检测新生儿溶血标本NSE校正公式的建立.pdf
《检测新生儿溶血标本NSE校正公式的建立.pdf》由会员分享,可在线阅读,更多相关《检测新生儿溶血标本NSE校正公式的建立.pdf(4页珍藏版)》请在咨信网上搜索。
1、论著检测新生儿溶血标本N S E校正公式的建立*常珊碧 张保荣 沈洁 蒋曼丽 王跃帮(宿迁市第一人民医院医学检验科,江苏 宿迁 2 2 3 8 0 0)【摘要】目的 分析溶血对新生儿神经元特异性烯醇化酶(N S E)的影响,建立新生儿溶血N S E校正公式。方法 选取5 0份出生2 4 h的新生儿样本,离心分离上层血清,添加反复冻融红细胞悬液,罗氏E 6 0 2电化学发光检测血清中N S E浓度,应用仪器法和氰化高铁法(H i C N)分别检测血清中血红蛋白(H b)结果,分别建立N S E校正公式。分析仪器法和H i C N法N S E的浓度变化(N S E)的相关性,评价仪器法N S E校
2、正公式的可行性。结果 5 0份溶血样本 N S E为(3 5.6 22.1 7)g/g H b。以 N S E为Y轴、H bH i C N为X轴,血清N S E浓度变化与H b浓度变化之间的相关方程Y N S E=3 2.9 0H b全血浓度+1.5 8(r2=0.9 9 1,P0.0 0 1),Y N S E=3 0.9 7H b H I C N+1.1 1(r2=0.9 8 1,P0.0 0 1)。仪器法和H i C N法得出N S E结果呈较高相关性(r2=0.9 3 3,P0.0 1)且两者之间差异无统计学意义(P=0.4 1 3)。结论 溶血样本严重影响新生儿N S E检测结果。校正
3、后的N S E结果,可以为临床诊断提供参考价值。【关键词】新生儿;溶血样本;校正公式;仪器法;氰化高铁血红蛋白测定法;神经元特异性烯醇化酶【中图分类号】R 7 7 2.1 【文献标志码】A D O I:1 0.3 9 6 9/j.i s s n.1 6 7 2-3 5 1 1.2 0 2 3.0 9.0 2 9 基金项目:宿迁市临床医学检验实验室(M 2 0 1 9 0 2)通讯作者:王跃帮,硕士,副主任技师,E-m a i l:3 3 0 6 6 7 4 8 9q q.c o m引用本文:常珊碧,张保荣,沈洁,等.检测新生儿溶血标本N S E校正公式的建立J.西部医学,2 0 2 3,3 5
4、(9):1 3 9 5-1 3 9 8.D O I:1 0.3 9 6 9/j.i s s n.1 6 7 2-3 5 1 1.2 0 2 3.0 9.0 2 9E s t a b l i s h m e n t o f N S E c o r r e c t i o n f o r m u l a f o r d e t e c t i n g h e m o l y t i c s a m p l e s o f N e o n a t eC H A N G S h a n b i,Z H A N G B a o r o n g,S H E N J i e,J I A N G M a n
5、l i,WA N G Y u e b a n g(D e p a r t m e n t o f M e d i c a l L a b o r a t o r y,S u q i a n F i r s t H o s p i t a l,S u q i a n 2 2 3 8 0 0,J i a n g s u,C h i n a)【A b s t r a c t】O b j e c t i v e T o a n a l y z e t h e e f f e c t o f h e m o l y s i s o n n e o n a t a l n e u r o n s p e
6、c i f i c e n o l a s e(N S E)a n d e s t a b l i s h t h e c o r r e c t i o n f o r m u l a o f N S E.M e t h o d s 5 0 s a m p l e s o f n e w b o r n b a b i e s l e s s t h a n 2 4 h o l d w e r e s e l e c t e d.T h e u p p e r s e r-u m w a s s e p a r a t e d b y c e n t r i f u g a t i o n,
