地黄功能因子提取物体外抗氧化活性及α-葡萄糖苷酶抑制活性研究.pdf
《地黄功能因子提取物体外抗氧化活性及α-葡萄糖苷酶抑制活性研究.pdf》由会员分享,可在线阅读,更多相关《地黄功能因子提取物体外抗氧化活性及α-葡萄糖苷酶抑制活性研究.pdf(6页珍藏版)》请在咨信网上搜索。
1、通过体外试验,探讨了DHTW抗氧化活性及-葡萄糖苷酶的抑制活性,为地黄降糖功能因子的开发利用提供理论依据.采用紫外分光光度法(UV)测定DHTW清除DPPH、ABTS等自由基的能力,利用酶标仪测定DHTW抑制-葡萄糖苷酶的活性.结果表明:DHTW均具有抗氧化活性,质量浓度在06 mg/mL内,随着浓度的增加,抗氧化活性也不断增加,当溶液达到一定浓度后,抗氧化性趋于稳定.DHTW的DPPH自由基清除能力IC50值分别为:醇洗脱物DHY(0.087 mg/mL)、粗提物DHC(2.987 mg/mL)、水洗脱物DHS(3.024 mg/mL),故自由基清除能力表现为:DHYDHCDHS.DHTW的
2、ABTS自由基清除能力IC50值分别为:DHY(0.137 mg/mL)、DHC(1.463 mg/mL)、DHS(2.168 mg/mL),ABTS自由基清除率表现为:DHYDHCDHS.DHTW对-葡萄糖苷酶均有明显的抑制作用,其中,DHY有较明显的抑制能力,-葡萄糖苷酶抑制活性明显优于DHC、DHS.关键词:DHTW;功能因子;抗氧化活性;-葡萄糖苷酶抑制活性中图分类号:R 284.2文献标识码:AAntioxidative Activity and-glucosidase Inhibitory Activity of Rehmanniaglutinosa Functional Fact
3、or Extract in VitroLI Zihong1,ZHANG Taotao1,ZHANG Yanchang2,SONG Mengjiao1,LI Feifei1,WEI Yue1(1.Henan Natural Product Biotechnology Co.Ltd.,Zhengzhou 450002,China;2.Henan Academy of Sciences,Zhengzhou 450002,China)Abstract:In this paper,the antioxidant activity of DHTW and the inhibitory activity o
4、f-glucosidase werediscussed through in vitro experiments,which provided a theoretical basis for the development and utilization ofRehmannia glutinosa hypoglycemic functional factors.The ability of DHTW to scavenge free radicals such as DPPHand ABTS was determined by ultraviolet spectrophotometry(UV)
5、,and the activity of DHTW to inhibit-glucosidasewas determined by microplate reader.The results show that:DHTW has antioxidant activity,and the concentrationis within 0-6 mg/mL.With the increase of concentration,the antioxidant activity also increases continuously.Whenthe concentration reaches a cer
6、tain concentration,the antioxidant activity tends to be stable.The IC50values ofDHTW DPPH free radical scavenging ability are as follows:Alcohol eluate DHY(0.087 mg/mL),crude extract DHC(2.987 mg/mL),water eluate DHS(3.024 mg/mL),so the free radical scavenging abilities are arranged in order:DHYDHCD
