白细胞过滤器对红细悬液中血小板的去除效率.pdf
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1、第 44卷 第5期2023 年 9月Vol.44 No.5September 2023中山大学学报(医学科学版)JOURNAL OF SUN YATSEN UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCES)白细胞过滤器对红细悬液中血小板的去除效率刘浩强1,彭琳2,林宇霆2,冯宝莹1,巴桑2,嘎玛格列2,陆英1,2(1.中山大学附属第三医院输血科,广东 广州 510630;2.西藏自治区林芝市人民医院检验科,西藏 林芝 860000)摘要:【目的】观察不同储存时期红细胞悬液中血小板数量的变化,探讨白细胞过滤器对红细胞悬液中的血小板去除效率。【方法】将58份红细胞悬液根据储存时间不同分为4组
2、:1周组(16份),2周组(16份),3周组(14份),4周组(12份),将四组红细胞悬液通过白细胞过滤器过滤,获取过滤前后的样本,用全自动血细胞计数仪检测血小板计数,计算出血小板的去除率。过滤前红细胞悬液标本制成血细胞涂片,用吉姆萨染色液染色,显微镜下观察血小板的形态。【结果】四组红细胞悬液中过滤前血小板的计数分别为(286.562.34)109/L、(238.057.37)109/L、(193.656.21)109/L和(167.824.76)109/L,储存3周(P 0.01)和4周(P 0.05)。【结论】红细胞悬液中的血小板计数随着储存时间的延长而逐渐降低,而储存后期(3周和4周)仍
3、保存有大部分的血小板,白细胞过滤器能够去除其中的绝大多数血小板,而且各组间去除效率相似。关键词:红细胞悬液;白细胞过滤器;储存时间;血小板去除;效率中图分类号:R446 文献标志码:A 文章编号:1672-3554(2023)05-0835-05DOI:10.13471/ki.j.sun.yat-sen.univ(med.sci).2023.0516Platelet Removal Efficiency by Leukocyte Filter in Red Blood Cell Units at Different Storage PeriodsLIU Hao-qiang1,PENG Lin2
4、,LIN Yu-ting2,FENG Bao-ying1,BA Sang2,GAMA Ge-lie2,LU Ying1,2(1.Department of Blood Transfusion,The Third Affiliated Hospital,Sun Yat-sen University,Guangzhou 510630,China;2.Clinical Laboratory,Nyingchi Peoples Hospital,Nyingchi 860000,China)Correspondence to:LU Ying;E-mail:Abstract:【Objective】The a
5、im of this study is to investigate change of platelet count in red blood cell(RBC)units at different storage periods and explore the efficiency of platelet removal by leukocyte filter.【Methods】A total of 58 RBC units were divided into four groups according to different storage periods:1 week Group(1
6、6),2 weeks Group(16),3 weeks Group(14)and 4 weeks Group(12).RBC units in the four groups were filtered through leukocyte filter.The RBC samples before and after filtration were obtained.The platelet count was detected by automatic blood cell counter and the efficiency of platelet removal was calcula
7、ted.RBC samples before filtration were made into blood cell smears.The blood cell 临床研究 收稿日期:2023-04-04基金项目:中山大学附属第三医院国家自然科学基金培育专项基金(2021GZRPYMS05);广州市科技计划项目(202206010195)作者简介:刘浩强,第一作者,研究方向:白细胞过滤器在临床输血中的应用,E-mail:;陆英,通信作者,副主任医师,广东省第七批柔性援藏专家,E-mail:第44卷中山大学学报(医学科学版)smears were dyed with Wright-Giemsa
8、stain,and the morphology of platelets was observed through a microscope.【Results】The platelet count in RBC units stored for 1,2,3 and 4 weeks was(286.562.34)109/L,(238.057.37)109/L,(193.656.21)109/L and(167.824.76)109/L,respectively.Platelet count in blood stored for 3 weeks(P0.01)and 4 weeks(P 0.05
9、).【Conclusions】Platelet count in RBC units decreases gradually as the storage period increases,but most platelets still remain in RBC units of late storage periods(3 weeks and 4 weeks).The leukocyte filter is able to remove most of the platelets,and the removal efficiency is similar among the groups
