福建灵芝6个主要三萜类成分...含量测定及其在溯源中的应用_张基荣.pdf
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1、科研园地福建灵芝 个主要三萜类成分的含量测定及其在溯源中的应用张基荣,张颖,蒋昆霞,陈素芳,黄黎娜,吴长辉,许文,林羽,(通信作者)福建中医药大学 药学院(福建 福州);福建中医药大学 科技创新与转化中心(福建 福州);福建仙芝楼科技有限公司(福建 南平)(内文见下页)和红丹,采用实验发现黑膏药剪碎后直接提取,药物成分会由于提取溶剂对基质溶解能力较弱的弊端,导致无法将药物分散使成分充分地从基质中单独提取出来,因此采用一种新方法,既能将基质分散开,又能使试剂进行有效提取。实验发现采用松散粉末状硅藻土这种材料加到被三氯甲烷溶散的膏体混悬液中,充分混匀,再减压回收三氯甲烷至干,这时无论是药物成分还是
2、基质都均匀分布于硅藻土中,再用极性较大且油性基质不易溶入的甲醇溶液进行提取,仅仅提取出易溶于甲醇的药物成分。这样就避免了基质的干扰,使得检验结果能够更加具有科学性,笔者在实验中发现硅藻土的加入并未对海马万应膏中的血竭相应成分具有较强的吸附作用,并且分散后血竭素成分提取浓度提高 倍,且斑点清晰度更加显著。因此可以进行硅藻土分散黑膏药方法的开发及应用。制备工艺问题海马万应膏中处方共 味,其中除肉桂和血竭外均为药材经油炸枯后收膏入药,此次标准研究针对处方中毒麻类药材(附子、麻黄)、贵细药(海马及其他当归、白芷等)均进行针对性研究,并且比较了药材油炸前后的成分变化。结果发现,未经油炸的药材均能检出药物
3、成分,而按膏药工艺制备的药材由于经过高温油炸后,均未检出相应药物成分。考虑到黑膏药的工艺,可能药物的成分被高温破坏,有治疗作用的药物成分是否是高温加热后产生的新物质,黑膏药的质量因未能得到较合理的标准控制,相对而言是存在一定的风险问题,也有人建议将黑膏药中有效成分采用现代提取技术,制备成巴布剂或贴膏剂代替黑膏药剂型,不仅可以避免黑膏药长期使用重金属铅蓄积中毒的风险还能有效控制药品质量。裱背材料的问题根据与企业沟通,近年考虑患者使用的便捷性及卫生情况,黑膏药摊涂裱背均采用一种形状不规则的材料,称为医用透气胶带。这种裱背材料的好处在于患者使用黑膏药时不会因为膏体受热后流动溢出或渗透裱背污染衣物,此
4、裱背原材料使用前均参考器械标准进行检验。由于这种裱背形状不规则,分布不均匀的特点,在重量差异法检验中不能采用药典标准通过单位面积换算来测定重量,而是进行采用先冷冻,再将膏体剥离裱背,直接称量膏体重量的方法测定黑膏药重量,裱背上残留的膏体较小或几乎无残留,对限度及结果几乎无影响,忽略不计。这也提示检验标准需要与时俱进,更新换代。质量标准问题本次研究针对原粉投料的血竭及肉桂新增显微鉴别、对贵细药血竭采用硅藻土分散法提升血竭素高氯酸盐提取率,并新增其 鉴别、鉴别方法,同时制定合理的软化点限度。增加质控项目,在一定程度上规范企业生产控制。参考文献 周楠,曹欢,笔雪艳,等中药传统剂型黑膏药的研究进展中国
5、药品标准,():吴师机理淪骈文北京:中国中医药出版社,:郭新苗中药黑膏药制剂生产中的质量风险管理中国药物警戒,():王丹丹,张虹黑膏药的质量控制研究探讨中国卫生产业,:张清,余新启黑膏药疮疡膏工艺及质量标准研究时珍国医国药,():毛兆雄浅论中药黑膏药工艺的现代研究中医药学报,:张博华,张义生,李杰,等小儿咳喘贴黑膏药的制备工艺研究中国药师,():李力,王薇,杨柳,等黑膏药鼻炎贴不同摊涂工艺的皮肤安全性比较研究中国药师,():陈爱华,王森,刘红宁,等传统黑膏药发展近况探讨中成药,():中华人民共和国卫生部药典委员会中华人民共和国卫生部标准(中药成方制剂第三册),:国家药典委员会中华人民共和国药典
6、,一部,:付敏,张莉,韩建伟狗皮膏三种剂型中四种药材的薄层鉴别比较湖北中医杂志,():李帆帆,孟宪丽,赵贵琴,等狗皮膏大鼠长期毒性试验的体内血液铅变化研究 中国中药杂志,():乔婷婷,刘圣金,林瑞超,等含矿物类中药外用制剂的药理毒理作用研究进展 中国现代中药,():收稿日期:黑龙江医药 基金项目:国家重点研发计划(编号:);课题题目:全链条质量可追溯体系构建 摘 要 目的:本研究旨在建立超高效液相色谱()测定福建灵芝中 个主要三萜类成分(灵芝酸、灵芝酸、灵芝酸、灵芝酸、灵芝酸、灵芝酸)的含量,并对比福建灵芝与其他产区灵芝的含量差异,为福建灵芝在质量溯源中的应用提供实验依据。方法:采用 (,)色