7、HS.The IC50values of DHTW ABTS free radical scavenging ability are as follows:DHY(0.137 mg/mL),DHC(1.463 mg/mL),DHS(2.168 mg/mL),and the free radical scavenging rates of ABTS are arranged in order:DHYDHCDHS.DHTW also has obvious inhibitory effect on-glucosidase.Among them,DHY has obvious inhibitorya
8、bility,and the inhibitory activity of-glucosidase is obviously better than that of DHC and DHS.Key words:DHTW;functional factor;antioxidant activity;-glucosidase inhibitory activity地黄(Rehmannia Glutinosa Libosch.)属于玄参科植物,味甘、苦,性寒,可以起到清热凉血,养阴生津的作用1.它的主要成分包含苷类、低聚糖类、环烯醚萜类、苯乙醇类、氨基酸、有机酸2-3,具有降血糖、抗衰老、抑瘤的作用
9、,同时还具备调整人体免疫机能和多种治疗的功能药理作用4-5,其中大部分与抗氧化活性有关6.研究结果表明,地黄中很多活性成分不仅可以入药,也有可用于临床治疗,如高血压、糖尿病的治疗.近年来,关于地黄的研究多集中于化学成分及结构鉴定方面7-20,而对其实际发挥功效的活性物质基础研究较少.本研究采用体外实验法对DHTW抗氧化活性和-葡萄糖苷酶抑制活性进行研究,为地黄降糖功能因子的开发及降糖机理的研究提供理论依据.1仪器和材料1.1仪器酶标仪,产自美国伯乐公司;AUW220D十万分之一天平,产自日本岛津;ME204万分之一天平,产自梅特勒-托利多仪器有限公司;粉碎机,产自瑞安市永历制药机械有限公司;T
10、U1810紫外分光光度法,产自北京普析通用仪器责任有限公司;TDL-5-A离心机,产自上海安亭科学仪器厂;DGX-9143B鼓风干燥箱,产自上海福玛.1.2材料PNPG 4-硝基苯基-D-吡喃葡萄糖苷,产自上海安谱璀氏标准技术服务有限公司;-葡萄糖苷酶,产自上海源叶生物科技有限公司;阿卡波糖,产自中检院;无水碳酸钠,产自北京化工厂;磷酸氢二钾,产自洛阳市化学试剂厂;磷酸二氢钾,产自天津市风船化学试剂科技有限公司;过硫酸钾,产自天津市风船化学试剂科技有限公司;抗坏血酸,购自天津市恒兴化学试剂制造有限公司;无水乙醇,产自天津市科密欧化学试剂;甲醇,产自天津市致远化学试剂有限公司;DPPH 1,1-
11、二苯基-2-三硝基苯肼;ABTS 2,2联氨-双3-乙基苯并噻唑-6-磺酸二铵盐.1.3试剂1)-葡萄糖苷酶溶液:0.1 mol/L缓冲液(pH=6.8)稀释为0.2 U/mL.2)PNPG溶液:用0.1 mol/L缓冲液溶解制成5 mmol/L的溶液.3)碳酸钠溶液:加入去离子水超声溶解,制成0.5 mol/L的溶液.4)0.1 mol/L磷酸盐缓冲液(pH=6.8):49.7 mL 0.1 mol/L K2HPO4和50.3 mL 0.1 mol/L KH2PO4的混合溶液.5)DPPH溶液:用无水乙醇制成0.1 mg/mL的DPPH储备液.6)ABTS溶液:准确称取ABTS粉末0.192
12、 0 g并精密量取50 mL甲醇,超声溶解,即为A试液;依次取0.094 6 g过硫酸钾加入50 mL蒸馏水中超声溶解为B试液,然后A和B混合使用,避光静置12 h.2地黄功能因子提取物(DHTW)的制备称取地黄饮片粉末200 g,用15倍量的蒸馏水浸泡5 h,7080 加热1 h,冷却后用400目纱布过滤,离心10 min(3000 r/min),合并滤液浓缩至干即为地黄粗提物(DHC).上清液过柱,用1 L蒸馏水冲洗,收集液体浓缩至干即为地黄水洗脱物(DHS).然后用1 L 95%乙醇冲洗,收集醇提部分,浓缩至干即为醇洗脱物(DHY).3方法与结果3.1-葡萄糖苷酶活性抑制试验地黄功能因子
13、提取物对-葡萄糖苷酶活性抑制试验方法参考Xu等21方法,并对此加以改动.样品组试验方法为:用移液枪将20 L酶液和20 L样品溶液加至96孔板上,再置于鼓风干燥箱37 内放置约10 min;然后加入20 L PNPG溶液,将反应物再次置于鼓风干燥箱(37)30 min;然后加入80 L碳酸钠溶液.停止反应后,利用酶标仪于405 nm处测定吸光度.按照表1设置的空白组、对照组、样品空白组不同组别的反应体引用格式:李自红,张桃桃,张延昌,等.地黄功能因子提取物体外抗氧化活性及-葡萄糖苷酶抑制活性研究 J.河南科学,2023,41(8):1112-1117.-1113第41卷 第期河 南 科 学20