7、a n d r e p e a t e d f r e e z e-t h a w r e d c e l l s u s p e n s i o n w a s a d d e d.T h e c o n c e n t r a t i o n o f N S E i n s e r u m w a s d e t e c t e d b y R o c h e E 6 0 2 e l e c t r o c h e m i l e s c e n c e.T h e s e r u m h e m o g l o b i n(H b)w a s d e t e c t e d b y i
8、n s t r u m e n t m e t h o d a n d h i g h f e r r i c c y a n i d e m e t h o d(H i C N).T h e N S E c o r r e c t i o n f o r m u l a w a s e s t a b l i s h e d r e s p e c t i v e l y.T h e c o r r e l a-t i o n o f N S E c o n c e n t r a t i o n c h a n g e s(N S E)b e t w e e n t h e i n s t
9、 r u m e n t a l m e t h o d a n d H i C N m e t h o d w a s a n a l y z e d,a n d t h e f e a s i b i l i t y o f t h e N S E c o r r e c t i o n f o r m u l a o f t h e i n s t r u m e n t a l m e t h o d w a s e v a l u a t e d.R e s u l t s N S E o f 5 0 h e m o l y t i c s a m-p l e s w a s(3 5
10、.6 22.1 7)g/g H b.T h e c o r r e l a t i o n e q u a t i o n b e t w e e n t h e c h a n g e o f s e r u m N S E c o n c e n t r a t i o n a n d t h e c h a n g e o f H b c o n c e n t r a t i o n i s Y-a x i s w i t h N S E a s t h e Y-a x i s a n d H B H I C N a s t h e x-a x i s N S E=3 2.9 0*H
11、b w h o l e b l o o d c o n c e n t r a t i o n+1.5 8(r2=0.9 9 1,P0.0 0 1),Y N S E=3 0.9 7*H b H I C N+1.1 1(r2=0.9 8 1,P0.0 0 1).T h e r e w a s a h i g h c o r r e l a t i o n b e t w e e n N S E r e s u l t s o b t a i n e d b y i n s t r u m e n t a l m e t h o d a n d H i C N m e t h o d(r2=0.9
12、 3 3,P0.0 1),a n d t h e r e w a s n o s i g n i f i c a n t d i f f e r e n c e b e t w e e n t h e m(P=0.4 1 3).C o n c l u s i o n H e m o l y t i c s a m p l e s s e r i o u s l y a f f e c t t h e d e t e c t i o n r e s u l t s o f n e o n a t a l N S E.T h e c o r r e c t e d N S E r e s u l