7、谱柱,以乙腈()甲酸水()为流动相,梯度洗脱,流速,柱温,检测波长,进样量。结果:灵芝酸、灵芝酸、灵芝酸、灵芝酸、灵芝酸、灵芝酸 线性范围分别为、;福建灵芝中上述 个三萜类成分含量分别为、。化学计量学聚类分析,当欧式距离为 时,福建灵芝可以溯源区分;主成分分析可将灵芝样品可以分为吉林、安徽、浙江、福建 个产区,进一步的正交偏最小二乘()法分析显示,灵芝酸、灵芝酸 和灵芝酸 的 均大于,是福建灵芝区别于其他产区的差异标志物。结论:该方法可同时测定福建灵芝样品中 个三萜类成分的含量,并应用于福建灵芝的质量追溯,可为福建灵芝的质量追溯提供一种新的技术手段。关键词:灵芝;超高效液相色谱法;聚类分析;主
8、成分分析;正交偏最小二乘法;追溯中图分类号:文献标识码:文章编号:():,():()(,),:(,)()():,(),:,:;灵芝为多孔菌科真菌赤芝 ()或紫芝 ,的干燥子实体,性甘,平。归心、肺、肝、肾经。具有治疗心神不宁,失眠心悸,肺虚咳喘,虚劳短气,不思饮食的功效。灵芝的产地众多,其中浙江、吉林、安徽、福建是灵芝的主产地,福建灵芝作为福九味之一,是福建省重点名贵道地药材,于黑龙江医药 年入选国家科技部重点研发计划“闽产高品质道地中药材灵芝规范化种植及精准扶贫示范研究”研究品种。其中福建南平的灵芝道地药材受世界范围认可,目前在日本、欧盟、美国及中国均获得有机食品认证。中药的质量作为影响中药
9、产业发展的关键因素,其质量优劣同中药的道地性相关,因此建立中药产品从生产到采收再进一步到市场销售的全过程质量追溯是保证中药质量的有效方法。目前,国家已出台一系列用于药品质量管理的政策:年颁布了关于开展中药材流通追溯体系建设试点的通知,将中药质量追溯体系建设提升至国家战略高度;年,国务院发布的关于加快推进重要产品追溯体系建设的意见要求将信息技术用于药品追溯;年国家科技部重点研发专项将中药材质量追溯要求项目研究指南;年,福建省食品药品监督管理局福建省规范中药材产地趁鲜加工工作指导意见(试行)将灵芝纳入追溯体系建设;年,福建省药品监督管理局发布关于推进中药饮片信息化追溯体系建设工作的通知,力求中药饮
10、片全过程溯源。因此,构建福建灵芝药材的质量追溯方法对于高品质灵芝药材的全链条质量追溯具有重要意义。目前,超高效液相色谱法()广泛应用于中药的化学成分分析,与传统高效色谱法()相比具有分离度佳、分析速度快的特点,可作为中药材溯源的重要手段,已经成功用于红花、滇重楼等中药的质量追溯。目前针对福建灵芝的质量研究文献较少,主要包括王勇等采用高效液相色谱电喷雾质谱法鉴定福建灵芝醇提物中的灵芝酸、并采用 法比较了福建及其他产地中三个成分的含量。课题组汪丽娜等首先建立了灵芝 指纹图谱结合化学计量学用于福建灵芝的追溯,可将福建灵芝同其他产地灵芝进行区分。但是目前,将 应用于福建灵芝质量评价并构建溯源的研究仍处
11、于空白。因此,本研究以福建灵芝为质量溯源对象,采用 法结合聚类分析、主成分分析及正交偏最小二乘法分析福建灵芝同浙江、吉林、安徽灵芝的差异性,为福建灵芝的溯源建立一种新的技术手段。仪器与试药 仪器 高效液相色谱仪,美国 公司;型数控超声清洗器,昆山市超声仪器有限公司;超纯水仪,美国 公司;型十万分之一分析天平,德国 公司;全自动液体样品处理工作站(睿科集团股份有限公司)。试剂乙腈、甲醇(色谱级);甲酸、乙醇(色谱级)。其余试剂均为分析纯。分析样品灵 芝 酸 (批 号)、灵 芝 酸 (批 号)、灵芝酸(批号)、灵芝酸(批号)、灵芝酸(批号)、灵芝酸(批号)均购自宝鸡市辰光生物科技有限公司。各产区灵
12、芝样品批号信息见表。批灵芝药材标本经福建中医药大学药用植物学实验室范世明正高级实验师鉴定为多孔菌科真菌赤芝 ()的干燥子实体。表 各产区灵芝批号信息编号来源经度()纬度()批号福建吉林浙江安徽 方法与结果 色谱条件采用 色谱柱(),以乙腈()甲酸水溶液()为流动相,梯度洗脱(,;,;,;,;,),流速,检测波长,柱温,进样量。色谱图见图。对照品溶液的制备分别精密称取灵芝酸、灵芝酸、灵芝酸、灵芝酸、灵芝酸、灵芝酸 的对照品粉末适量,用甲醇溶解制备成、的单一对照品储备液,分别精密称取上述对照品储备液适量置于黑龙江医药 量瓶中,用 甲醇溶解并稀释得灵芝酸、灵芝酸、灵芝酸、灵芝酸、灵芝酸、灵芝酸 混合
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