黑果枸杞花青素提取物的初步毒性评价.pdf
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1、现代食品科技 Modern Food Science and Technology 2023,Vol.39,No.9 33 黑果枸杞花青素提取物的初步毒性评价 闫淑萍1,2,王硕1,陈涛1,2,申诚1,张永兰3,赵景阳1,4,冯斌4,罗芳4,李玉林1*(1.中国科学院西北高原生物研究所,青海西宁 810001)(2.中国科学院大学,北京 100049)(3.青海柴达木职业技术学院生物工程系,青海德令哈 817099)(4.青海金麦杞生物科技有限公司,青海西宁 810003)摘要:该文评价了黑果枸杞花青素提取物(Anthocyanins extract of Lycium ruthenicum,
2、AEL)的急性毒性和亚急性毒性。采用固定剂量法一次灌胃 AEL 8 000 mg/kg 进行经口急性毒性试验,观察小鼠毒性反应,记录 14 d 内一般状态。选取 SD 大鼠进行30 d 喂养试验,记录大鼠体质量和体征变化,实验结束时进行尿液生化指标、血液学指标、血清生化指标检查,并观察脏器形态变化,计算脏体系数和脏脑系数。研究发现:急性毒性试验中,小鼠无不良反应,体质量正常增长,解剖脏器未见明显异常;连续灌胃 30 d 后,各组大鼠体质量正常增长,未见明显中毒反应;与对照组比较,高剂量组雌性大鼠单核细胞百分比(M%)显著升高(P0.05),AST/ALT的比值显著降低(P0.05);高剂量组雄
3、性大鼠血清 Cl-、脾脏系数高于对照组(P0.05)。实验组大鼠其余尿液生化指标、血液学指标、血清生化指标、脏体系数和脏脑系数无明显异常。结果表明:小鼠对 AEL 的单次灌胃最大耐受剂量不低于 8 000 mg/kg;连续灌胃30 d,大鼠未见明显中毒反应,AEL 在该实验条件下无急性、亚急性毒性,具有较高的安全性。关键词:黑果枸杞花青素提取物;急性毒性;亚急性毒性 文章编号:1673-9078(2023)09-33-41 DOI:10.13982/j.mfst.1673-9078.2023.9.0721 Preliminary Toxicity Evaluation of Anthocyan
4、ins Extract from Lycium ruthenicum YAN Shuping1,2,WANG Shuo1,CHEN Tao1,2,SHEN Cheng1,ZHANG Yonglan3,ZHAO Jingyang1,4,FENG Bin4,LUO Fang4,LI Yulin1*(1.Northwest Institute of Plateau Biology,Chinese Academy of Sciences,Xining 810001,China)(2.University of Chinese Academy of Sciences,Beijing 100049,Chi
5、na)(3.Department of Bioengineering,Qinghai Qaidam Vocational&Technical College,Delingha 817099,China)(4.Qinghai Jinmaiqi Biotechnology Co.Ltd.,Xining 810003,China)Abstract:The acute toxicity and subacute toxicity of an anthocyanins extract of Lycium ruthenicum(AEL)were evaluated.Acute oral toxicity
6、test was performed in mice via intragastric administration of AEL 8 000 mg/kg once by a fixed dose method,and the toxicity responses of the mice were observed while their general states within 14 days were recorded.SD rats were selected for a 30-day feeding experiment,the changes of body weight and
7、physical signs of rats were recorded during theadministration.At the end of the experiment,the biochemical indexes of urine,hematological indexes,and serum biochemical indexes were examined,the morphological changes in organs were observed,and the visceral body coefficient and visceral brain coeffic
8、ient were calculated.The study revealed that in the acute toxicity test,no side effects was observed in mice,and their body weights increased normally with no obvious abnormalities detected in the anatomical organs.After continuous intragastric administration for 30 days,the rats in each experimenta
9、l group showed no obvious toxic reaction,and their weights increased normally;Compared with the control group,the percentage of monocytes(M%)in the female high-dose group increased significantly(P0.05)while their AST/ALT ratios decreased significantly(P0.05);The serum Cl-and spleen coefficients of t
10、he male high-dose group were higher 引文格式:闫淑萍,王硕,陈涛,等.黑果枸杞花青素提取物的初步毒性评价J.现代食品科技,2023,39(9):33-41 YAN Shuping,WANG Shuo,CHEN Tao,et al.Preliminary toxicity evaluation of anthocyanins extract from Lycium ruthenicum J.Modern Food Science and Technology,2023,39(9):33-41 收稿日期:2022-06-07 基金项目:国家自然基金面上项目(82
11、174052);青海省科技基础条件平台建设项目(2020-ZJ-T02)作者简介:闫淑萍(1995-),女,硕士研究生,研究方向:功能性食品的功效与安全性,E-mail: 通讯作者:李玉林(1970-),男,博士,研究员,研究方向:特色生物资源研究与开发,E-mail: 现代食品科技 Modern Food Science and Technology 2023,Vol.39,No.9 34 than those of the control group(P0.05 0.05 0.05 0.05 现代食品科技 Modern Food Science and Technology 2023,Vo
