暖地杓兰种子繁育与栽培研究.pdf
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1、/暖地杓兰种子繁育与栽培研究华梅 蒋宏 周彬 孔继君(云南省林业和草原科学院 云南 昆明 国家林业和草原局云南珍稀濒特森林植物保护和繁育重点实验室/云南省森林植物培育与开发利用重点实验室 云南 昆明)摘要:以暖地杓兰成熟未裂开的果荚作为试验材料 采用非共生萌发方法对暖地杓兰种子进行萌发培养 观察统计暖地杓兰种子萌发的时间及萌发率 筛选适合暖地杓兰种子萌发的培养基及培养方法 同时在获得的暖地杓兰无菌苗的基础上 筛选适合暖地杓兰幼苗栽培的基质及方法 结果显示:()在改良 培养基中暗培养 个月后 种子开始陆续萌发 种子的萌发率为 添加 (二甲基烯丙基氨基)嘌呤()能提高暖地杓兰种子的萌发率()且原球
2、茎未褐化()暖地杓兰种子萌发成原球茎后 先分化出根在继代培养基中根长大长粗 并进一步分化出芽点 经过继代培养后根长到 左右 具 条根时即可进行炼苗处理 炼苗后的根茎苗洗净杀菌后避光放入 冰箱进行春化处理 个月 之后再进行栽培能明显地提高苗的成活率()在体积比为 的泥炭土和兰石混合基质中栽培 后 芽点进一步长大 并舒展长出叶片 成活率在 以上 结果表明:在改良 培养基(含)中暖地杓兰种子能成功萌发长成根茎苗 原球茎及苗均未出现褐化 出瓶苗春化后能顺利长大 最终能实现回归到原生境中使种群得以复壮关键词:暖地杓兰 非共生萌发 繁育与栽培中图分类号:文献标识码:文章编号:()():.()()().第
3、卷 期 年 月 西 部 林 业 科 学 收稿日期:基金项目:国家自然科学基金()云南省林业和草原科学院重点实验室基金()科技基础资源调查专项专题(、)云南省重点研发计划社会发展专项专题()第一作者简介:华梅()女 硕士 助理研究员 主要从事兰科植物保育及繁育研究:通信作者简介:孔继君()女 硕士 副研究员 主要从事兰科植物传粉及繁育研究:.().:暖地杓兰()是野生动植物濒危物种国际贸易公约附录 物种 被世界自然保护联盟(物种红色名录)列为极危()物种 被国家重点保护野生植物名录(版)列为一级保护植物 被云南省生物物种红色名录(版)列为极危物种 被中国生物多样性红色名录:高等植物版(版)列为易
4、危()物种 在全国极小种群野生植物拯救保护工程规划(年)中 暖地杓兰作为 种极小种群植物之一优先纳入了规划 实施保护暖地杓兰是杓兰属()在亚洲唯一的亚热带种 国内目前有少量分布 活植株仅存不足 株 暖地杓兰为仅有的常绿叶多花杓兰唇瓣独特 花色艳丽 具有非常高的观赏价值 遭受过度的商业化采集 加之原生境遭破坏和种群退化等原因 野外活体数量逐年锐减濒临灭绝 对暖地杓兰的保育工作迫在眉睫 人工繁育、引种回归、种群复壮、重建是兰科植物保育的有效措施杓兰的繁殖主要以种子无菌(非共生)萌发为主 繁殖的关键在于种子的质量及成熟度暖地杓兰的传粉昆虫为食蚜蝇()因原生环境因素传粉昆虫较少 自然结实率非常低 野外
5、获取种子比较困难 暖地杓兰种子像其他兰科植物一样 细小如尘 无胚乳 无法提供种子萌发所必需的养分 同时暖地杓兰种子内层种皮被压缩成薄薄的一层 紧紧地包裹着胚 而外层种皮逐渐拉长 成熟种子看起来像头发一样 木质化的内层和外层种皮导致种子休眠 种子萌发极其困难 采用非共生的萌发方法 以暖地杓兰成熟未开裂的果荚为试验材料 筛选适合的萌发、继代培养基及培养方法 筛选适合暖地杓兰幼苗栽培的基质及栽培方法 有望解决暖地杓兰繁殖中的种子萌发率低、继代褐化及死苗、无菌苗出瓶成活率低、环境适应性差、幼苗生长缓慢等问题 获得的大量种苗 为暖地杓兰的回归、保育及产业化开发利用奠定基础 材料与方法 试验材料 暖地杓兰
