miR-155-5p和TRIP13在结直肠癌组织中的表达及与预后的关系.pdf
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1、论著m i R-1 5 5-5 p和T R I P 1 3在结直肠癌组织中的表达及与预后的关系徐阳 李红云 史铭 何波(解放军总医院第三医学中心肿瘤科,北京 1 0 0 0 3 9)【摘要】目的 探讨m i R-1 5 5-5 p及甲状腺激素受体因子1 3(T R I P 1 3)在结直肠癌(C R C)中的表达水平及与预后的关系。方法 选取2 0 1 5年1月2 0 1 7年5月本院经病理确诊的7 8例C R C患者为研究对象。采用实时荧光定量P C R(q R T-P C R)法检测C R C组织及癌旁组织中的m i R-1 5 5-5 p、T R I P 1 3 mR NA表达情况,免疫
2、组化染色法测定C R C组织及癌旁组织中T R I P 1 3蛋白表达情况;分析m i R-1 5 5-5 p、T R I P 1 3蛋白表达对C R C患者预后的影响;采用K a p l a n-m e i e r分析组织中m i R-1 5 5-5 p、T R I P 1 3蛋 白 对C R C患 者 预 后 的 影 响;采 用P e a r s o n检 验 分 析C R C组 织 中m i R-1 5 5-5 p与T R I P 1 3 mR NA表达水平的相关性;多因素C o x回归分析C R C患者预后的影响因素。结果 C R C组织m i R-1 5 5-5 p、T R I P
3、1 3 mR NA表达水平 及T R I P 1 3蛋 白 的 阳 性 表 达 率 明 显 高 于 癌 旁 组 织(P0.0 5),与患者T NM分期、肿瘤分化、淋巴结转移具有显著相关性(P0.0 5)。m i R-1 5 5-5 p高表达组5年内生存率(4 2.5 0%)低于低表达组(7 1.0 5%);T R I P 1 3蛋白阳性组5年内生存率(4 3.4 8%)低于阴性组(7 5.0 0%);C R C组织中m i R-1 5 5-5 p与T R I P 1 3 mR NA表达水平呈正相关(r=0.4 9 1,P0.0 5);C o x回归显示,肿瘤分化程度、TNM分期、淋巴结转移、m
4、 i R-1 5 5-5 p、T R I P 1 3是C R C患者预后的影响因素(P0.0 5)。结论 C R C组织中m i R-1 5 5-5 p、T R I P 1 3表达上调,并与C R C的进展和患者的预后有关,检测m i R-1 5 5-5 p、T R I P 1 3表达情况有助于患者的预后评估。【关键词】m i R-1 5 5-5 p;甲状腺激素受体因子1 3;结直肠癌;免疫组织化学【中图分类号】R 7 3 5.3;R 3 9 2.3 1 【文献标志码】A D O I:1 0.3 9 6 9/j.i s s n.1 6 7 2-3 5 1 1.2 0 2 3.1 1.0 2 1
5、 通讯作者:李红云,E-m a i l:1 0 9 4 4 4 1 8 4 7q q.c o m引用本文:徐阳,李红云,史铭,等.m i R-1 5 5-5 p和T R I P 1 3在结直肠癌组织中的表达及与预后的关系J.西部医学,2 0 2 3,3 5(1 1):1 6 7 3-1 6 7 8.D O I:1 0.3 9 6 9/j.i s s n.1 6 7 2-3 5 1 1.2 0 2 3.1 1.0 2 1T h e r e l a t i o n s h i p s b e t w e e n t h e e x p r e s s i o n o f m i R-1 5 5-5
6、 p,T R I P 1 3 a n d p r o g n o s i s i n c o l o r e c t a l c a n c e rX U Y a n g,L I H o n g y u n,S H I M i n g,H E B o(D e p a r t m e n t o f O n c o l o g y,T h e T h i r d M e d i c a l C e n t e r,P L A G e n e r a l H o s p i t a l,B e i j i n g 1 0 0 0 3 9,C h i n a)【A b s t r a c t】O b
7、 j e c t i v e T o i n v e s t i g a t e t h e e x p r e s s i o n l e v e l s o f m i R-1 5 5-5 p a n d t h y r o i d h o r m o n e r e c e p t o r f a c t o r 1 3(T R I P 1 3)i n c o l o r e c t a l c a n c e r a n d t h e i r r e l a t i o n s h i p w i t h p r o g n o s i s.M e t h o d s A t o t
8、 a l o f 7 8 p a t i e n t s w i t h c o l o r e c t a l c a n c-e r w h o w e r e p a t h o l o g i c a l l y d i a g n o s e d i n o u r h o s p i t a l f r o m J a n u a r y 2 0 1 5 t o M a y 2 0 1 7 w e r e s e l e c t e d a s t h e r e s e a r c h o b j e c t s.T h e e x p r e s s i o n o f m i
