多波长HPLC-DAD法同时测定美白类化妆品中8种甘草化学成分.pdf
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1、 作者简介:吴晓云女副主任药师研究方向:中药与化妆品检测、质量控制:.通信作者:刘春霖男高级工程师研究方向:化妆品与保健食品检测、质量标准研究:.多波长 法同时测定美白类化妆品中 种甘草化学成分吴晓云李思龙刁飞燕李启艳冉金凤刘春霖(山东省食品药品检验研究院国家药品监督管理局化妆品原料质量控制重点实验室山东 济南)摘要:目的 建立多波长高效液相色谱二极管阵列检测器()法同时测定美白类化妆品中 种甘草化学成分的含量 方法 样品经 甲醇溶液提取、过滤后经 色谱柱(.)分离流动相为乙腈.磷酸梯度洗脱、和 波长同时检测流速.柱温 结果 种成分分离度良好在各进样浓度范围内线性关系良好相关系数 均大于.种不
2、同化妆品基质的平均加样回收率()为.相对标准偏差()为.结论本方法准确可靠、灵敏度高可用于同时测定化妆品中 种甘草化学成分关键词:化妆品甘草多波长高效液相色谱法中图分类号:.文献标志码:文章编号:():./.():.(.).().:植物原料及其提取物由于安全性高、作用温和等独特的优势因此在化妆品行业有良好的开发和应用前景 甘草提取物主要包括黄酮类、三萜类和多糖类等活性成分具有美白、防晒、抗氧化、抗炎和抗菌等功效被广泛应用于护肤类、美白类、防晒类等多种化妆品中 目前涉及化妆品中甘草类化学成分的检测标准有 个 国家标准 /化妆品中 种美白祛斑剂的测定高效液相色谱法、行业标准/化妆品中甘草酸二钾的检
3、测方法液相色谱法与团体标准/化妆品用原料甘草酸二钾且以上标准只涉及甘草酸二钾的检测 甘草提取物中除含甘草酸二钾还含有甘草苷、异甘草苷、甘草查尔酮、甘草素、异甘草素、甘草查尔酮 和光甘草定等多种化学活性成分本文建立多波长高效液相色谱二极管阵列检测器()法可同时测药学研究 .定以上 种甘草化学成分文献报道甘草成分检测方法有高效液相色谱法、超高效液相色谱法、液相色谱质谱法等主要涉及中药材及其提取物研究 化妆品领域甘草化学成分的测定方法主要为高效液相色谱法文献在 波长下测定化妆品中的 种甘草成分陆军等在 波长下测定 种甘草成分 笔者未见文献报道化妆品中甘草查尔酮 和异甘草素的测定单一检测波长很难兼顾每
4、个组分的最佳检测灵敏度且同一提取方法可能不适用于多种复杂的化妆品基质 本方法在优化乳液类、膏霜类、水剂类和凝胶类 种基质前处理方法基础上建立多波长 法同时测定 种甘草化学成分该方法操作简单、灵敏度和准确度高为产品质量提供保障 仪器与材料.仪器与设备 高效液相色谱仪(日本岛津公司)配 检测器 电子天平(梅特勒托利多国际贸易上海有限公司)高速离心机(德国 公司)超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)型超纯水仪(美国密理博公司).材料与试剂 乙腈、甲醇(色谱纯霍尼韦尔贸易上海有限公司)磷酸(优级纯国药集团化学试剂有限公司)超纯水标准 品:甘 草 苷(批 号:含 量上海源叶生物科技有限公司)异甘草苷(
5、批号:含量 上海源叶生物科技有限公司)甘草查尔酮(批号:含量 上海源叶生物科技有限公司)甘草素(批号:含量.上海安谱实验科技股份有限公司)甘草酸二钾(批号:含量上海源叶生物科技有限公司)异甘草素(批号:含量.上海安谱实验科技股份有限公司)甘草查尔酮(批号:含量 上海源叶生物科技有限公司)光甘草定(批号:含量 上海源叶生物科技有限公司)批美白类化妆品均为市售产品 方法与结果.色谱条件色谱柱:(.)柱温:流速:.进样体积:流动相:乙腈().磷酸溶液()梯度洗脱()检测波长:(甘草苷、甘草素和光甘草定)、(甘草酸二钾)、(异甘草苷、甘草查尔酮、异甘草素、甘草查尔酮).标准溶液的制备 分别精密称取甘草
6、苷.、异甘草苷.、甘草查尔酮 .、甘草素.、甘草酸二钾.、异甘草素.、甘草查尔酮 .、光甘草定.置 量瓶中加甲醇溶解并定容至刻度配成标准储备液 分别精密吸取上述标准储备液各.置 量瓶中加甲醇稀释并定容至刻度作为混合标准溶液.供试品溶液的制备.乳液类和膏霜类 准确称取.样品(精确至.)于 具塞比色管中加入.饱和氯化钠水溶液震荡混匀再加入 甲醇涡旋混匀 后超声提取 离心 后取上清液于比色管中残渣再加 甲醇重复上述步骤合并两次提取液用氮气吹干至 左右再加入甲醇溶解定容至 冷冻 后 下 离心 取上清液经.滤膜过滤取续滤液即得.水剂类和凝胶类准确称取.样品(精确至.)于 具塞比色管中加入适量甲醇溶液涡旋
7、混匀 至样品完全分散超声提取 冷却后定容至 冷冻 后 下 离心 取上清液经.滤膜过滤取续滤液即得.系统适用性试验 精密量取“.”项下混合标准溶液.置 量瓶中加甲醇溶解并定容至刻度将上述溶液按“.”项下色谱条件进样 结果在 波长下 种成分分离度均大于.达到基线分离理论板数均大于 .线性关系考察 精密量取混合标准溶液适量用甲醇分级稀释按照上述色谱条件分别进样以溶液浓度()为横坐标色谱峰面积()为纵坐标进行线性回归 结果表明 种成分在一定浓度范围内线性关系良好结果见表.回收率试验 取 种不同化妆品空白基质(水剂类、膏霜类、凝胶类和乳液类)各.分别精密加入标准储备液适量使添加水平分别为低、中和高 个水
8、平每个水平平行制备 份样品按“.”项下制备供试品溶液后进样测定得到 种成分平均药学研究 .加样回收率范围为.为.回收率良好结果见表 表 各成分的线性范围、回归方程和相关系数成分线性范围/回归方程甘草苷.异甘草苷.甘草查尔酮.甘草素.甘草酸二钾.异甘草素.甘草查尔酮.光甘草定.稳定性试验取回收率试验制备的低浓度供试品溶液(水剂类、膏霜类、凝胶类和乳液类)按上述色谱条件分别在、进样分析分别记录 种成分峰面积计算 在.之间()表明 种成分在 内稳定性良好.精密度试验取系统适用性试验所制备的混合标准溶液重复进样 次分别记录 种待测物峰面积计算 在.之间表明仪器精密度良好结果见表 表 种成分的平均回收率
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