SN∕T 5364.7-2021 出口食品中致病菌检测方法 微滴式数字PCR法 第7部分:产志贺毒素大肠埃希氏菌(出入境检验检疫).pdf
《SN∕T 5364.7-2021 出口食品中致病菌检测方法 微滴式数字PCR法 第7部分:产志贺毒素大肠埃希氏菌(出入境检验检疫).pdf》由会员分享,可在线阅读,更多相关《SN∕T 5364.7-2021 出口食品中致病菌检测方法 微滴式数字PCR法 第7部分:产志贺毒素大肠埃希氏菌(出入境检验检疫).pdf(12页珍藏版)》请在咨信网上搜索。
1、I C S0 7. 1 0 0. 3 0C C SX0 4中华人民共和国出入境检验检疫行业标准S N/T5 3 6 4. 72 0 2 1 出口食品中致病菌检测方法微滴式数字P C R法第7部分: 产志贺毒素大肠埃希氏菌D r o p l e t d i g i t a l P C R m e t h o d f o r d e t e c t i o n o f p a t h o g e n s i n e x p o r t f o o dP a r t 7:S h i g a T o x i n-p r o d u c i n g E s c h e r i c h i a c o l
2、 i2 0 2 1 - 1 1 - 2 2发布2 0 2 2 - 0 6 - 0 1实施中华人民共和国海关总署发 布前 言本文件按照G B/T 1. 12 0 2 0 标准化工作导则 第1部分: 标准化文件的结构和起草规则 的规定起草。S N/T 5 3 6 42 0 2 1 出口食品中致病菌检测方法 微滴式数字P C R法 共分为8个部分:第1部分: 副溶血性弧菌;第2部分: 霍乱弧菌;第3部分: 溶藻弧菌;第4部分: 创伤弧菌;第5部分: 金黄色葡萄球菌;第6部分: 单核细胞增生李斯特氏菌;第7部分: 产志贺毒素大肠埃希氏菌;第8部分: 克罗诺杆菌属( 阪崎肠杆菌) ;本文件为S N/T
3、5 3 6 42 0 2 1的第7部分。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由中华人民共和国海关总署提出并归口。本文件起草单位: 中国海关科学技术研究中心、 中华人民共和国石家庄海关。本文件主要起草人: 魏咏新、 马丹、 张琳、 李丹、 魏海燕、 徐蕾蕊、 张西萌、 汪琦、 曾静。S N/T5 3 6 4. 72 0 2 1出口食品中致病菌检测方法微滴式数字P C R法第7部分: 产志贺毒素大肠埃希氏菌1 范围本文件规定了食品中产志贺毒素大肠埃希氏菌的微滴式数字P C R检测方法。本文件适用于食品中产志贺毒素大肠埃希氏菌的快速定性检测。本文件的检出限
4、为1 C F U/2 5 g 5 C F U/2 5 g( 或1 C F U/2 5 mL5 C F U/2 5 mL) 。2 规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中, 注日期的引用文件, 仅该日期对应的版本适用于本文件; 不注日期的引用文件, 其最新版本( 包括所有的修改单) 适用于本文件。G B 4 7 8 9. 6 食品安全国家标准 食品微生物学检验 致泻大肠埃希氏菌检验G B/T 6 6 8 2 分析实验室用水规格和试验方法G B/T 2 7 4 0 32 0 0 8 实验室质量控制规范 食品分子生物学检测3 术语和定义本文件没有需要界定的术
5、语和定义。4 缩略语下列缩略语适用于本文件。D NA(d e o x y r i b o n u l e i c a c i d) : 脱氧核糖核酸。d d P C R(d r o p l e t d i g i t a l p o l y m e r a s e c h a i n r e a c t i o n) : 微滴式数字P C R。h l yA: 产志贺毒素大肠埃希氏菌溶血素前体蛋白基因。P C R(p o l y m e r a s e c h a i n r e a c t i o n) : 聚合酶链式反应。5 方法原理针对产志贺毒素大肠埃希氏菌溶血素前体蛋白基因(h l yA
6、) 保守序列设计引物、 探针, 将一定浓度的引物、 探针与模板D NA及数字P C R反应预混液混合, 配成P C R反应体系。将该数字P C R体系分布到1 0 0 0 02 0 0 0 0个微滴中, 使大部分微滴中模板D NA分子的数量为1或0, 然后进行P C R扩增。h l yA的基因探针5 端标记F AM荧光基团, 利用数字P C R系统的检测通道, 可对每个微滴的荧光信号进行采集分析。含有模板D NA的微滴出现荧光信号的增强, 形成阳性微滴簇。根据阳性微滴的有无判定样品中是否含有产志贺毒素大肠埃希氏菌。1S N/T5 3 6 4. 72 0 2 16 主要设备及耗材6. 1 天平:
7、 感量0. 1 g。6. 2 匀质器。6. 3 恒温培养箱:3 6 1 。6. 4 高速台式冷冻离心机( 离心力1 2 0 0 0 g) 。6. 5 涡旋振荡仪。6. 6 核酸蛋白分析仪或紫外分光光度计。6. 7 生物安全柜。6. 8 d d P C R扩增仪及相关配套设备。6. 9 不同量程移液器:1 0 0 L1 0 0 0 L、2 0 L2 0 0 L、1 0 L1 0 0 L、0. 5 L1 0 L。6. 1 0 离心管:2 mL、1. 5 mL和0. 2 mL。7 材料与试剂7. 1 仅使用分析纯试剂和符合G B/T 6 6 8 2规定的一级水。7. 2 细菌基因组提取试剂盒。7.
