贺兰山东麓‘蛇龙珠’葡萄病...病种类鉴定及对采收期的影响_张强强.pdf
《贺兰山东麓‘蛇龙珠’葡萄病...病种类鉴定及对采收期的影响_张强强.pdf》由会员分享,可在线阅读,更多相关《贺兰山东麓‘蛇龙珠’葡萄病...病种类鉴定及对采收期的影响_张强强.pdf(10页珍藏版)》请在咨信网上搜索。
1、西 北 农 业 学 报 ,():贺兰山东麓 蛇龙珠 葡萄病毒病种类鉴定及对采收期的影响收稿日期:修回日期:基金项目:国家重点研发项目();宁夏回族自治区科技重大专项()。第一作者:张强强,男,硕士研究生,从事资源利用与植物保护研究。:通信作者:顾沛雯,女,博士,教授,主要从事植物病理学、生物防治与菌物资源利用研究。:张强强,顾沛雯,张继丰(宁夏大学 农学院,银川 ;宁夏西鸽酒庄有限公司,宁夏青铜峡 )摘要为摸清宁夏贺兰山东麓 蛇龙珠 葡萄感染病毒种类,探究葡萄病毒病对果实品质及其采收期的影响。以 蛇龙珠 葡萄为材料,通过 方法鉴定 蛇龙珠 葡萄感染病毒种类;利用主成分分析法()对葡萄果实各理化
2、指标进行综合评价,确定罹病和无症状对照组葡萄的最佳采收期。结果表明:蛇龙珠 葡萄感染种葡萄病毒,分别为 、和 ,复合侵染严重;与对照组相比,罹病葡萄的 值降低 ,净光合速率降低 ,叶片气孔导度降低 ,可溶性固形物降低 ,还原糖含量降低 ,糖酸比降低 ,滴定酸含量增加 ;通过主成分分析得到 年度对照组葡萄的最佳采收期为月 日,罹病葡萄的最佳采收期为月 日。综上,蛇龙珠 葡萄感染种葡萄病毒,病毒感染导致植株叶片光合作用下降,果实可溶性固形物、还原糖、单宁等物质积累降低,造成酿酒葡萄采收期推迟周。关键词 蛇龙珠 葡萄;病毒病;葡萄采收期;主成分分析 蛇龙珠 葡萄()是 品丽珠 赤霞珠 等品种混合群体
3、中,经过长期选育而成的一个酿酒葡萄品种。其酿造的葡萄酒常带有独特的草本气息,单宁质地柔软,入口顺滑,成为国内独具代表性的红色酿酒葡萄之一。该品种耐干旱,喜沙壤土质,在宁夏贺兰山东麓和甘肃河西走廊种植表现良好,是宁夏主栽的红色酿酒葡萄品种之一。但是随着宁夏葡萄种植面积的扩大,葡萄苗木引进和输出日益频繁,造成葡萄病毒病危害猖獗,研究发现贺兰山东麓主要葡萄病毒病为卷叶病和扇叶病,蛇龙珠 感染病毒率最高,为。葡萄病毒种类繁多,迄今为止,从世界各地的葡萄上分 离 的 病 毒 有 种,国 内 报 道 有 种,其中对卷叶伴随病毒(,)和葡萄扇叶病毒(,)研究最多。常用葡萄病毒的鉴定方法主要有指示植物鉴定法、
4、酶联免疫吸附测定法、逆转录聚合酶链式反应(,)检测技术、分子杂交检测方法、逆转录环介导恒温扩增检测技术和小 测序技术,目前我国己报道的葡萄病毒多采用 方法确定。吕苗苗等利用种葡萄卷叶伴随病毒引物对宁夏贺兰山东麓 蛇龙珠 葡萄进行 检测,初步检出种卷叶病毒类型,其中 的检出率最高,为;刘万好等 通过小 测序鉴定出山东烟台地区叶片反卷的 蛇龙珠 携带有种已知病毒和种类病毒。蛇龙珠 葡萄复合侵染严重,但对感染病毒种类与症状类型的关系相关报道较少。葡萄感染病毒后,会对葡萄的产量、生理机能和品质产生重大影响。等 发现葡萄扇叶病可导致植株节间缩短,显著降低产量,症状 严 重 时,损 失 可 达 以 上。等
5、 研究认为 品丽珠 感染 后,降低了每藤新梢数、新梢生长和木质化程度。韩爱芹等 发现,感染卷叶病后葡萄果实的葡萄糖和果糖的总量仅为对照组的 ,种花色苷单体含量显著降低,总量仅为对照组总量的 。目前有关葡萄病毒病的研究表明,病毒病会降低葡萄叶片中叶绿素含量及光合速率,减少总糖含量,提高酸度,。鉴于国内有关病毒病对 蛇龙珠 葡萄品质和采收期的影响的研究较少。本研究以贺兰山东麓树龄超过 的 蛇龙珠 葡萄为材料,利用 进行 种葡萄病毒的检测,明确 蛇龙珠 葡萄感染病毒的种类及造成危害的主要病毒,在此基础上,通过测定罹病和无症状对照组 蛇龙珠 葡萄的光合指标和果实理化指标,运用主成分分析法,评价不同采收