13、t s c a n p r o v i d e r e f e r e n c e v a l u e f o r c l i n i c a l d i a g n o s i s.【K e y w o r d s】N e o n a t e;H e m o l y t i c s a m p l e;I n s t r u m e n t a l m e t h o d;H I C N;C o r r e c t i o n f o r m u l a;N e u r o n s p e c i f i c e n o l a s e 新生儿缺氧缺血性脑病(H y p o x i c i
14、s c h e m i c e n-c e p h a l o p a t h y,H I E)是指围生期各种原因导致的脑组织部分或完全缺氧、脑血流供应降低导致的新生儿大脑损伤。研究显示,尽管围生期诊疗技术明显提高,H I E仍 是 全 球 新 生 儿 发 病 和 死 亡 的 重 要 原 因 之一1-2。神经元特异性烯醇化酶(N e u r o n-s p e c i f i c e n o-l a s e,N S E)是H I E的敏感标志物,是一种酸性蛋白酶,5931西部医学 2 0 2 3年9月 第3 5卷第9期 M e d J W e s t C h i n a,S e p t e m
15、 b e r 2 0 2 3,V o l.3 5,N o.9也是糖酵解作用的关键胞内酶,炎症损伤细胞和肿瘤细胞由于增值周期加快,糖酵解作用增强,导致N S E大量释放入血液,使血清中此酶含量增高3-6。N S E特异性存在于神经元、神经组织来源的肿瘤组织以及神经内分泌细胞中7-8,血清中N S E的浓度对新生儿缺氧缺血性脑病、嗜铬细胞瘤、神经母细胞瘤以及小细胞肺和急性淋巴细胞白血病等疾病的鉴别诊断、疗效评估和预后等方面具有重要意义9-1 1。在血小板和红细胞中有亚基的N S E同工酶,因此当标本溶血时,N S E同工酶释放到胞外与血清N S E出现部分交叉免疫反应,使检测结果偏高,影响报告的真
16、实性和可靠性1 2-1 3。临床上新生儿采血极其困难,血清标本经常有不同程度的溶血,故本研究通过建立新生儿溶血校正公式,以探讨其诊断新生儿疾病的可行性。1 材料与方法1.1 研究对象 选取2 0 2 1年15月本院新生儿科出生的新生儿血清样本5 0例,其中男性2 8例、女性2 2例,时间2 4 h。同时回顾性分析2 0 2 1年15月出生的2 3 7例新生儿黄疸指数(I c t e r u s)以及溶血指数(H a e m o l y s i s),患儿家属均同意并签署同意书,本研究经医院伦理委员会批准。1.2 仪器与试剂 佑科7 5 2 N紫外可见分光光度计购自上海佑科仪器仪表有限公司;R
17、O CHE E 6 0 2全自动化学发光免疫分析仪及N S E配套原装试剂(批号:5 2 3 7 0 3 0 1)购自瑞士罗氏公司;S y s m e x X N-9 0 0 0全自动血液分析仪及配套试剂、S L S溶血剂(批号:A 1 0 0 4)购自日本S y s m e x公司,T 5 D低温水平离心机购自上海卢湘仪公司;氰化高铁血红蛋白(c y a n m e t h e m o g l o-b i n,H i C N)标准液和文齐氏液均购自上海信帆生物科技有限公司。1.3 实验方法1.3.1 标准曲线的建立 采用佑科7 5 2 N紫外可见分光光度计分别测定 5 0、1 0 0、1 5
18、 0、2 0 0、2 5 0 g/L H b标准液在5 4 0 n m处的吸光度值(用A表示),以吸光度为横坐标,H b浓度为纵坐标,制作标准曲线。将5份新鲜的全血样本加到干燥洁净的试管内,轻轻摇匀后,用E p p e n d o r f微量移液器吸取2 0 L混合全血加到含有5 m L文齐氏液的试管中中,轻轻摇匀,5 m i n后测定O D值,通过标准可得到血红蛋白浓度。用0.9%生理盐水将混合全血分别稀释成H b浓度为的2 0、1 0、5、2.5、1.2 5、0.6 2 5 g/L的样本。分别吸取1 0 0 L上述样本加入到含有2.5 m L文齐氏液的试管中并摇匀,5 m i n测定5 4
19、 0 n m处的吸光度值(A),以吸光度值为横坐标,H b浓度为纵坐标,绘制血清H b标准曲线。1.3.2 血清N S E结果检测 选取当日检测的新生儿全血新鲜样本,3 5 0 0 r p m离心1 0 m i n,分离血清,用移液器吸取下层红细胞3 0 0 L于冷冻管内,将冷冻管在8 0 冰箱内,放置2 0 m i n,取出室温平衡3 0 m i n至完全溶解,重复上述步骤5次。选取当日检测的含有分离胶的血样,用E p p e n d o r f移液器吸取血清2 0 0 L加入到干净的试管内,加入5 L上述红细胞,充分混匀后3 5 0 0 r p m离心1 0 m i n,分离血清,用于检测
