HP-PRRSV对4种消毒剂的敏感性试验.pdf
《HP-PRRSV对4种消毒剂的敏感性试验.pdf》由会员分享,可在线阅读,更多相关《HP-PRRSV对4种消毒剂的敏感性试验.pdf(6页珍藏版)》请在咨信网上搜索。
1、中国兽医杂志():对 种消毒剂的敏感性试验杨慧莹 刘 稳 张丽杰 高云航 徐凤宇(吉林农业大学动物医学院 吉林 长春 农安县永安乡综合服务中心 吉林 长春)摘要:为了研究高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒()毒株对不同消毒剂的敏感性本试验选取浓戊二醛、聚维酮碘、复方新洁尔灭和过硫酸氢钾复合粉 种消毒剂依照 年版消毒技术规范分别采用悬液滴定法、中和剂鉴定试验和细胞培养法在不同浓度和温度下检测消毒剂作用、和 后 的滴度以及 对消毒剂的敏感性 结果显示 种消毒剂按照使用说明要求配制浓度在 和 环境下与病毒作用 后均可被彻底灭活 结果表明 毒株对所选消毒剂均有较高敏感性关键词:消毒剂 高致病性猪繁殖与呼吸
2、综合征病毒()敏感性 灭活效果中图分类号:.文献标志码:文章编号:()():().“”.:():收稿日期:基金 项 目:吉 林 省 科 技 发 展 计 划 项 目()国家现代农业产业技术体系建设专项()作者简介:杨慧莹()女硕士生研究方向为动物疾病预防与传染病控制:刘稳()男硕士生研究方向为动物疫病防控及环境控制:注:刘稳与杨慧莹对本文具有同等贡献通信作者:徐凤宇:猪繁殖与呼吸综合征()可导致怀孕母猪早产、流产、产死胎或木乃伊胎仔猪和育成猪出现呼吸道症状且死亡率较高 我国于 年末发现该病随后传播到全国 年我国南方地区暴发“高热病”主要特征为高热、高发病率和高死亡率最终确诊为高致病性猪繁殖与呼吸
3、综合征()使国内养猪业遭受重创 针对 的防控目前主流做法为疫苗防控国内市场虽能购买到不同类型 相关疫苗但防控效果始终不够理想且猪繁殖与呼吸综合征病毒()为单股正链 病毒易发生变异疫苗使用不当会增加患 风险给防控工作带来巨大困难 在疫病防控过程中切断传播途径至关重要 消毒剂可以杀灭病原体切断传播途径阻止、控制传染病发生 目前国内市场所售针对养殖行业的消毒剂种类繁多产品质量参差不齐 因此本试验以高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒()的临床分离株 为试验毒株选取目前国内市场主流消毒剂探究 对消毒剂的敏感性以期为 防控提供参考数据和技术支撑 材料与方法 试验材料 毒株和细胞临床分离株 为本实研 究 论 文
4、 卷验室从临床 患病猪的肺脏分离对其、基因序列进行遗传变异分析 毒株与以 毒株、毒株为代表的 亲缘关系较近故鉴定为 冰箱保存非洲绿猴胚胎肾细胞()由吉林农业大学马红霞老师馈赠 主要试剂 浓戊二醛(含量为/)、聚维酮碘(含量为 /)、过硫酸氢钾复合粉(有效氯含量不低于 活性氧含量质量分数为)和复方新洁尔灭(苯扎溴铵含量为 /)均购自上海源叶生物科技有限公司牛血清白蛋白()、硫代硫酸钠和卵磷脂均购自国药集团甘氨酸购自 公司吐温购自 公司 培养基购自北京普利莱基因技术有限公司北美特级 胎牛血清购自北京沃比森科技有限公司 消毒剂均用标准硬水稀释(去离子水中含 无水氯化钙和 六水氯化镁)试验方法 病毒悬
5、液制备和滴度测定 从 冰箱里取出 冻存液接种于已长满单层(密度为 )的 细胞 置于 、培养箱内培养 每 观察细胞待出现细胞病变效应()时收获病毒反复冻融 次先 /离心 再 /离心 取上清作为病毒悬液冻存备用 对收集的上清按照 的悬液滴定法测定半数组织培养感染剂量()中和剂鉴定试验为测定消毒剂对 的作用效果以及中和剂和中和剂与消毒剂产生的中和产物是否会对病毒滴度造成后续影响以 为试验毒株分别选用 种消毒剂及对应的中和剂进行中和剂鉴定试验参照参考文献 确定消毒剂对应中和剂:浓戊二醛对应中和剂为含 /甘氨酸的磷酸盐缓冲液()聚维酮碘对应中和剂为含 /硫代硫酸钠的 /吐温 过硫酸氢钾复合粉中和剂为含/
6、硫代硫酸钠的 复方新洁尔灭消毒液对应中和剂为含/卵磷脂的 /吐温试验分为 个组:第 组消毒剂 病毒悬液表示消毒剂对病毒有杀灭作用第 组(消毒剂 病毒悬液)中和剂表示消毒剂被中和后对病毒无残留灭活作用第 组中和剂 病毒悬液表示中和剂对病毒无影响第 组(消毒剂 中和剂)病毒悬液表示消毒剂的药效被中和病毒不会被杀灭第 组稀释剂 病毒悬液表示选择病毒可供试验使用即为阳性对照组第 组稀释液 中和剂表示中和剂未受病毒污染即为阴性对照组参照 年版消毒技术规范规定的悬液定量试验要求进行病毒滴度测定为进一步探究消毒剂对 致 细胞出现 的保护作用以及中和剂和中和产物对消毒剂灭活病毒在活体细胞中是否仍造成影响分别将
