度丙泊酚对人乳腺癌雌激素受体阳性MC F-7细胞增殖、迁移及侵袭的影响张雪蓉1,2,万丽萍1,阿孜古丽阿吉1,朱 钧1(1新疆维吾尔自治区儿童医院麻醉科;2新疆维吾尔自治区人民医院麻醉科,乌鲁木齐 8 3 0 0 0 0)摘要:目的 研究不同浓度丙泊酚对人乳腺癌雌激素受体阳性MC F-7细胞增殖、迁移及侵袭的影响。方法 以人乳腺癌雌激素受体阳性MC F-7细胞为研究对象,随机将其分为3组,即P0组(为空白对照)、P2 5组(给予2 5 g/m L丙泊酚)和P5 0组(给予5 0 g/m L丙泊酚)。对3组细胞分别进行克隆形成实验、T r a
3、 n s w e l l细胞迁移实验、侵袭实验、划痕愈合实验,观察各组细胞的增殖、迁移、侵袭变化情况。采用W e s t e r n b l o t法检测不同浓度丙泊酚对人乳腺癌胞K i-6 7、P D-L 1的蛋白表达水平的影响;R T-q P C R法检测不同浓度丙泊酚对K i-6 7、P D-L 1的R NA表达水平的影响。结果 与P0组比较,P5 0组人乳腺癌雌激素受体阳性MC F-7细胞增殖、迁移及侵袭能力均升高,差异有统计学意义(P0.0 5)。与P0组相比,P5 0组P D-L 1、K i-6 7蛋白表达水平升高,差异有统计学意义(P0.0 5)。3组间P D-L 1、K i-6
4、 7的R N A表达水平比较,差异均有统计学意义(P0.0 0 1)。结论 高浓度丙泊酚能促进人乳腺癌雌激素受体阳性M C F-7细胞增殖、侵袭、迁移能力,该变化与相关蛋白K i-6 7、P D-L 1表达增强有关。关键词:丙泊酚;人乳腺癌雌激素受体阳性MC F-7;程序性死亡配体1;细胞增殖核抗原中图分类号:R 7 3 7.9 文献标识码:A 文章编号:1 0 0 9-5 5 5 1(2 0 2 3)1 1-1 4 3 8-0 7d o i:1 0.3 9 6 9/j.i s s n.1 0 0 9-5 5 5 1.2 0 2 3.1 1.0 0 5E f f e c t s o f d i
5、 f f e r e n t c o n c e n t r a t i o n s o f p r o p o f o l o n p r o l i f e r a t i o n,m i g r a t i o n a n d i n v a s i o n o f h u m a n b r e a s t c a n c e r e s t r o g e n r e c e p t o r-p o s i t i v e MC F-7 c e l l sZ H A N G X u e r o n g1,2,WA N L i p i n g1,A z i g u l i A j i1
6、,Z H U J u n1(1D e p a r t m e n t o f A n e s t h e s i o l o g y,C h i l d r e n s H o s p i t a l o f X i n j i a n g U y g u r A u t o n o m o u s R e g i o n;2D e p a r t m e n t o f A n e s t h e s i o l o g y,P e o p l e s H o s p i t a l o f X i n j i a n g U y g u r A u t o n o m o u s R e
7、g i o n,U r u m q i 8 3 0 0 0 0,C h i n a)A b s t r a c t:O b j e c t i v e T o i n v e s t i g a t e t h e e f f e c t s o f d i f f e r e n t c o n c e n t r a t i o n s o f p r o p o f o l o n t h e p r o l i f e r a t i o n,m i g r a t i o n a n d i n v a s i o n o f e s t r o g e n r e c e p t
8、o r-p o s i t i v e MC F-7 c e l l s i n h u m a n b r e a s t c a n c e r.M e t h o d s H u-m a n b r e a s t c a n c e r e s t r o g e n r e c e p t o r-p o s i t i v e MC F-7 c e l l s w e r e r a n d o m l y d i v i d e d i n t o 3 g r o u p s:P0 g r o u p(b l a n k c o n t r o l),P2 5 g r o u p