9、 R-1 5 5-5 p a n d T R I P 1 3 mR NA i n c o l o r e c t a l c a n c e r t i s s u e s a n d a d j a c e n t t i s s u e s w a s d e t e c t e d b y r e a l t i m e f l u o r e s c e n t q u a n t i t a t i v e P C R(q R T-P C R).T h e e x p r e s s i o n o f T R I P 1 3 p r o t e i n i n c o l o r
10、e c t a l c a n c e r t i s s u e s a n d a d j a c e n t t i s s u e s w a s d e t e r m i n e d b y i mm u n o h i s t o c h e m i c a l s t a i n i n g m e t h o d;t h e i n f l u e n c e o f m i R-1 5 5-5 p a n d T R I P 1 3 p r o-t e i n e x p r e s s i o n o n t h e p r o g n o s i s o f p a t
11、 i e n t s w i t h c o l o r e c t a l c a n c e r w a s a n a l y z e d.K a p l a n-m e i e r a n a l y s i s w a s u s e d t o a n a-l y z e t h e e f f e c t o f m i R-1 5 5-5 p a n d T R I P 1 3 p r o t e i n s o n t h e p r o g n o s i s o f c o l o r e c t a l c a n c e r p a t i e n t s.P e a
12、 r s o n t e s t w a s u s e d t o a n a l y z e t h e c o r r e l a t i o n b e t w e e n m i R-1 5 5-5 p a n d T R I P 1 3 mR NA e x p r e s s i o n i n c o l o r e c t a l c a n c e r.M u l t i v a r i a t e C o x r e g r e s-s i o n a n a l y s i s w a s u s e d t o a n a l y z e t h e p r o g n
13、 o s t i c f a c t o r s o f c o l o r e c t a l c a n c e r p a t i e n t s.R e s u l t s T h e e x p r e s s i o n l e v e l s o f m i R-1 5 5-5 p,T R I P 1 3 mR NA a n d t h e p o s i t i v e e x p r e s s i o n r a t e o f T R I P 1 3 p r o t e i n i n c o l o r e c t a l c a n c e r t i s s u e
14、 s w e r e s i g n i f i-c a n t l y h i g h e r t h a n t h o s e i n a d j a c e n t t i s s u e s,a n d t h e d i f f e r e n c e s w e r e s t a t i s t i c a l l y s i g n i f i c a n t(P0.0 5),a n d w a s s i g n i f i c a n t l y c o r r e l a t e d w i t h t h e p a t i e n t s T NM s t a g
15、e,t u m o r d i f f e r e n t i a t i o n,a n d l y m p h n o d e m e t a s t a s i s(P0.0 5).T h e 5-y e a r s u r v i v a l r a t e o f m i R-1 5 5-5 p h i g h e x p r e s s i o n g r o u p(4 2.5 0%)w a s l o w e r t h a n t h a t o f l o w e x p r e s s i o n g r o u p(7 1.0 5%).T h e 5-y e a r s
16、 u r v i v a l r a t e o f T R I P 1 3 p r o t e i n p o s i t i v e g r o u p(4 3.4 8%)w a s l o w e r t h a n t h a t o f n e g a t i v e g r o u p(7 5.0 0%).T h e r e w a s a p o s i t i v e c o r r e l a t i o n b e t w e e n m i R-1 5 5-5 p a n d T R I P 1 3 mR NA e x p r e s s i o n i n c o l
17、o r e c t a l c a n c e r(r=0.4 9 1,P0.0 5).C o x r e g r e s s i o n s h o w e d t h a t t u m o r d i f f e r e n t i a t i o n,T NM s t a g e,l y m p h n o d e m e t a s t a s i s,m i R-1 5 5-5 p a n d T R I P 1 3 w e r e p r o g n o s t i c f a c t o r s o f c o l o r e c t a l c a n c e r p a t