7、中和剂、消毒剂和中和产物接种于已长满单层(密度为 )的 细胞观察 试验分组:对照组分别为:硬水对照:培养基对照:对照中和剂组分别为:含 /甘氨酸的:含 /硫代硫酸钠的 /吐温:含 /硫代硫酸钠的:含 /卵磷脂的 /吐温 消毒剂组分别为:浓戊二醛:聚维酮碘:过硫酸氢钾复合粉:复方新洁尔灭中和产物组分别为中和剂与其对应作用的消毒剂:病毒对消毒剂的敏感性试验 采用细胞培养法分别选择 和 环境条件下进行敏感性试验 试验在水浴锅中进行 试验在恒温加样台中进行 参照消毒剂说明书使用浓度范围分别选择最大和最小稀释浓度进行稀释并保存备用 取 病毒悬液与 有机干扰物质()在 恒温水浴 加入 消毒液混匀并开始计时
8、分别作用、和 后取 混合液加至 中和剂中作用 后取出 进行 测定 以灭菌 代替消毒液其他条件不变作为阳性对照以 培养基代替消毒剂和病毒悬液其他条件不变作为阴性对照 试验与 试验步骤一致但所有试剂使用前均在 冰箱预冷 所有试验重复 次取平均值 按公式()计算病毒灭活对数绝对值病毒灭活对数绝对值 ()式中 为阳性对照(病毒)为消毒剂 结果 病毒滴度测定根据 法计算 毒株的病毒效价为 /中和剂鉴定试验 从表 可以看出各消毒剂第 组病毒无滴度或滴度较低说明消毒剂已灭活大部分病毒第 组病毒滴度比第 组高但低于第 期杨慧莹等:对 种消毒剂的敏感性试验、组说明消毒剂可以灭活病毒但在被中和剂中和后对病毒没有后
9、续灭活作用第、组的病毒生长量较为接近且组间误差小于 各滴度符合消毒技术规范要求说明各中和剂、中和剂与消毒剂所形成的中和产物对病毒滴度和宿主细胞生长无影响 结果表明第 组和第 组中的病毒滴度变低为消毒剂单独作用不受中和剂及中和后产生的中和产物影响且中和剂可以有效中和消毒剂 即含 /甘氨酸的 可有效中和戊二醛含 /卵磷脂的 /吐温 可有效中和新洁尔灭含 /硫代硫酸钠的 /吐温 可有效中和聚维酮碘含 /硫代硫酸钠的 可有效中过硫酸氢钾复合粉细胞试验结果如图 所示各对照组(:硬水表 中和剂、消毒剂和中和产物对病毒滴度的影响 消毒剂名称 病毒灭活对数绝对值()组 组 组 组 组 组浓戊二醛 复方新洁尔灭
- 配套讲稿:
如PPT文件的首页显示word图标,表示该PPT已包含配套word讲稿。双击word图标可打开word文档。
- 特殊限制:
部分文档作品中含有的国旗、国徽等图片,仅作为作品整体效果示例展示,禁止商用。设计者仅对作品中独创性部分享有著作权。
- 关 键 词:
- HP PRRSV 消毒剂 敏感性 试验
1、咨信平台为文档C2C交易模式,即用户上传的文档直接被用户下载,收益归上传人(含作者)所有;本站仅是提供信息存储空间和展示预览,仅对用户上传内容的表现方式做保护处理,对上载内容不做任何修改或编辑。所展示的作品文档包括内容和图片全部来源于网络用户和作者上传投稿,我们不确定上传用户享有完全著作权,根据《信息网络传播权保护条例》,如果侵犯了您的版权、权益或隐私,请联系我们,核实后会尽快下架及时删除,并可随时和客服了解处理情况,尊重保护知识产权我们共同努力。
2、文档的总页数、文档格式和文档大小以系统显示为准(内容中显示的页数不一定正确),网站客服只以系统显示的页数、文件格式、文档大小作为仲裁依据,平台无法对文档的真实性、完整性、权威性、准确性、专业性及其观点立场做任何保证或承诺,下载前须认真查看,确认无误后再购买,务必慎重购买;若有违法违纪将进行移交司法处理,若涉侵权平台将进行基本处罚并下架。
3、本站所有内容均由用户上传,付费前请自行鉴别,如您付费,意味着您已接受本站规则且自行承担风险,本站不进行额外附加服务,虚拟产品一经售出概不退款(未进行购买下载可退充值款),文档一经付费(服务费)、不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。
4、如你看到网页展示的文档有www.zixin.com.cn水印,是因预览和防盗链等技术需要对页面进行转换压缩成图而已,我们并不对上传的文档进行任何编辑或修改,文档下载后都不会有水印标识(原文档上传前个别存留的除外),下载后原文更清晰;试题试卷类文档,如果标题没有明确说明有答案则都视为没有答案,请知晓;PPT和DOC文档可被视为“模板”,允许上传人保留章节、目录结构的情况下删减部份的内容;PDF文档不管是原文档转换或图片扫描而得,本站不作要求视为允许,下载前自行私信或留言给上传者【自信****多点】。
5、本文档所展示的图片、画像、字体、音乐的版权可能需版权方额外授权,请谨慎使用;网站提供的党政主题相关内容(国旗、国徽、党徽--等)目的在于配合国家政策宣传,仅限个人学习分享使用,禁止用于任何广告和商用目的。
6、文档遇到问题,请及时私信或留言给本站上传会员【自信****多点】,需本站解决可联系【 微信客服】、【 QQ客服】,若有其他问题请点击或扫码反馈【 服务填表】;文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“【 版权申诉】”(推荐),意见反馈和侵权处理邮箱:1219186828@qq.com;也可以拔打客服电话:4008-655-100;投诉/维权电话:4009-655-100。