9、(2 5 g/m L p r o p o f o l)a n d P5 0 g r o u p(5 0 g/m L p r o p o f o l).C l o n e f o r m a t i o n e x-p e r i m e n t,T r a n s w e l l c e l l m i g r a t i o n e x p e r i m e n t,i n v a s i o n e x p e r i m e n t a n d s c r a t c h h e a l i n g e x p e r i m e n t w e r e c o n d u c t e
10、 d t o o b s e r v e t h e c h a n g e s o f c e l l p r o l i f e r a t i o n,m i g r a t i o n a n d i n v a s i o n i n e a c h g r o u p.W e s t e r n b l o t m e t h o d w a s u s e d t o d e t e c t t h e e f f e c t o f d i f f e r e n t c o n c e n t r a t i o n s o f p r o p o f o l o n t h
11、 e e x p r e s s i o n l e v e l s o f K i-6 7 a n d P D-L 1 i n h u m a n b r e a s t c a n c e r c e l l s.R T-q P C R w a s u s e d t o d e t e c t t h e e f f e c t o f d i f f e r e n t c o n c e n t r a-第4 6卷 第1 1期新 疆 医 科 大 学 学 报V o l.4 6 N o.1 1 2 0 2 3年1 1月J o u r n a l o f X i n j i a n g M
12、 e d i c a l U n i v e r s i t yN o v.2 0 2 3 t i o n s o f p r o p o f o l o n t h e R NA e x p r e s s i o n l e v e l s o f K i-6 7 a n d P D-L 1.R e s u l t s C o m p a r e d w i t h P 0 g r o u p,t h e p r o l i f e r a t i o n,m i g r a t i o n a n d i n v a s i o n o f e s t r o g e n r e c e
13、 p t o r p o s i t i v e MC F-7 c e l l s i n P5 0 g r o u p w e r e s i g n i f-i c a n t l y i n c r e a s e d(P0.0 5).C o m p a r e d w i t h t h e P0 g r o u p,t h e e x p r e s s i o n l e v e l s o f P D-L 1 a n d K i-6 7 p r o t e i n s i n t h e P5 0 g r o u p w e r e i n c r e a s e d w i t
14、 h s t a t i s t i c a l s i g n i f i c a n c e(P 0.0 5).T h e R NA e x p r e s s i o n l e v e l s o f P D-L 1 a n d K i-6 7 w e r e c o m p a r e d a m o n g t h e 3 g r o u p s,a n d t h e d i f f e r e n c e s w e r e s t a t i s t i c a l l y s i g n i f i c a n t(P0.0 5),P5 0组细胞迁移数量增多,差异有统计学意
15、义(P0.0 5),P5 0组细胞侵袭数量增多,差异有统计学意义(P0.0 5),见图5、6。0441 新 疆 医 科 大 学 学 报第4 6卷 图3 不同浓度丙泊酚中人乳腺癌雌激素受体阳性MC F-7细胞迁移培养图图4 不同浓度丙泊酚对人乳腺癌雌激素受体阳性MC F-7细胞迁移能力的影响图5 不同浓度丙泊酚中人乳腺癌雌激素受体阳性MC F-7细胞侵袭培养图图6 不同浓度丙泊酚对人乳腺癌雌激素受体阳性MC F-7细胞侵袭能力的影响 2.4 不同浓度丙泊酚对人乳腺癌雌激素受体阳性MC F-7细胞愈合的影响 划痕后即刻(0 h)3组细胞划痕间距相等。2 4 h后,P5 0组细胞划痕间距最小,P2
16、5组细胞划痕间距最宽,见图7。2.5 不同浓度丙泊酚对人乳腺癌雌激素受体阳性M C F-7细胞P D-L 1、K i-6 7蛋白表达水平的影响 加入不同浓度的丙泊酚干预2 4 h后,与P0组比较,P2 5、P5 0组K i-6 7蛋白表达水平增高,差异有统计学意义(P0.0 5)。3组间P D-L 1蛋白表达水平比较,差异有统计学意义(P0.0 0 0 1),P D-L 1表达水平随着丙泊酚浓度的增加而增高,见图8、9。1441 第1 1期 张雪蓉,等:不同浓度丙泊酚对人乳腺癌雌激素受体阳性M C F-7细胞增殖、迁移及侵袭的影响图7 不同浓度丙泊酚对人乳腺癌雌激素受体阳性MC F-7细胞愈合