18、 i e n t s(P0.0 5).C o n c l u s i o n T h e e x p r e s s i o n o f m i R-1 5 5-5 p a n d T R I P 1 3 i s u p-r e g u l a t e d i n c o l o r e c t a l c a n c e r t i s s u e s,a n d i s r e l a t e d t o t h e p r o g r e s s i o n o f c o l o r e c t a l c a n c e r a n d t h e p r o g n o s i s
19、 o f p a t i e n t s.T h e d e t e c t i o n o f m i R-1 5 5-5 p a n d T R I P 1 3 e x p r e s s i o n i s h e l p f u l f o r t h e p r o g n o s i s a s s e s s m e n t o f p a t i e n t s.【K e y w o r d s】m i R-1 5 5-5 p;T h y r o i d h o r m o n e r e c e p t o r i n t e r a c t o r 1 3;C o l o
20、r e c t a l c a n c e r;I mm u n o h i s t o c h e m i s t r y 我国结直肠癌(C o l o r e c t a l c a n c e r,C R C)发病率位于恶性肿瘤第三位,且死亡率占据恶性肿瘤第二位,近年来其发病率、死亡率仍然有上升的趋势1。C R C早期症状不明显,大多数患者在中晚期时才发现患癌,对患者生存及生活质量造成了一定影响。目前,随着分子生物学研究的不断深入,肿瘤标志物已在肿瘤诊断、患 者 病 情 的 监 测 或 预 后 判 断 中 广 泛 地 应用2。微小R NA(m i c r o R NA,m i R NA)
21、在病理和生理过程中起重要作用,其中包括细胞的凋亡和代谢过程。m i R-1 5 5-5 p位 于 染 色 体2 1 q 2 1上,研 究 表 明m i R-1 5 5-5 p的表达水平与胆囊癌3、胃腺癌4、宫颈癌5、胰腺癌6等恶性肿瘤的发生、发展及不良预后有关。另有 研 究 指 出,靶 向 下 调m i R-1 5 5-5 p可 能 对C R C的治疗具有有效的作用7。甲状腺激素受体相互作用因子1 3(T h y r o i d h o r m o n e r e c e p t o r i n t e r a c t o r 1 3,T R I P 1 3)属于蛋白编码基因,在细胞减数分裂、
22、细胞增殖等过程中扮演着重要的角色8。目前,m i R-1 5 5-5 p、T R I P 1 3在多种恶性肿瘤组织中异常表达,但二者是否可共同参与C R C发病及对患者预后的价值尚未 清 楚。基 于 此,本 研 究 主 要 探 讨m i R-1 5 5-5 p、T R I P 1 3在C R C发生发展过程中的表达情况及预后的关系,并分析与临床指标、预后的关系,旨在为C R C预后评价、病理机制解析提供参考。1 资料与方法1.1 一般资料 收集2 0 1 5年1月2 0 1 7年5月本院确诊的7 8例C R C患者为研究对象。患者年龄3 17 2岁,平均(5 1.3 36.5 8)岁;男性4
23、2例,女性3 6例;按照 恶性肿瘤T NM分期 进行临床分期9,其中1 9例T NM I期患者,3 8例期患者,2 1例期患者;肿瘤大小2.36.9 c m,平均(4.22.1)c m;肿瘤位置:结肠4 5例,直肠3 3例;浸润深度:T 1患者1 4例,T 2患者1 5例,T 3患者2 6例,T 4患者2 3例;肿瘤分化程度低、中、高患者分别为1 9例、4 6例和1 3例;无淋巴结转移患者4 9例,发生淋巴结转移患者2 9例。纳入标准:所有患者经手术后诊断为C R C。接受术后切除或淋巴扫除治疗。术前未接受化疗、生物治疗等辅助治疗。患者神志清楚且积极配合研究。患者及家属知情且签署知情同意书。排
24、除标准:合并其他肿瘤。全身感染。合并重要器官病变。本研究经本院医学伦理委员会审核批准(批号:2 0 1 5 0 3 2 6)。1.2 主要试剂与仪器 T r i z o l试剂(货号:1 5 5 9 6 0 1 8)购 自 中 国 深 圳 子 科 生 物;m i S c r i p t S Y B R G r e e n q P C R K i t(货号:3 3 0 5 0 9)购自德国Q I AG E N公司;实时荧光定量P C R(R e a l t i m e f l u o r e s c e n t q u a n t i t a t i v e P C R,q R T-P C R)
25、仪购自美国B i o-R a d公司;超微量分光光度计购自中国上海昂拉仪器;R NA逆转录试剂盒(货号:P 0 1 0 1)购自吉赛生物;引物由上海生工生物工程有限公司合成;兔抗人T R I P 1 3多克隆抗体(货号:a b 2 0 4 3 3 1)购自中国a b c a m公司;E n v i s i o n二步法检测 试 剂 盒 与 二 氨 基 联 苯 胺(D i a m i n o b e n z i d i n e,D A B)显色剂(货号:E-I R-R 2 1 3)购自武汉伊莱瑞特生物。1.3 方法1.3.1 组织样本采集 采集所有患者肿瘤组织和癌旁组织,离体后迅速置于液氮中,然
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