12、l.39,No.9 37 续表 1 指标 分级 雄性 雌性 对照组低剂量组高剂量组对照组低剂量组 高剂量组酮体/(mmol/L)0(-)3 4 5 6 6 5 0.5()3 2 1 0 0 1 1.5(+)0 0 0 0 0 0 4.0(+)0 0 0 0 0 0 8.0(+)0 0 0 0 0 0 P 0.05 0.05 0.05 0.05 亚硝酸 6 6 6 6 6 6+0 0 0 0 0 0 P 0.05 0.05 0.05 0.05 尿胆原/(mol/L)0(-)5 6 6 6 5 4 33(+)1 0 0 0 0 2 66(+)0 0 0 0 1 0 131(+)0 0 0 0 0
13、0 P 0.05 0.05 0.05 0.05 胆红素/(mol/L)0(-)6 6 6 6 5 6 8.6(+)0 0 0 0 1 0 33(+)0 0 0 0 0 0 100(+)0 0 0 0 0 0 P 0.05 0.05 0.05 0.05 尿蛋白/(g/L)0(-)3 2 2 5 4 2 0.15()1 0 3 1 0 2 0.3(+)2 4 1 0 0 1 1.0(+)0 0 0 0 2 1 3.0(+)0 0 0 0 0 0 P 0.05 0.05 0.05 0.05 葡萄糖/(mmol/L)0(-)6 6 6 6 6 6 2.8()0 0 0 0 0 0 5.5(+)0 0
14、0 0 0 0 14(+)0 0 0 0 0 0 28(+)0 0 0 0 0 0 55(+)0 0 0 0 0 0 P 0.05 0.05 0.05 0.05 潜血/(Cell/L)0(-)6 6 6 6 6 6 10()0 0 0 0 0 0 25(+)0 0 0 0 0 0 80(+)0 0 0 0 0 0 200(+)0 0 0 0 0 0 P 0.05 0.05 0.05 0.05 维生素 C/(mmol/L)0(-)5 6 6 6 5 5 0.6()1 0 0 0 1 1 1.4(+)0 0 0 0 0 0 2.8(+)0 0 0 0 0 0 5.6(+)0 0 0 0 0 0 P
15、 0.05 0.05 0.05 0.05 现代食品科技 Modern Food Science and Technology 2023,Vol.39,No.9 38 续表 1 指标 分级 雄性 雌性 对照组低剂量组高剂量组对照组低剂量组 高剂量组 尿比重 1.01 1 0 0 1 1 2 1.015 4 6 4 5 4 4 1.02 1 0 2 0 1 0 P 0.05 0.05 0.05 0.05 pH 值 6 0 0 0 0 1 1 6.5 0 0 0 0 0 0 7 1 0 3 2 2 3 7.5 4 3 3 4 3 1 8 1 3 0 0 1 1 P 0.05 0.05 0.05 0.
16、05 注:P 表示与对照组比较。表 2 黑果枸杞花青素提取物对大鼠血液指标的影响 Table 2 Effects of AEL on hematological indexes in rats 指标 雄性 雌性 对照组 低剂量组 高剂量组 对照组 低剂量组 高剂量组 WBC/109 L-1 9.492.09 12.763.33 11.163.33 7.942.70 5.701.62 6.891.98 N/%10.372.29 9.372.34 11.481.21 9.302.47 12.704.45 12.023.58 L/%85.832.97 85.902.45 83.631.88 86.5
17、32.57 83.384.72 83.434.22 M/%1.400.47 1.320.39 1.750.41 1.22 0.45 1.850.63 1.900.35*E/%0.980.29 1.080.41 1.130.37 0.900.43 0.950.24 1.080.50 RBC/1012 L-1 8.250.86 8.650.54 8.630.27 8.590.20 8.920.60 8.570.55 Hb/(g/L)165.002.90 162.829.80 162.015.40 159.824.22 170.709.91 158.724.90 HCT/%47.705.42 48.
18、753.20 48.571.76 47.931.14 50.722.58 47.281.72 MCV/fL 57.781.74 56.331.49 56.321.62 55.821.28 56.902.17 55.532.17 MCH/pg 20.232.49 18.830.59 18.780.55 18.620.59 19.170.60 18.570.77 MCHC/(g/L)350.5048.10 334.204.31 333.513.00 333.333.92 336.515.50 336.023.59 PLT/109 L-1 1 192.20174.301 316.82186.901
19、299.80157.801 270.2093.111 273.8173.20 1 232.0279.87Ret/1012 L-1 0.470.05 0.470.04 0.450.07 0.480.09 0.460.04 0.460.08 APTT/s 21.802.47 19.322.05 22.572.01 20.181.37 24.431.86 19.720.60 PT/s 11.721.65 9.320.56 11.900.73 8.770.53 13.822.21 8.970.16 注:与对照组比较,*表示P0.05。表 3、4 同。2.2.3 血液学常规检查 血液系统是诊断个体生理和
20、病理状态最敏感的指标,可用于判定受试物对动物血液系统、营养代谢及健康状况的影响20。大鼠血液学常规检查结果见表 2。结果显示,高剂量组雌性动物单核细胞百分比(M%)较对照组显著升高(P0.05),但与之相关的白细胞计数(WBC)、中性粒细胞(N%)、淋巴细胞(L%)、嗜酸性粒细胞(E%)与对照组比较无显著差异;高剂量组雄性动物 M%较对照组升高,但未显示出统计学意义。与对照组比较,各实验组大鼠的凝血酶原时间(PT)、部分活化凝血酶原时间(APTT)无明显变化,表明黑果枸杞花青素对大鼠的凝血功能无影响。血液学常规检查结果显示 AEL 连续灌胃30 d,对大鼠血液常规指标无明显不良影响。2.2.4
21、 血清生化指标检查 肝、肾是动物生物转化的重要场所,也是物质代谢的主要器官,肝脏功能可由其特异酶(ALT、AST、ALP、T-BIL)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TCHO)等来检测21,22;肾脏是体内最大的过滤器官,血清肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)是检测肾功能常见的指标23。灌胃 30 d 后大鼠血清生化指标检查结果见表 3。高剂量组雌性大鼠现代食品科技 Modern Food Science and Technology 2023,Vol.39,No.9 39 AST 与 ALT 的比值低于对照组(P0.05),但 AST和 ALT 检查结果与对照组比
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