细菌性阴道炎实验室诊断研究进展.pdf
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1、协 和 医 学 杂 志 引用本文:王喆,赵颖,徐英春 细菌性阴道炎实验室诊断研究进展 协和医学杂志,():综 述细菌性阴道炎实验室诊断研究进展王 喆,赵 颖,徐英春中国医学科学院北京协和医院检验科,北京 通信作者:赵 颖,:【摘要】细菌性阴道炎(,)是由阴道内正常产生过氧化氢的乳杆菌减少、厌氧菌(动弯杆菌、普雷沃氏菌)和兼性厌氧菌(阴道加德纳菌、阴道阿托波菌)过度繁殖导致的阴道微生态平衡失调,表现为混合感染。不仅与盆腔炎、不孕症、性传播病原体(人乳头瘤病毒、人类免疫缺陷病毒、淋病奈瑟菌、沙眼衣原体等)感染风险增加相关,妊娠期合并 还可能导致早期流产、早产、产后子宫内膜炎和新生儿低出生体重等不良
2、妊娠结局。导致 的病原体多样,且经治疗后复发率高。约 的 患者无临床症状,易漏诊,而快速、准确的实验室检测能够对 患者进行及时诊断和治疗、避免不良结局的发生。本文就 的诊断标准、阴道微生态评价以及新型检测方法等研究进展作一综述,以期为 的临床诊断和治疗提供借鉴和参考。【关键词】细菌性阴道炎;实验室诊断;阴道微生态【中图分类号】;【文献标志码】【文章编号】():,:,:【】(),(,)(,),(,),协 和 医 学 杂 志,【】;,():细菌性阴道炎(,)是由阴道内正常产生过氧化氢的乳杆菌减少或消失、厌氧菌(动弯杆菌、普雷沃氏菌)和兼性厌氧菌(阴道加德纳菌、阴道阿托波菌)过度繁殖导致的阴道微生态
3、平衡失调,表现为混合感染,影响全球 的女性健康,多发生在性活跃期。不仅与盆腔炎、不孕症、性传播病原体(人乳头瘤病毒、人类免疫缺陷病毒、淋病奈瑟菌、沙眼衣原体等)感染风险增加相关,妊娠期合并 还可能导致早期流产、早产、产后子宫内膜炎和新生儿低出生体重等不良妊娠结局。导致 的病原体多样,且经治疗后复发率高(治疗后 个月复发率高达)。研究表明,不同地区、种族、就诊人群的 感染率存在差异,健康体检女性占比约 ,而因阴道炎相关症状就诊的患者占比约为 。然而,约 的 患者无临床症状,易漏诊,快速、准确的检测方法能够对 患者进行及时诊断和治疗、避免不良结局的发生。因此,本文就 的诊断标准、阴道微生态评价以及
4、新型检测方法等研究进展作一综述,以期为 的临床诊断和治疗提供借鉴与参考。诊断标准 诊断标准该诊断标准由 等学者于 年提出,是 临床诊断的金标准,即符合下列 项标准中的 项可诊断为:()均质、稀薄、灰白色的阴道分泌物;()胺试验阳性;()阴道分泌物 值;()线索细胞阳性(线索细胞数量阴道上皮细胞总数)。中华医学会妇产科学分会感染性疾病协作 组 发 布 的 细 菌 性 阴 道 病 诊 治 指 南(修订版)将上述“标准()”列为 诊断的必要条件。年美国疾病控制和预防中心(,)公布的 性传播疾病治疗指南 和 年美国妇产科医师协会(,)公布的 非妊娠期阴道炎管理指南 中不再将其作为必要条件,。该方法操作
5、简便、成本较低,能够在实验室条件有限的医疗机构中开展,其灵敏度为,特异度为,可重复性较低,且由于评估基于不可量化的临床症状进行,易受到潜在的观察者间偏差影响。评分标准该评分标准最早由 等于 年提出,目前已成为 实验室诊断的金标准。该方法将阴道分泌物进行革兰染色,并在 倍油镜下观察不同细菌的形态类型:乳杆菌(革兰染色阳性,细长弯曲或杆状、球杆状)、加德纳菌(革兰染色阴性,短杆状或小变形杆状)、普雷沃氏菌(革兰染色阴性)和动弯杆菌(革兰染色阴性、弯曲杆状;革兰染色不定、弯曲或弧形小杆状),根据每 个视野下的平均细菌数量进行评分:分为正常,分为 中间态,分诊断为,评分标准见表。该方法经济、省时,玻片
6、可长期存放,但制片和阅片过程尚未标准化,且表现为中至重度阴道炎症状的绝经后 患者阴道细菌群落与绝经前 患者不同,无法通过评分进行诊断。如将镜检与阴道细菌代谢产物检测结果相结合,能够更客观、精准地诊断。表 评分标准评分乳杆菌平均数量加德纳菌及普雷沃氏菌平均数量动弯杆菌平均数量或 或:平均细菌数量 个;:平均细菌数量为 个;:平均细菌数量为 个;:平均细菌数量 个 评分标准 评分是 欧洲国际性病控制联盟 世界卫生组织关于阴道分泌物(阴道炎症)管理指南推荐的 诊断最佳方法。对阴道分泌物的革兰染色涂片进行定性分级:()级为正常,仅见上皮细胞,未见细菌,提示近期使用过抗生素;()级为正常,乳杆菌为优势菌