20、N S E浓度。1.3.3 血清H b浓度测定 用E p p e n d o r f移液器分别吸取上述血清1 0 0 L和文齐氏液2.5 m L至一洁净的试管内,轻轻摇匀,5 m i n 内测定5 4 0 n m处的吸光度(A)值,根据血清 H b标准曲线计算出H b浓度。1.3.4 N S E检测方法的相关性 按照美国临床实验室标准化协会(C l i n i c a l a n d L a b o r a t o r y S t a n d a r d s I n-s t i t u t e,C L S I)的文件E P 9-A 2要求,对采用H i C N法和X N-9 0 0 0全自动血
21、液分析仪(仪器法)建立的校正公式,评价两者之间的相关性。1.4 统计学分析 采用S P S S 2 2.0软件进行统计学分析,计量资料以(xs)表示。N S E的差值 N S E(n g/m L)与血红蛋白H b浓度的关系进行P e a r s o n相关性 分 析,仪 器 法 和H I C N法 N S E的 比 较 应 用M a n n-Wh i t n e y U秩和检验。以P0.0 5为差异有统计学意义。2 结果2.1 一般结果 2 g/L占 9.2 8%(2 2/2 3 7)。2.2 H b标准曲线的建立 全血样本H b浓度的标准曲线为H b全=3 2 8.7 3A5 4 0 n m
- 配套讲稿:
如PPT文件的首页显示word图标,表示该PPT已包含配套word讲稿。双击word图标可打开word文档。
- 特殊限制:
部分文档作品中含有的国旗、国徽等图片,仅作为作品整体效果示例展示,禁止商用。设计者仅对作品中独创性部分享有著作权。
- 关 键 词:
- 检测 新生儿 溶血 标本 NSE 校正 公式 建立
1、咨信平台为文档C2C交易模式,即用户上传的文档直接被用户下载,收益归上传人(含作者)所有;本站仅是提供信息存储空间和展示预览,仅对用户上传内容的表现方式做保护处理,对上载内容不做任何修改或编辑。所展示的作品文档包括内容和图片全部来源于网络用户和作者上传投稿,我们不确定上传用户享有完全著作权,根据《信息网络传播权保护条例》,如果侵犯了您的版权、权益或隐私,请联系我们,核实后会尽快下架及时删除,并可随时和客服了解处理情况,尊重保护知识产权我们共同努力。
2、文档的总页数、文档格式和文档大小以系统显示为准(内容中显示的页数不一定正确),网站客服只以系统显示的页数、文件格式、文档大小作为仲裁依据,平台无法对文档的真实性、完整性、权威性、准确性、专业性及其观点立场做任何保证或承诺,下载前须认真查看,确认无误后再购买,务必慎重购买;若有违法违纪将进行移交司法处理,若涉侵权平台将进行基本处罚并下架。
3、本站所有内容均由用户上传,付费前请自行鉴别,如您付费,意味着您已接受本站规则且自行承担风险,本站不进行额外附加服务,虚拟产品一经售出概不退款(未进行购买下载可退充值款),文档一经付费(服务费)、不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。
4、如你看到网页展示的文档有www.zixin.com.cn水印,是因预览和防盗链等技术需要对页面进行转换压缩成图而已,我们并不对上传的文档进行任何编辑或修改,文档下载后都不会有水印标识(原文档上传前个别存留的除外),下载后原文更清晰;试题试卷类文档,如果标题没有明确说明有答案则都视为没有答案,请知晓;PPT和DOC文档可被视为“模板”,允许上传人保留章节、目录结构的情况下删减部份的内容;PDF文档不管是原文档转换或图片扫描而得,本站不作要求视为允许,下载前自行私信或留言给上传者【自信****多点】。
5、本文档所展示的图片、画像、字体、音乐的版权可能需版权方额外授权,请谨慎使用;网站提供的党政主题相关内容(国旗、国徽、党徽--等)目的在于配合国家政策宣传,仅限个人学习分享使用,禁止用于任何广告和商用目的。
6、文档遇到问题,请及时私信或留言给本站上传会员【自信****多点】,需本站解决可联系【 微信客服】、【 QQ客服】,若有其他问题请点击或扫码反馈【 服务填表】;文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“【 版权申诉】”(推荐),意见反馈和侵权处理邮箱:1219186828@qq.com;也可以拔打客服电话:4008-655-100;投诉/维权电话:4009-655-100。