14、23年8月系,依次添加有关试剂进行反应,反应条件与样品组一致,以阿卡波糖作为阳性对照.每个样品均设3个平行,计算抑制率.表1-葡萄糖苷酶活性抑制试验反应体系Tab.1Reaction system of-glucosidase activity inhibition test试剂磷酸盐缓冲液样品-葡萄糖苷酶PNPG碳酸钠溶液空白组1002080对照组80202080样品空白组80202080样品组6020202080酶活抑制率计算方式:酶活抑制率=1-(A1-A2)/(A3-A0)100%.(1)式中:A1为样品组吸光度;A2为样品空白组吸光度;A3为空白组吸光度;A0空白对照组吸光度.3.2
15、地黄功能因子提取物抗氧化活性的方法研究3.2.1清除DPPH自由基能力的测定DHS、DHC、DHY以及阳性对照抗坏血酸分别按如下步骤操作.1)在10 mL试管中准确添加2.0 mL DPPH溶液和2.0 mL无水乙醇,并充分混匀后,避光保存30 min.2)在10 mL试管中添加2.0 mL不同浓度的样品溶液和2.0 mL DPPH的溶液,摇匀,室温(25)避光放置反应30 min.3)在10 mL试管中加入2.0 mL样品溶液和2.0 mL无水乙醇,充分混匀,室温避光放置反应30 min.4)反应结束后,以无水乙醇为试剂空白,在517 nm处测定吸光度,记录各组的吸光值,重复三次平行实验.分
- 配套讲稿:
如PPT文件的首页显示word图标,表示该PPT已包含配套word讲稿。双击word图标可打开word文档。
- 特殊限制:
部分文档作品中含有的国旗、国徽等图片,仅作为作品整体效果示例展示,禁止商用。设计者仅对作品中独创性部分享有著作权。
- 关 键 词:
- 地黄 功能 因子 提取物 体外 氧化 活性 葡萄 糖苷酶 抑制 研究
1、咨信平台为文档C2C交易模式,即用户上传的文档直接被用户下载,收益归上传人(含作者)所有;本站仅是提供信息存储空间和展示预览,仅对用户上传内容的表现方式做保护处理,对上载内容不做任何修改或编辑。所展示的作品文档包括内容和图片全部来源于网络用户和作者上传投稿,我们不确定上传用户享有完全著作权,根据《信息网络传播权保护条例》,如果侵犯了您的版权、权益或隐私,请联系我们,核实后会尽快下架及时删除,并可随时和客服了解处理情况,尊重保护知识产权我们共同努力。
2、文档的总页数、文档格式和文档大小以系统显示为准(内容中显示的页数不一定正确),网站客服只以系统显示的页数、文件格式、文档大小作为仲裁依据,平台无法对文档的真实性、完整性、权威性、准确性、专业性及其观点立场做任何保证或承诺,下载前须认真查看,确认无误后再购买,务必慎重购买;若有违法违纪将进行移交司法处理,若涉侵权平台将进行基本处罚并下架。
3、本站所有内容均由用户上传,付费前请自行鉴别,如您付费,意味着您已接受本站规则且自行承担风险,本站不进行额外附加服务,虚拟产品一经售出概不退款(未进行购买下载可退充值款),文档一经付费(服务费)、不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。
4、如你看到网页展示的文档有www.zixin.com.cn水印,是因预览和防盗链等技术需要对页面进行转换压缩成图而已,我们并不对上传的文档进行任何编辑或修改,文档下载后都不会有水印标识(原文档上传前个别存留的除外),下载后原文更清晰;试题试卷类文档,如果标题没有明确说明有答案则都视为没有答案,请知晓;PPT和DOC文档可被视为“模板”,允许上传人保留章节、目录结构的情况下删减部份的内容;PDF文档不管是原文档转换或图片扫描而得,本站不作要求视为允许,下载前自行私信或留言给上传者【自信****多点】。
5、本文档所展示的图片、画像、字体、音乐的版权可能需版权方额外授权,请谨慎使用;网站提供的党政主题相关内容(国旗、国徽、党徽--等)目的在于配合国家政策宣传,仅限个人学习分享使用,禁止用于任何广告和商用目的。
6、文档遇到问题,请及时私信或留言给本站上传会员【自信****多点】,需本站解决可联系【 微信客服】、【 QQ客服】,若有其他问题请点击或扫码反馈【 服务填表】;文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“【 版权申诉】”(推荐),意见反馈和侵权处理邮箱:1219186828@qq.com;也可以拔打客服电话:4008-655-100;投诉/维权电话:4009-655-100。