6、时间对罹病和对照组 蛇龙珠 葡萄果实成熟度、葡萄品质及采收期的影响,以期为该产区葡萄无毒化种植提供依据,也为准确把握 蛇龙珠 葡萄最佳采收期提供理论参考。材料与方法材 料 年月于宁夏西鸽酒庄葡萄园中,从感染病毒病和外观正常的 蛇龙珠 葡萄树上采集叶片和果实,罹病葡萄选取标准:叶片反卷、发红,出现扇叶化症状;无症状对照组葡萄选取标准:葡萄植株正常,叶片无卷叶、发红、扇叶化症状,生长期保持绿色平整状态。方 法采样在 蛇龙珠 葡萄完成转色后(年月 日)进行采样,每次采样分别选取棵罹病和对照组葡萄树,每棵树按上、中、下部位随机采集穗葡萄和片葡萄叶,共采样次,采样日期分别为月 日、月 日、月日、月 日和
7、月 日。以同一树体的片葡萄叶为个样品,用锡箔纸包好后迅速放入液氮罐中,罹病和对照组各 份样品,存于 冰箱备用,用于葡萄病毒检测;采集的葡萄果穗放入冰盒带回实验室,取一部分鲜样用层纱布挤汁待用,用于还原糖、滴定酸、和可溶性固形物的测定;将剩余样品经液氮迅速冷冻,使用研磨打样机()将果实样品粉碎,冰箱贮存备用,用于总酚、单宁和花青素的测定。检测根据文献,设计 种葡萄病毒病的特异性引物,引物序列见表。将采集的葡萄叶片加入液氮迅速研磨至粉末状,取 至 的离心管中,按照 植物 提取试剂盒(美国 公司)使用说明书进行总 的提取。提取出的总 采用反转录试剂盒(北京全式金生物有限公司)说明书反转录成 ,采用设
8、计的特异性引物对样品中病毒进行检测,每个样品重复次。扩增反应体系:,正向、反向引物各,酶,;扩增条件:,退火,退火温度见表,个循环,。用 琼脂糖凝胶电泳检测产物。产物由生工生物工程(上海)股份有限公司进行测序。测定项目及方法采用叶绿素计(型)测定 值;采用便携式光合仪(型,德国)测定净光合速率、蒸腾速率、叶片气孔导度、胞间二氧化碳浓度;采用斐林试剂滴定法()测定还原糖;采用酸碱滴定法()测定滴定酸(以酒石酸计);采用 计(,上海)测定葡萄汁;采用手持糖度计(,上海)测定其可溶性固形物含量;采用 (福林丹尼斯)试剂显色法 测定单宁含量;采用 (福林酚)试剂显色法 测定总酚;采用 示差法 测定总花
9、青素;采用称量法测定百粒质量,每个样品测定次。统计分析样本间差异采用 对数据进行整理,采用 邓肯氏多重比较进行显著性分析,采用 进行主成分分析及制图,得出主成分函数方程式,计算不同采收时期综合得分,确定最佳采收期。结果与分析 蛇龙珠 葡萄病毒病田间发病症状如图所示,蛇龙珠 葡萄植株感染病毒病后,绝大多数表现为卷叶症状。感染病毒初期,叶片轻微向后翻卷,叶脉黄绿色,叶片保持绿色(图);之后叶片逐渐出现红色或紫红斑点(图);随着叶片生长,红色斑点逐渐变大成为紫红色不规则肉斑(图),直至整个叶片变紫红,透过阳光看呈鲜红色,叶脉黄绿色,叶片反卷(图),后期葡萄中部和底部叶片反卷变红,变厚变脆(图)。在田
10、间 蛇龙珠 葡萄感染病毒后期表现种症状,型:叶片反卷,叶缘锐呈不规则锯齿状,叶肉紫红色(图);型:叶片发红,叶脉黄色,叶片反卷明显,叶脉间有黑色斑块(图);型:期张强强等:贺兰山东麓 蛇龙珠 葡萄病毒病种类鉴定及对采收期的影响表用于 检测的 种葡萄病毒引物 病毒名称 病毒类型 引物 引物序列()退火温度 扩增片段大小 葡萄卷叶伴随病毒 葡萄扇叶病毒 沙地葡萄茎痘病毒 葡萄病毒 葡萄病毒 葡萄病毒 葡萄斑点病毒 葡萄灰皮诺病毒 葡萄浆果内部坏死病毒 葡萄蚕豆萎蔫病毒 叶片未发生反卷,叶脉黄绿色,叶脉间有红色斑块(图);型:叶片反卷,叶脉为黄绿色,正反看叶脉间都有紫黑色肉斑(图)。此外,前期在 蛇
11、龙珠 叶片上还发现两种类似扇叶病症状,如图所示。一种为扇形叶或畸形叶:叶片皱缩畸形,叶缘缺刻深,缺口深达主脉,叶脉不对称、扭曲、明脉,叶缘锯齿锐呈不规则状,叶柄洼开角大,主脉聚近,呈扇叶状(图)。另一种为花叶形:叶片上分布有许多边缘不清、形状不规则的黄色斑点或斑块,颜色浓淡不同,呈环状线纹、褪绿环状圆或不规则形(图)。蛇龙珠 葡萄病毒种类鉴定利用 种病毒引物,对采集的罹病和对照组共 份田间样品进行 检测,并对扩增产物进行凝胶电泳和测序分析,结果如表和图所示,罹病样品均检测到病毒,共有种葡萄病毒,分 别 是 、和 ;对照组样品检测到 种病毒,分别是 、和 ,其中 的检出率最高,达 ,其次为 和