17、图 图8 K i-6 7、P D-L 1蛋白电泳图 图9 不同浓度丙泊酚对K i-6 7、P D-L 1蛋白表达水平的影响2.6 P C R检测不同浓度丙泊酚对人乳腺癌雌激素受体阳性MC F-7细胞P D-L 1、K i-6 7的R N A表达水平的影响 3组间P D-L 1、K i-6 7的R NA表达水平比较,差异均有统计学意义(P0.0 0 1),P D-L 1表达水平 随 着 丙 泊 酚 浓 度 的 增 加 而 增 高,见 表2、图1 0。图1 0 P C R 法检测3组细胞中P D-L 1和K i-6 7的R N A表达水平2441 新 疆 医 科 大 学 学 报第4 6卷 表2 3
18、组细胞中P D-L 1和K i-6 7的R N A表达水平组别K i-6 7 P D-L 1 P01.0 0 90.0 0 61.0 0 80.0 1 0P2 51.7 3 60.1 1 0#1.6 1 60.0 4 2#P5 02.2 0 20.1 4 9*#1.9 4 60.1 0 9*#F9 4.2 2 7 1 4 8.4 4 4 P0.0 0 1 0.0 0 1 注:3 讨论有动物实验研究发现标准剂量的丙泊酚可以通过GA B AA R-T R I M 2 1-S r c机制来促进肿瘤细胞的转移、粘附能力1 4。ME NG等报道持续泵注21 0 u g/m L的丙泊酚11 2 h可增加人
19、乳腺癌细胞的增殖和迁移能力1 5。本研究在人乳腺癌雌激素受体阳性MC F-7细胞中加入不同浓度丙泊酚,发现加入高浓度(5 0 g/m L)丙泊酚后MC F-7细胞迁移能力增强,侵袭细胞和细胞克隆数量明显上升,增殖能力增加,因此认为高浓度丙泊酚能够促进人源乳腺癌MC F-7细胞增殖、迁移、侵袭。有研究表明,丙泊酚可减少全乳房切除术乳腺癌患者的局部复发,抑制肿瘤细胞的活性,降低术后病死率1 6-1 7。丙泊酚可通过乳腺癌细胞中不同的分子机制来发挥促肿瘤或抗肿瘤的活性,乳腺癌细胞的高异质性和繁多的蛋白标志物可能会掩盖丙泊酚的作用机制1 8。K i-6 7是反映乳腺肿瘤细胞生长情况的重要蛋白,与细胞增
20、殖有关,阳性率越高,肿瘤生长越快,通常被作为某些恶性肿瘤的预后生物标志物1 9。肿瘤细胞通过刺激T细胞上的程序性死亡配体1(P D-L 1)来耗尽活化的T细胞,从而答到逃避免疫监测,对肿瘤细胞的细胞膜和细胞质有着“保护”作用,能够使肿瘤细胞存活率更高、体积更大、增殖能力更强2 0-2 1。本研究结果表明,经高浓度丙泊酚处理后,人乳腺癌MC F-7细胞中的P D-L 1、K i-6 7蛋白表达增高,提示高浓度丙泊酚促进乳腺癌MC F-7细胞增殖、迁移、侵袭,且这种生物行为学改变可能与K i-6 7、P D-L 1的表达增强有关。综上所述,高浓度的丙泊酚可以促进人乳腺癌雌激素受体阳性MC F-7细
21、胞的增殖、迁移、侵袭能力,这种细胞生物学行为的改变是通过增加P D-L 1、K i-6 7表达来实现的。参考文献:1 国家肿瘤质控中心乳腺癌专家委员会.中国乳腺癌规范诊疗质量控制指标(2 0 2 2版)J.中华肿 瘤杂志,2 0 2 2:4 4(3):2 0 3-2 0 8.2 L I M,Z HAN G Y,P E I L,e t a l.P o t e n t i a l i n f l u e n c e o f a n e s-t h e t i c i n t e r v e n t i o n s o n b r e a s t c a n c e r e a r l y r e
22、c u r r e n c e a c c o r d i n g t o e s t r o g e n r e c e p t o r e x p r e s s i o n:a s u b-s t u d y o f a r a n d o m i z e d-t r i a lJ.F r o n t O n c o l,2 0 2 2,1 2:8 3 7-8 5 9.3 XU Y,P AN S,J I ANG W,e t a l.E f f e c t s o f p r o p o f o l o n t h e d e v e l o p m e n t o f c a n c e
23、 r i n h u m a n sJ.C e l l P r o l i f,2 0 2 0,5 3(8):e 1 2 8 6 7.4 E D E N C,E S S E S G,KA T Z D,e t a l.E f f e c t s o f a n e s t h e t i c i n-t e r v e n t i o n s o n b r e a s t c a n c e r b e h a v i o r,c a n c e r-r e l a t e d p a t i e n t o u t c o m e s,a n d p o s t o p e r a t i
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