芝麻酚对小鼠银屑病样炎症的抑制作用.pdf
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1、作者简介:陈雪,女,西北农林科技大学在读硕士研究生。通信作者:刘学波(),男,西北农林科技大学教授,博士。:收稿日期:改回日期:犇 犗 犐:犼 狊 狆 犼 狓 文章编号 ()芝麻酚对小鼠银屑病样炎症的抑制作用 陈雪犆犎犈犖 犡 狌 犲刘学波犔 犐 犝犡 狌 犲 犫 狅王雨萱犠犃犖犌犢 狌 狓 狌 犪 狀(西北农林科技大学食品科学与工程学院,陕西 咸阳 )(犆 狅 犾 犾 犲 犵 犲狅 犳犉 狅 狅 犱犛 犮 犻 犲 狀 犮 犲犪 狀 犱犈 狀 犵 犻 狀 犲 犲 狉 犻 狀 犵,犖 狅 狉 狋 犺 狑 犲 狊 狋犃牔犉犝 狀 犻 狏 犲 狉 狊 犻 狋 狔,犡 犻 犪 狀 狔 犪 狀 犵,犛
2、犺 犪 犪 狀 狓 犻 ,犆 犺 犻 狀 犪)摘要:目的:探究芝麻酚对银屑病所致皮肤损伤的改善作用。方法:采 用 小 鼠 背 部 连 续涂 抹咪 喹 莫 特()乳膏构建银屑病模型,建模前周至结束使用芝麻酚皮肤表面涂抹干预,探究芝麻酚对皮肤的保护作用;观察及测定各组小鼠背部厚度、银屑病面积与严重性指数()、脾脏指数、病理组织切片、皮肤组织中细胞因子 白介素()、肿瘤坏死因子()等炎症因子及趋化因子(基序)配体()和趋化因子配体()及血清中炎症因子(、),分析芝麻酚抑制小鼠银屑病样炎症的作用。结果:模型组小鼠背部皮肤出现了典型银屑病的皮损表现及病理特征,涂抹的芝麻酚可以减轻皮肤损伤和表皮增生情况,
3、降低脾脏指数,显著降低皮肤组织及血清中炎症因子的表达。结论:芝麻酚可以明显改善银屑病模型小鼠的皮肤损伤,降低其病理特征并下调机体炎症状态。关键词:芝麻;芝麻酚;银屑病;炎症因子;趋化因子犃 犫 狊 狋 狉 犪 犮 狋:犗 犫 犼 犲 犮 狋 犻 狏 犲:犕 犲 狋 犺 狅 犱 狊:,(,),(,),犚 犲 狊 狌 犾 狋 狊:,犆 狅 狀 犮 犾 狌 狊 犻 狅 狀:,犓 犲 狔 狑 狅 狉 犱 狊:;银屑病又被称为牛皮癣,是一种易复发的慢性炎症性皮肤病,其主要病理生理学特征反映为角质形成细胞异常增殖、真皮血管扩张突出及炎症细胞浸润,患者通常伴有许多合并症,如银屑病关节炎、代谢综合征、心血管疾
4、病、结肠炎以及抑郁症等。各种遗传和环境因素共同参与银屑病及其合并症的发病机制,其中包括饮食习惯,而膳食多酚、维生素等多种营养成分在改善银屑病方面具有积极作用。研究 表明,白藜芦醇在体内及体外试验中均可以有效改善银屑病,并进一步发挥抗血管生成作用;姜黄素可以降低炎症因子以及血管内皮生长因子()表达,进而降低银屑病细胞增殖;辣椒素也已被证实对银屑病有显著疗效;同时番木瓜乳胶被用作治疗银屑病,这些均表明多酚具有预防和改善银屑病的潜在作用。芝麻()是中国传统的油料作物之一,富含多种对人体有益的成分 。芝麻酚(,)又名,亚甲二氧基苯酚,是一种重要的芝麻木酚素,其在芝麻油中含量较高,是芝麻油加工过程中由芝
