3-苹果酸-乳酸发酵.ppt
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1、葡 萄 酒 工 艺 学5.苹果酸-乳酸发酵5 苹果酸乳酸发酵(MLF)本章主要讲述苹果酸乳酸发酵的机理、作用、控制技术和工艺条件。要求学生了解苹果酸乳酸发酵的机理、作用和研究进展,掌握现代葡萄酒酿造的基本原理,掌握苹果酸乳酸发酵对干红葡萄酒的必要性及其控制技术和工艺条件。教学重点和难点:苹果酸乳酸发酵的管理和控制。5 苹果酸乳酸发酵(MLF)5.1 MLF的简史和定义5.2 MLF的意义5.3 MLF的机理5.4 苹果酸乳酸细菌的种类和特性5.5 如何进行MLF5.6 MLF的新技术思考题5.1 MLF的简史和定义n定义:就是在乳酸细菌的作用下将苹果酸分解为乳酸和CO2的过程。使酸涩、粗糙 柔
2、软肥硕,提高酒的质量。n18世纪70年代,巴斯德首先发现。n 1914年,瑞士MullerThurgau等定名为苹果酸乳酸发酵。n现代葡萄酒学的研究得出现代葡萄酒酿造的基本原理要获得优质的干红葡萄酒,首先应该使糖和苹果酸分别只被酵母菌和MLB分解;其次应尽快完成这一分解过程;第三,当葡萄酒中不再含有糖和苹果酸(而且仅仅在这个时候),葡萄酒才算真正生成,应尽快除去微生物。5.2 MLF对葡萄酒质量的影响 苹果酸-乳酸发酵对酒质的影响受乳酸菌发酵特性、生态条件、葡萄品种、葡萄酒类型以及工艺条件等多种因素的制约。如果苹果酸-乳酸发酵进行的纯正,对提高酒质有重要意义,但乳酸菌也可能引起葡萄酒病害,使之
3、败坏。n1 1 降酸作用降酸作用 在较寒冷地区,葡萄酒的总酸尤其是苹果酸的含量可能很高,苹果酸-乳酸发酵就成为理想的降酸方法,苹果酸-乳酸发酵是乳酸菌以L-苹果酸为底物,在苹果酸-乳酸酶催化下转变成L-乳酸和CO2的过程。二元酸向一元酸的转化使葡萄酒总酸下降,酸涩感降低。酸降幅度取决于葡萄酒中苹果酸的含量及其与酒石酸的比例。通常,苹果酸-乳酸发酵可使总酸下降1-3g/L。2.2.增加细菌学稳定性增加细菌学稳定性 苹果酸和酒石酸是葡萄酒中两大固定酸。与酒石酸相比,苹果酸为生理代谢活跃物质,易被微生物分解利用,在葡萄酒酿造学上,被认为是一种起关键作用的酸。通常的化学降酸只能除去酒石酸,较大幅度的化
4、学降酸对葡萄酒口感的影响非常显着,甚至超过了总酸本身对葡萄酒质量的影响。而葡萄酒进行苹果酸-乳酸发酵可使苹果酸分解,苹果酸-乳酸发酵完成后,经过抑菌、除菌处理,使葡萄酒细菌学稳定性增加,从而可以避免在贮存过程中和装瓶后可能发生的二次发酵。n3 3 风味修饰风味修饰 苹果酸-乳酸发酵另一个重要作用就是对葡萄酒风味的影响。例如乳酸菌能分解酒中的柠檬酸生成乙酸、双乙酰及其衍生物(乙偶姻、2,3-丁二醇)等风味物质。乳酸菌的代谢活动改变了葡萄酒中醛类、酯类、氨基酸、其它有机酸和维生素等微量成分的浓度及呈香物质的含量。这些物质的含量如果在阈值内,对酒的风味有修饰作用,并有利于葡萄酒风味复杂性的形成;但超
5、过了阈值,就可能使葡萄酒产生泡菜味、奶油味、奶酪味、干果味等异味。其中,双乙酰对葡萄酒的风味影响很大,当其含量小于4mg/L时对风味有修饰作用,而高浓度的双乙酰则表现出明显的奶油味。苹果酸-乳酸发酵后有些脂肪酸和酯的含量也发生变化,其中乙酸乙酯和丁二酸二乙酯的含量增加。n4 4 降低色度降低色度 在苹果酸-乳酸发酵过程中,由于葡萄酒总酸下降(1-3g),引起葡萄酒的pH上升(约0.3个单位),这导致葡萄酒的色密度(color intensity)由紫红向蓝色色调转变。此外,乳酸菌利用了与SO2结合的物质(-酮戊二酸,丙酮酸等酮酸),释放出游离SO2,后者与花色苷结合,也能降低了酒的色密度,在有
6、些情况下苹果酸-乳酸发酵后,色密度能下降30%左右。因此,苹果酸-乳酸发酵可以使葡萄酒的颜色变得老熟(张春晖等,1999)。5 5 细菌可能引起的葡萄酒病害细菌可能引起的葡萄酒病害 在含糖量很低的干红和一些干白葡萄酒中,苹果酸是最易被乳酸菌降解的物质,尤其是在pH较高(3.5-3.8)、温度较高(16)、SO2浓度过低或苹果酸-乳酸发酵完成后不立即采取终止措施,几乎所有的乳酸菌都可变为病原菌,从而引起葡萄酒病害。根据底物来源可将乳酸菌病害分为:酒石酸发酵病(或泛浑病);甘油发酵(可能生成丙烯醛)病(或苦败病);葡萄酒中糖的乳酸发酵(或乳酸性酸败)。MLF的影响因素nMLF依赖于:n良好的酵母发
7、酵 良好的葡萄酒MLFnMLB的种类,MLF后微生物群落的活动nMLF的环境条件n酒厂的卫生,SO2的使用,过滤n可能与酵母代谢相互作用,接种时间影响风味MLF适用的酒种n适用的酒种:对于干红很重要;对于酒体丰满的霞多丽(木桶)、赛美容、灰比诺、缩味浓、沙斯拉干白,从MLF中获益非浅;适于高酸果香型酒,起泡葡萄酒基酒。nMLF逐渐成为改善酒体,使香气、风味物质平衡的必需程序,而且在严格工艺控制的条件下可以实现降酸至酿酒者需要的任意酸度,并得到良好的风味和口感。5.3 MLF的机理n发酵一般是厌氧获得能量的反应,而MLF的能量来自少量糖的分解0.1g-5g苹果酸,MLF的目的或许是改善自身的生存
8、环境,目前还不清楚。n由苹果酸转化为乳酸,有3条可能的途径:苹果-酸-草酰乙酸-丙酮酸-乳酸;苹果酸-丙酮酸-乳酸;苹果酸-乳酸。如果有丙酮酸环节,MLB又具有两种脱氢酶,葡萄酒中就应该有L和D型两种乳酸,而实际上MLF只是将酒中L苹果酸转化为L乳酸,所以只能是第三条途径,将催化该反应的酶命名为苹果酸乳酸酶(MLE)。苹果酸乳酸酶(MLE)的性质n为诱导酶,即只有当基质中含有苹果酸时,乳酸菌才能合成此酶;其活性需要NAD+为辅酶,故其具有与苹果酸脱氢酶和苹果酸酶相似的性质;n它只能将L-苹果酸转化为L-乳酸;n其分子量很大,为230000左右。n最佳活动pH值为5.75,需要Mn2+的激活。n
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