6、种子繁育材料暖地杓兰种子繁育材料采用野外居群人工授粉后所结的成熟未裂开的果荚 暖地杓兰种子非共生萌发培养基暖地杓兰种子非共生萌发基础培养基、/、/、花宝 号、改良 培养基改良 培养基为在原 培养的基础上 大量元素:、浓度减半 其他元素改用 /苹果酸、/蔗糖和 /琼脂构成 具体的配方见表 表 改良 培养基 大量元素成分质量浓度/维生素质量浓度/肌醇 维生素 维生素 维生素 微量元素质量浓度/氨基酸质量浓度/谷氨酰胺 丙氨酸 半胱氨酸 精胺酸 亮氨酸 苯丙氨酸 柠檬酸铁 酪氨酸 其他元素质量浓度苹果酸 /琼脂/蔗糖/西 部 林 业 科 学 年继代培养培养基 改良 培养基的基础上再添加/马铃薯匀浆构
7、成 萌发培养基和继代培养基 值调节至 然后经过高温高压灭菌 实验方法 暖地杓兰人工授粉选取云南马关野生居群暖地杓兰开花植株(七月初盛开)进行套袋并人工异花授粉 记录授粉时间授粉时间授粉最佳时间为母本开花后 父本取已充分成熟的花粉块 以提高坐果率花粉块以松软膨胀、帽盖被稍顶起、边缘微显花粉为佳 一般选择在晴天 时进行雨天或露水未干时不宜授粉授粉方法 授粉工具一般用尖嘴镊子 无镊子可用针或竹针 授粉时先用镊子自下往上挑开父本药帽 将花粉块移到干净纸片上 随手将选定的母本的柱蕊和唇瓣撑开 夹取花粉块放到柱头上让粘液粘住 然后把柱蕊和唇瓣恢复原状 暖地杓兰果荚及种子采收采集暖地杓兰人工异花授粉后 的果
8、荚作为种子繁育的材料 暖地杓兰果荚无菌处理采集成熟未裂开的暖地杓兰果荚 将果荚进行清洗 在无菌环境下用大量无菌水冲洗 果荚表面用 无水乙醇擦拭 后用 的次氯酸钠溶液(内加一滴 )消毒 再用 升汞消毒 表面灭菌后 将果荚切开 在无菌培养皿中用镊子取出种子 暖地杓兰种子繁育及培养基筛选配制、/、/、花宝 号、改良 培养基 用 /溶液来调节培养基的 至 在 高压灭菌 将已消毒的暖地杓兰种子均匀的播撒到培养基表面 每瓶约 粒种子 将培养瓶在()和恒定黑暗的生长室中进行培养 种子膨胀胚突破种皮确认为种子萌发 萌发率的计算方法是将萌发的种子数除以种子总数并乘以 根据种子的萌发情况及萌发率筛选出适合暖地杓兰
9、种子萌发的培养基 暖地杓兰继代培养将已萌发并长到一定大小的暖地杓兰根茎苗转接到继代培养基中进行继代培养 暖地杓兰种苗移植前处理将可以出瓶的暖地杓兰无菌苗进行炼苗处理(将待出瓶无菌苗组培瓶放置于大棚中的阴凉位置处一周 后将瓶盖拧松 再放置一周 再将瓶盖拧开一半 再放置一周 最后将瓶盖全部拿开 放置一周 炼苗时将大棚温度控制在 相对湿度 光照强度为 )然后洗净根部培养基 将幼苗放在自封袋中(保湿)放入 冰箱进行春化 春化期间注意观察湿度及芽的情况 春天转暖时即可移栽 暖地杓兰种苗移栽及不同栽培基质对移栽的影响栽培基质分别选用森林土、森林土和树皮、泥炭土和兰石混合基质 基质用 倍的高锰酸钾溶液进行杀
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- 关 键 词:
- 种子 繁育 栽培 研究
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