EDTA依赖性血小板减少症血小板解聚方法在不同血细胞检测系统的效果评价.pdf
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1、临床检验杂志2 0 2 3年6 月第41卷第6 期D0I:10.13602/ki.jcls.2023.06.02EDTA依赖性血小板减少症血小板解聚方法在不同血细胞检测系统的效果评价Chin J Clin Lab Sci,Jun.2023,Vol.41,No.6 407.临床检验技术研究钟阳,李颖能,张伟红(广州市第一人民医院检验科,广州510 18 0)摘要:目的通过比较不同方法对2 5例EDTA依赖性血小板减少症(EDTA-PTCP)标本中聚集血小板(platelets,PLT)的荧光染色法通道(PLT-0)解离效果,为实验室处理EDTA-PTCP标本提供参考。方法收集2 0 2 0 年1
2、月至2 0 2 1年4月在广州第一人民医院符合诊断为EDTA-PTCP的2 5例患者的EDTA-K,抗凝静脉血。在血细胞分析仪旁采集静脉血于无抗凝剂管、构橡酸钠抗凝管、肝素抗凝管各1管,EDTA-K2抗凝管3管(A、B、C管)。无抗凝剂管即时检测所得值为患者PLT真值;肝素抗凝管、构橡酸钠抗凝管及A管在不同时间段(即时、0.5h、1.0 h、2.0 h、3.0 h)分别在2 台血细胞分析仪上测定PLT数值;B、C管分别放置0.5h、1.0 h 后,加入丁胺卡那霉素1.0、2.0、3.0 h后测定PLT数值,比较各管各时间段的PLT解聚情况。结果用XE-5000的PLT-O通道检测EDTA-PT
3、CP组2 5例样本的肝素、枸橡酸钠和EDTA-K2抗凝剂管PLT数值均随着样本放置时间的延长而下降。BC-6800Plus的PLT-0对EDTA-K2抗凝剂管在各时间段的PLT解聚率均大于XE-5000。加入丁胺卡那霉素后,BC-6800Plus的PLT-0对各管在各时间段PLT检测结果均比XE-5000更加接近准确值(即时检测值)。结论对于EDTA-PTCP血小板准确计数优先选用机旁抽血即时检测,在抽血1h内用BC-6800Plus的PLT-O模式检测或1h内加入丁胺卡那霉素检测是EDTA-PTCP患者获得准确的PLT数值的最佳方案。关键词:假性血小板减少;血小板聚集;XE-5000;BC-
4、6800Plus;丁胺卡那霉素;解离中图分类号:R446Evaluation for effectiveness of EDTA dependent pseudothrombocytopenia platelets depolymerization methods in differentblood cell analyzerZHONG Yang,LI Yingneng,ZHANG Weihong(Department of Laboratory Medicine,Guangzhou First Peoples Hospital,Guangzhou510180,Guangdong,China)
5、Abstract:Objective To compare the effects of dissociation for the aggregated platelets(PLT)in 25 samples with EDTA-dependentpseudothrombocytopenia(EDTA-PTCP)by different methods of fluorometric channels of platelet optical count(PLT-O)in order toprovide a reference for clinical laboratories in proce
6、ssing such samples.Methods A total of 25 samples of EDTA-K,anticoagulated ve-nous blood were collected from the patients eligible for the diagnosis of EDTA-PTCP in Guangzhou First Peoples Hospital from January2020 to April 2021.The venous blood samples were collected close to the hematocrit analyzer
7、 and distributed into the tubes:non-anti-coagulant,sodium citrate anticoagulation and heparin anticoagulation for each,and three tubes with EDTA-K,anticoagulation tube(tubes A,B and C).The obtained values of PLT from the non-anticoagulant tubes were taken for the true values.The heparin anticoag-ula
8、tion tubes,sodium citrate anticoagulation tubes and EDTA-A tubes were determined to obtain the values of PLT counts on two bloodcell analyzers at different time points(immediate,0.5,1.0,2.0 and 3.0 hours).The PLT counts in EDTA-B and C tubes were re-de-termined following placing for 0.5 and 1.0 hour
9、s,and subsequent addition of amikacin for 1.0,2.0 and 3.0 hours respectively.ResultsThe PLT values of the 25 samples of EDTA-PTCP group in the heparin,sodium citrate and EDTA anticoagulant tubes were all de-creased with the extension of placement time as determined by electrical impedance analysis i