12、,检出率分别为 和 ,的检出率最少,仅为 。西北农业学报 卷图 蛇龙珠 葡萄病毒病田间症状 扇形叶症状;花叶形症状 ;图 蛇龙珠 葡萄扇叶病类似症状 表 检测结果 病毒 参考序列 参考序列长度 样品测序长度 相似性 检出个数 罹病葡萄 对照组葡萄 检出率 ()()()()()()()()期张强强等:贺兰山东麓 蛇龙珠 葡萄病毒病种类鉴定及对采收期的影响 ;图 产物琼脂糖凝胶电泳 针对上述 蛇龙珠 葡萄感染病毒后的种后期 症状类型(图)分别进行 检测发 现,型 症 状 检 测 到 、和 ;型症状检测到 、和 ;型症状检测到 、和 ;型症状检测到 、和 。说明 蛇龙珠 葡萄病毒病复合侵染严重,感染
- 配套讲稿:
如PPT文件的首页显示word图标,表示该PPT已包含配套word讲稿。双击word图标可打开word文档。
- 特殊限制:
部分文档作品中含有的国旗、国徽等图片,仅作为作品整体效果示例展示,禁止商用。设计者仅对作品中独创性部分享有著作权。
- 关 键 词:
- 贺兰 山东 蛇龙珠 葡萄 种类 鉴定 采收 影响 张强强
1、咨信平台为文档C2C交易模式,即用户上传的文档直接被用户下载,收益归上传人(含作者)所有;本站仅是提供信息存储空间和展示预览,仅对用户上传内容的表现方式做保护处理,对上载内容不做任何修改或编辑。所展示的作品文档包括内容和图片全部来源于网络用户和作者上传投稿,我们不确定上传用户享有完全著作权,根据《信息网络传播权保护条例》,如果侵犯了您的版权、权益或隐私,请联系我们,核实后会尽快下架及时删除,并可随时和客服了解处理情况,尊重保护知识产权我们共同努力。
2、文档的总页数、文档格式和文档大小以系统显示为准(内容中显示的页数不一定正确),网站客服只以系统显示的页数、文件格式、文档大小作为仲裁依据,平台无法对文档的真实性、完整性、权威性、准确性、专业性及其观点立场做任何保证或承诺,下载前须认真查看,确认无误后再购买,务必慎重购买;若有违法违纪将进行移交司法处理,若涉侵权平台将进行基本处罚并下架。
3、本站所有内容均由用户上传,付费前请自行鉴别,如您付费,意味着您已接受本站规则且自行承担风险,本站不进行额外附加服务,虚拟产品一经售出概不退款(未进行购买下载可退充值款),文档一经付费(服务费)、不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。
4、如你看到网页展示的文档有www.zixin.com.cn水印,是因预览和防盗链等技术需要对页面进行转换压缩成图而已,我们并不对上传的文档进行任何编辑或修改,文档下载后都不会有水印标识(原文档上传前个别存留的除外),下载后原文更清晰;试题试卷类文档,如果标题没有明确说明有答案则都视为没有答案,请知晓;PPT和DOC文档可被视为“模板”,允许上传人保留章节、目录结构的情况下删减部份的内容;PDF文档不管是原文档转换或图片扫描而得,本站不作要求视为允许,下载前自行私信或留言给上传者【自信****多点】。
5、本文档所展示的图片、画像、字体、音乐的版权可能需版权方额外授权,请谨慎使用;网站提供的党政主题相关内容(国旗、国徽、党徽--等)目的在于配合国家政策宣传,仅限个人学习分享使用,禁止用于任何广告和商用目的。
6、文档遇到问题,请及时私信或留言给本站上传会员【自信****多点】,需本站解决可联系【 微信客服】、【 QQ客服】,若有其他问题请点击或扫码反馈【 服务填表】;文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“【 版权申诉】”(推荐),意见反馈和侵权处理邮箱:1219186828@qq.com;也可以拔打客服电话:4008-655-100;投诉/维权电话:4009-655-100。