5、麻素和芝麻林素受热分解所生成的产物 。芝麻酚除了具有比芝麻林素更强的抗氧化性能外,还具有预防代谢综合征、抗炎、抗衰老、护肝、神经保护、抗关节炎及促进乙醇代谢等生理功能 。此外,芝麻酚分子量较小()且为油溶性,使其具有一定的皮肤渗透性,因而可以发挥抑制皮肤黑色素生成 ,促进皮肤伤口愈合的皮肤保护作用 。研究拟采用咪喹莫特乳膏连续涂抹 第 卷第期 总第 期 年月诱导小鼠银屑病模型,通过芝麻酚在皮肤表面的直接涂抹,探究芝麻酚对银屑病样小鼠皮肤损伤及机体炎症的干预作用,以 期为 银 屑病 与 营 养 干 预 之 间 的 联 系 提 供依据。材料及方法材料与仪器材料与试剂 雌性小鼠:周龄,体重 ,所有动
6、物试验均获得西北农林科技大学实验动物伦理委员会批准,陕西诺优生物科技有限公司;咪喹莫特乳膏():四川明欣药业有限公司;芝麻酚:,美国 公司;羧甲基纤维素钠():北京索莱宝科技有限公司;卡泊三醇乳膏:重庆华邦制药有限公司;凡士林:商丘圣邦生物科技有限公司;:北京康为世纪生物科技有限公司;逆转录试剂盒:上海百赛生物技术有限公司;预混体系试剂盒:北京傲美生物科技有限公司;小鼠 、试剂盒:上海科兴生物科技有限公司。主要仪器设备数显外径千分尺:型,温州韦度电子有限公司;倒置荧光显微镜:型,日本奥林巴斯株式会社;低温 高 速 冷 冻 离 心 机:型,德 国 公司;多功能酶标仪:型,美国 公司;实时荧 光
7、定 量 仪:型,新 加 坡 公司。方法银屑病小鼠模型建立和分组试验期间所有小鼠进食和饮水均不受限制。试验开始前用婴儿剃毛刀剔除小鼠背部大约 的毛发,随机将小鼠分为组:对照 组()、模 型 组()、芝 麻 酚 低 剂 量 组()、芝麻酚高剂量组()及卡泊三醇阳性对照组()。模型组、芝麻酚高、低剂量组及卡泊三醇组连续在小鼠背部涂抹 的 乳膏以建立银屑病模型,同时对照组小鼠背部涂抹 凡士林。建模前周,将,芝麻酚溶液(溶于 溶液中)及卡泊三醇乳膏分别涂抹于 、及 组小鼠背部脱毛处,对照组及模型组则使用 溶液涂抹,每日次,持续至建模结束。银屑病面积与严重性指数(评分)及小鼠背部皮肤厚度测定自建模第天开始
8、至建模结束,每日观察各组小鼠背部皮损变化,并参照文献 从红斑、鳞屑、浸润三方面进行 评分(见表)。同时在建模第,天分别使用数显外径千分尺测量小鼠背部皮肤厚度。表小鼠 评分标准 项目评分标准红斑无(分)、淡红色红斑(分)、红色红斑(分)、深红色红斑(分)、全部皮肤覆盖紫红色红斑(分)鳞屑无(分)、轻微细碎鳞屑(分)、大部分皮肤覆盖片状鳞屑(分)、几乎全部皮肤覆盖鳞屑(分)、全部皮肤覆盖厚鳞片且较厚成层(分)浸润无(分)、皮肤表面轻微隆起(分)、皮肤表面中度隆起(分)、皮肤表面隆起明显(分)、全部皮肤表面明显隆起,皮损严重(分)小鼠脾脏指数测定建模结束后处死小鼠,观察小鼠脾脏情况,拍照记录并称重,
9、按式()计算小鼠脾脏指数。犮犿犿 ,()式中:犮 小鼠脾脏指数,;犿 小鼠脾脏重量,;犿 小鼠体重,。组织病理学分析处死小鼠后,用多聚甲醛将小鼠背部皮损组织进行固定,后用石蜡包埋,制成石蜡切片,通过苏木精伊红染色后于显微镜下观察小鼠皮肤损伤情况及炎症浸润程度。检测皮损组织中炎症因子及趋化因子的 表达水平采用 法提取小鼠皮肤组织中总,将 总 反 转 为 ,按 照 预混体系试剂盒说明书进行实时荧光定量 反应,测定皮损组织中各炎症因子及趋化因子的基因表达水平。所有基因的相对表达量依照 犆法计算,犪 犮 狋 犻 狀为管家基因进行归一化处理。各炎症因子及趋化因子的特异性基因引物序列见表。法检测血清 和
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