7、群;()级为 中间态,乳杆菌减少,混合其他菌群,可见阴道加德纳菌或动弯杆菌;()级诊断为,乳杆菌显著减少或消失,以阴道加德纳菌和(或)动弯杆菌为主,可见线索细胞;()级与 无关,无乳杆菌存在,仅可见革兰阳性球菌。与 评分标准比较,细菌性阴道炎实验室诊断研究进展 评分对阴道微生物群的评估更全面,定量过程简化,仅进行定性分类,缩短了评估时间。阴道微生态评价阴道微生态系统由阴道解剖结构、阴道微生物群、机体内分泌系统和局部免疫系统共同组成。正常阴道微生态具有以下特点:阴道菌群密集度为级、多样性为 级、以革兰阳性杆菌为优势菌、值为 、乳杆菌功能正常、白细胞酯酶(,)阴性,任意一项指标异常,则判定为阴道微
8、生态失调,阴道对病原微生物抵抗力降低,可继发感染。中华医学会妇产科学分会感染性疾病协作组建议将形态学检测与功能学检测相结合,如二 者 检 测 结 果 不 一 致,则 以 形 态 学 检 测 结 果为准。形态学检测与 诊断相关的形态学检测指标包括阴道菌群密集度、阴道菌群多样性、优势菌群。阴道菌群密集度通过 油镜下每个视野的平均细菌数反映阴道分泌物菌群总生物量:级即平均细菌数为 个,级为 个,级为 个及以上且光镜下细菌满视野,级为细菌聚集成团或密集覆盖于上皮细胞。阴道菌群多样性反映微生态中细菌种类的丰富程度,级为 种,级为 种,级为 种,级为 种及以上。优势菌群是对宿主生理病理影响最大的细菌,包括
9、革兰阳性杆菌、革兰阳性球菌 弧菌、革兰阴性短杆菌 弧菌。功能学检测与 相关的功能学检测指标包括 值、过氧化氢浓度、唾液酸苷酶(,)、。值采用干棉签刮取阴道分泌物,用精密 试纸(值正常范围 )检测 值。该方法快速、经济、简便,尤其适用于无显微镜设备的医疗机构,但易受到与 无关的因素如近期性交、阴道灌洗、合并其他阴道感染的影响。过氧化氢浓度由于过氧化氢在酶的催化作用下可与底物发生显色反应,且阴道中的过氧化氢来源于乳杆菌。因此,可使用试剂盒或改良的 肉汤培养基检测过氧化氢浓度,从而判断阴道内乳杆菌含量。是阴道加德纳菌、普雷沃氏菌、拟杆菌、动弯杆菌等合成的一种特异性酶,其活性与病原菌数量成正比,以阴道
10、上皮细胞表面的唾液酸聚糖为底物,在生物膜的形成中发挥重要作用。患者阴道分泌物标本 活性高于正常女性,且高水平 活性与早产风险相关。目前,临床普遍采用人工合成的外源性底物与 发生显色反应,对 诊断具有很高的预测价值。(公司,美国)是一种测定阴道分泌物中 水平的快速检测试纸,内即可获取结果,以 评分 和 评 分 作 为 金 标 准,其 灵 敏 度 均 为,特异度分别为 和。等报道四价唾液酸包被的四苯乙烯发光剂亲水性及稳定性优良,对 具有独特选择性,结合力较传统单糖显色底物提高,最大荧光增强约 倍。等研究发现基于生物化学发光原理的实时定量检测法,底物唾液酸经荧光素酶催化产生光信号,预期信号强度与 活
11、性成正比。以 评分为金标准,法 的 灵 敏 度 和 特 异 度 分 别 为 和,该方法可根据 活性水平对 患者进行分层,具有评估早产风险、监测抗生素治疗效果的潜力。主要存在于中性粒细胞中,阴道黏膜受损时,因趋化作用聚集在病灶周围的中性粒细胞被大量破坏并释放。与 溴 氯吲哚乙酸盐反应,产物呈绿色或蓝色。研究表明,、外阴阴道假丝酵母菌病、滴虫性阴道炎的 检测阳性率为。目前,干化学酶法因可同时测定阴道分泌物标本中的 值、过氧化氢浓度、及 而被广泛应用,虽然该方法较为简便,搭配自动检测系统可降低人工成本,但以 评分为金标准,该方法的阳性符合率为,阴性符合率为,总符合率为 ,一致性中等()。因此,其仍无
12、法取代形态学检测在 诊断中的重要作用。综上,阴道微生态评价可作为 诊断的有效手段。何亮等研究表明,阴道微生态评价诊断阳性率为 ,优于 诊断()和 诊断()。吴秀珍等将 诊断作为金标准,阴道微生态评价诊断 的灵敏度为 ,特异度为,准确度为,阳性预测值为,阴性预测值为 。蔡斌等采用阴道微生态评价检测 名健康体检女性及 例因阴道炎相关症状而就诊的患者标本,在提高 诊断率的同时(阴道微生态评价诊断 例,白带常规诊断协 和 医 学 杂 志,例),发现乳杆菌减少者 例(比例),乳杆菌消失者 例,为临床诊治提供了传统阴道分泌物检测无法获得的证据。因此,阴道微生态评价在诊断 的同时,能够识别外阴阴道假丝酵母菌
13、病、滴虫性阴道炎、需氧菌性阴道炎和各种混合性阴道感染。对于仅有阴道不适症状而传统阴道分泌物常规检测正常的患者,能够提高临床诊断率,指导对因治疗。分子诊断技术 直接探针杂交 检测试剂盒(公司,美国)是人工合成的 单链寡核苷酸探针,特异性捕获阴道分泌物中阴道加德纳菌核酸,形成的双链复合物可与显色探针结合,并且通过酶的催化作用将指示物底物转化为蓝色产物。该方法可在 内检测阴道分泌物中浓度 的阴道加德纳菌,被美国 和 指南推荐为临床无法进行显微镜检查时的替代方法,与显微镜检查相比,该方法的灵敏度和特异度分别为 和。魏冰等采用 检测经 评分标准诊断为 的 例患者的阴道分泌物标本,灵敏度为,特异度为 ,值
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