10、n PLT-O channel of XE-5000.The PLTdepolymerization rates of the samples with EDTA-PTCP in EDTA anticoagulant tubes determined by PLT-O in BC-6800 Plus were supe-rior to those in XE-5000 at all time points.After the addition of amikacin,the PLT assay results determined in BC-6800 Plus for anyanticoag
11、ulant tube at each time period were all closer to the accurate values compared to the assay values in XE-5000.ConclusionFor accurate platelet count of EDTA-PTCP,immediate detection by machina sampling is preferred.In the face of EDTA-PTCP pa-tients,the best method to obtain accurate PLT values in ED
12、TA-PTCP patients,the determination by PLT-O mode in BC-6800 Plus orby adding amikacin within 1 hour of blood drawing should be the best solution mode for obtaining accurate PLT values in EDTA-PTCPpatients.Key words:pseudothrombocytopenia;platelet aggregation;XE-5000;BC-6800 Plus;Amikacin;dissociatio
13、n作者简介:钟阳,198 9年生,男,技师,大学本科,主要研究方向是血细胞准确计数。通信作者:张伟红,主任技师,E-mail:137 2 54948 46 16 3.c o m。文献标志码:A.408EDTA 依赖性假性血小板减少症(EDTA-de-pendent pseudo-thrombocytopenia,EDTA-PTCP)是由于在EDTA抗凝血中EDTA诱导血小板(platelets,PLT)中的特殊蛋白使PLT发生凝集导致PLT发生假性减少的现象。虽然这种现象发生的几率很低(0.0 7%1%)2 ,但却给临床诊治工作带来很大困扰,既容易造成误诊又延误时效,继而增加患者的经济负担3。
14、目前临床多应用电阻抗法(PLT-I法)对存在EDTA-PTCP现象的患者血液标本进行检测,但考虑到存在不同程度的PLT聚集反应,PLT-I法的PLT数值常低于实际值,最终无法提供数据参考4-5。针对这种现象,临床上提出使用枸橡酸钠、肝素钠等其他抗凝剂替代EDTA-K,进行抗凝以解决EDTA-PTCP的PLT聚集现象6 ,也有人提出在血中加入一定浓度的丁胺卡那霉素进行解聚7-8 。近几年,随着血细胞分析仪的快速发展,有文献报道迈瑞BC-6800Plus(具有解聚功能)的荧光染色法(PLT-O法)对EDTA-PTCP患者的全血进行检测时,能够纠正PLT聚集9-10 。本研究通过不同方法对2 5例E
15、DTA-PTCP患者样本中聚集PLT的PLT-O法解离效果进行比较,为实验室处理EDTA-PTCP样本提供参考。1材料与方法1.1标本来源1.1.1非EDTA-PTCP组收集50 例 PLT高(PLT30010/L)、中(10 0 10/LPLT30010/L)、低(PLT10010/L)值分布,检测仪器无PLT报警且镜检无聚集,无白细胞、红细胞碎片干扰的住院患者EDTA-K抗凝静脉血,每份标本2 mL,检测时间不超过4h,其中男2 9 例,女2 1例,年龄1 9 1岁,平均年龄57 岁。1.1.2EDTA-PTCP组收集2 0 2 0 年1月至2 0 2 1年4月PLT10010/L或在7
16、天内百分比减少50%静脉血标本;观察标本状态,排除因凝块造成的假性PLT减低;推片染色,镜检发现有PLT聚集符合诊断为EDTA-PTCP的2 5例患者的EDTA-K,抗凝静脉血,其中男11例,女14例,年龄2 6 9 8岁,平均年龄58 岁。EDTA-PTCP组患者均进行确认实验,患者在血细胞分析仪旁重新抽血置于EDTA-K,抗凝管中,若PLT数值随标本放置时间延长而下降且血涂片有血小板聚集则可确认为EDTA-PTCP患者。参与本次研究的患者均签署患者知情同意书,并得到广州第一人民医院伦理委员会的批准(批准临床检验杂志2 0 2 3年6 月第41卷第6 期ChinJClin Lab Sci,J
17、un.2023,Vol.41,No.61.2试剂和仪器静脉血无抗凝、EDTA-K,抗凝、枸橡酸钠抗凝、肝素抗凝真空采血管由广州阳普医疗用品公司提供;丁胺卡那霉素由齐鲁制药公司生产;瑞氏-吉姆萨复合染液由BASO公司提供;Olympus双目显微镜;SysmexXE-5000血细胞分析仪(XE-5000)和 MindaryBC-6800 Plus(BC-6800 Plus)血细胞分析仪均使用原厂配套试剂和质控品。1.3实验方法1.3.1实验前准备严格按照仪器说明书操作,操作前用配套的质控物和校准品进行质控和校准,设置XE-5000检测模式为:CBC+DIFF+NRBC+RET,BC-6800Plu
18、s检测模式为:CDR。1.3.2实验操作将非EDTA-PTCP组的标本颠倒混匀后分别在XE-5000和BC-6800Plus上进行检测,记录 PLT结果。对于 EDTA-PTCP组的标本,联系患者血细胞分析仪旁抽血,无抗凝剂管、肝素钠抗凝管、枸橡酸钠抗凝管各1管,EDTA-K,抗凝管3管(A、B、C 管),每管2 mL静脉血,采血过程严格依照操作规程进行。无抗凝剂管于XE-5000即时检测(尽快检测,避免血液发生凝固),用此检测所得PLT数值为患者的准确PLT数值;肝素抗凝管、枸橡酸钠抗凝管及EDTA-K抗凝A管在不同时间段(即时、0.5h、1.0 h、2.0 h、3.0 h),先后在XE-5
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