10、.Key words:red blood cell;leukocyte filter;storage period;platelet removal;efficiencyJ SUN Yatsen Univ(Med Sci),2023,44(5):835-839临床应用的红细胞悬液中除了用于提高血红蛋白含量的红细胞外,还有少量的白细胞和血小板。其中的白细胞极少具有治疗价值,但可能引起严重的输血反应1-3;而其中的血小板的输入可能引起血小板同种免疫4。从离心法到细胞过滤法,去除白细胞的方法已经使用了几十年5。第三代白 细 胞 过 滤 器 从 血 液 成 分 中 去 除 大 于 3 log(99.9
11、%)的白细胞,降低输血相关不良反应的发生率5。有研究表明红细胞悬液中白细胞的过滤与血小板有关6,那么白细胞过滤器在滤除白细胞的同时是否能减少血小板?本研究将检测不同储存时期红细胞悬液中血小板数量的变化以及白细胞过滤器对血小板去除的效率。1 材料与方法1.1研究设计本研究经中山大学附属第三医院伦理委员会批准(批准文号:2022-208)。红细胞悬液均来自广州血液中心,分为四组:保存1、2、3、4周的红细胞悬液分别归为第1、2、3、4组。红细胞悬液的保存温度为(42),红细胞添加剂为 CPDA(citrate phosphate dextrose adenine),储存期为 35 d。在专用实验室
12、过滤红细胞悬液,过滤前和过滤后计量红细胞的容积,并且获取样本进行相关检测。1.2材 料白细胞过滤器(FTS-RC 301 或 FTS-RC 302,南京双威生物技术有限公司,FTS-RC 301和FTS-RC 302的过滤器孔径相同,转移袋的容量不同)。全自动血细胞计数仪(BC-5000,深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司),高频热合机(GZR-,苏州市医用仪器厂),吉姆萨染色剂(BA-4017,珠海巴索生物科技有限公司),显微镜(CX43,奥林巴斯,日本)。1.3红细胞悬液的过滤1单位红细胞悬液用FTS-RC301过滤,1.5或2单位红细胞悬液用 FTS-RC302 过滤。无菌消毒后,将FTS
13、-RC 301或FTS-RC 302通过针刺插入红细胞悬液血袋,血液通过重力流过滤到转移血袋中。从每袋红细胞悬液中获取过滤前后的样本进行血小板计数。血小板去除率的计算算式如下:血小板去除率=(过滤前血小板计数过滤前红细胞悬液的容积-过滤后血小板计数过滤后红细胞悬液的容积)(过滤前血小板计数过滤前红细胞悬液的容积)100%1.4血小板形态检测将一滴血液放在干净的载玻片上,用另一个载玻片将血液涂成均匀的单层。将载玻片风干,放在染色架上。血液载玻片按照生产厂家说明书进行染色。首先用足够的染色剂淹没载玻片并染色1分钟;然后小心地加入pH值为6.8的缓冲液,不要溢出,轻轻混合,直到形成绿色的金属光泽;然
14、后用蒸馏水冲洗载玻片,风干,用显微镜观察血小板形态。1.5统计分析本实验的数据均符合正态分布,各组的方差具有齐性。数据采用 SPSS 20.0 软件进行单因素836第5期刘浩强,等.白细胞过滤器对红细悬液中血小板的去除效率ANOVA统计分析。数值以均值标准差表示,P0.05表示差异有统计学意义。2 结 果2.1不同储存时期红细胞悬液中血小板计数的变化14组分别包含16、16、14和12例样本。4组红细胞悬液中血小板的计数分别为 286.562.34109/L,238.057.37109/L,193.656.21109/L 和167.824.76109/L,经方差分析,4组间差异有统计学意义(F
15、=7.102,P=0.000 6),采用 Tukey 法作两两比较,发现第1组与第3组、第4组间比较差异均有统计学意义(P=0.001 1,P0.000 1),第2组与第4组比较差异也有统计学意义(P=0.001 4;图1)。2.2 不 同 储 存 时 期 红 细 胞 悬 液 中 血 小 板 的形态在显微镜下,储存14周的红细胞悬液标本制成的血细胞涂片中均可以观察到血小板,其形态正常,呈成群分布和散在分布两种形式(图2)。2.3白细胞过滤器对红细胞悬液中血小板的过滤效率经白细胞过滤器过滤后,4组红细胞悬液中残留的血小板计数为 63.5631.14 109/L,64.0032.18109/L,4
16、9.3622.75109/L 和 55.1718.44109/L,经方差分析,4组间差异无统计学意义(F=0.975 8,P=0.411 0)。各组血小板去除率分别为(80.139.06)%,(76.4110.13)%,(77.789.30)%和(70.639.39)%,经方差分析,4组间差异无统计学意义(F=2.396,P=0.078 3;图3)。3 讨 论随着血小板在临床的广泛应用,医务工作者发现有时候血小板输注后其增加量低于预期值,这就是血小板无效输注(platelet refractoriness,PTR)7-8。PTR的原因可分非免疫因素和免疫因素9-10。免疫因素包括怀孕、输血、移
17、植等,这些因素使血小板暴露于人白细胞抗原(human leukocyte antigen,HLA)和/或人血小板特异性抗原(human platelet antigens,HPA)的异体免疫10。临床所用的红细胞悬液中存在白细胞和血小板,白细胞表面表达有HLA,血小板表面同时表达 HLA 及 HPA。患者通Automatic blood cell counter showed platelet count in RBC units decreased gradually as the storage period increased.1)P 0.01 for Group 1 compared
18、with Group 3,and for Group 2 compared with Group 4,2)P 0.000 1 for Group 1 compared with Group 4.n=16,16,14 and 12 in Groups 1,2,3 and 4.图1不同储存时期红细胞悬液中血小板计数的变化Fig.1Changes of platelet count in RBC units during different storage periodsFig.2 showed that platelets with normal morphology were observed
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