8、3 d d P C R反应配套试剂。7. 4 去游离核酸酶: 伯乐1)。 1) 给出这一信息是为了方便本文件使用者, 并不表示只认可该产品。如果其他等效产品具有相同的效果, 则可使用等效产品。7. 5 阳性对照: 产志贺毒素大肠埃希氏菌标准菌株D NA, 或含目的片段的D NA亦可。7. 6 产志贺毒素大肠埃希氏菌h l yA基因特异性序列片段参见附录A, 引物探针如下:S T E C - F:5- C G G G T TAT G C C T G C AAG T T C - 3 ;S T E C - R:5- G C AG TAGAAAGAG C AG T C G C AAT - 3 ;S T
- 配套讲稿:
如PPT文件的首页显示word图标,表示该PPT已包含配套word讲稿。双击word图标可打开word文档。
- 特殊限制:
部分文档作品中含有的国旗、国徽等图片,仅作为作品整体效果示例展示,禁止商用。设计者仅对作品中独创性部分享有著作权。
- 关 键 词:
- SNT 5364.7-2021 出口食品中致病菌检测方法 微滴式数字PCR法 第7部分:产志贺毒素大肠埃希氏菌出入境检验检疫 SN 5364.7 2021 出口 食品 致病菌 检测 方法 微滴式
1、咨信平台为文档C2C交易模式,即用户上传的文档直接被用户下载,收益归上传人(含作者)所有;本站仅是提供信息存储空间和展示预览,仅对用户上传内容的表现方式做保护处理,对上载内容不做任何修改或编辑。所展示的作品文档包括内容和图片全部来源于网络用户和作者上传投稿,我们不确定上传用户享有完全著作权,根据《信息网络传播权保护条例》,如果侵犯了您的版权、权益或隐私,请联系我们,核实后会尽快下架及时删除,并可随时和客服了解处理情况,尊重保护知识产权我们共同努力。
2、文档的总页数、文档格式和文档大小以系统显示为准(内容中显示的页数不一定正确),网站客服只以系统显示的页数、文件格式、文档大小作为仲裁依据,平台无法对文档的真实性、完整性、权威性、准确性、专业性及其观点立场做任何保证或承诺,下载前须认真查看,确认无误后再购买,务必慎重购买;若有违法违纪将进行移交司法处理,若涉侵权平台将进行基本处罚并下架。
3、本站所有内容均由用户上传,付费前请自行鉴别,如您付费,意味着您已接受本站规则且自行承担风险,本站不进行额外附加服务,虚拟产品一经售出概不退款(未进行购买下载可退充值款),文档一经付费(服务费)、不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。
4、如你看到网页展示的文档有www.zixin.com.cn水印,是因预览和防盗链等技术需要对页面进行转换压缩成图而已,我们并不对上传的文档进行任何编辑或修改,文档下载后都不会有水印标识(原文档上传前个别存留的除外),下载后原文更清晰;试题试卷类文档,如果标题没有明确说明有答案则都视为没有答案,请知晓;PPT和DOC文档可被视为“模板”,允许上传人保留章节、目录结构的情况下删减部份的内容;PDF文档不管是原文档转换或图片扫描而得,本站不作要求视为允许,下载前自行私信或留言给上传者【曲****】。
5、本文档所展示的图片、画像、字体、音乐的版权可能需版权方额外授权,请谨慎使用;网站提供的党政主题相关内容(国旗、国徽、党徽--等)目的在于配合国家政策宣传,仅限个人学习分享使用,禁止用于任何广告和商用目的。
6、文档遇到问题,请及时私信或留言给本站上传会员【曲****】,需本站解决可联系【 微信客服】、【 QQ客服】,若有其他问题请点击或扫码反馈【 服务填表】;文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“【 版权申诉】”(推荐),意见反馈和侵权处理邮箱:1219186828@qq.com;也可以拔打客服电话:4008-655-100;投诉/维权电话:4009-655-100。
链接地址:https://www.zixin.com.cn/doc/73878.html