杜仲叶水提物和醇提物抑菌及其抗氧化活性研究.pdf
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1、第 卷第 期学报 年 月 :././.杜仲叶水提物和醇提物抑菌及其抗氧化活性研究龚卫华王延云贺建武胡美忠蓝道英.杜仲综合利用技术国家地方联合工程实验室(吉首大学)湖南 吉首.乐山师范学院 生命科学学院四川 乐山.铜仁职业技术学院贵州 铜仁 摘 要:为比较杜仲叶水提物和醇提物抗菌及抗氧化活性分别采用去离子水和乙醇(和)溶液提取杜仲叶得到三种提取物采用 实验法测定提取物的抑菌效果通过 自由基、超氧阴离子及总还原力来评价其抗氧化活性 结果表明:三种杜仲叶提取物对细菌均有一定抑制活性特别是对金黄色葡萄球菌的抑制活性最强其中杜仲叶水提物、醇提物和 醇提物对金黄色葡萄球菌 分别为.、.和./但杜仲叶水提物
2、对真菌黄曲霉无明显抑菌效果杜仲醇提物抑菌效果强于杜仲水提物 三种杜仲提取物均具有较强的抗氧化活性其中醇提物的清除、超氧阴离子能力及总还原力均高于水提物 总之杜仲叶提取物均具有一定抗菌和抗氧化活性具有作为食品防腐剂和抗氧化剂的潜力关键词:杜仲叶提取物抑菌活性抗氧化作用中图分类号:.文献标志码:文章编号:()收稿日期:基金项目:国家自然科学基金项目“湘西地区野生食用植物资源利用的空间分异及形成机制”()湖南省科技成果转化及产业化计划 高新技术产业科技创新引领计划项目“杜仲深度研发及高值化利用关键技术集成与示范”()湖南省教育厅项目“白耙齿菌降解杜仲果壳木质纤维素的机制研究”()铜仁职院国家民委中兽
3、药重点开放实验项目“杜仲提取物抑菌作用及在蛋鸡日粮中的应用研究”()作者简介:龚卫华()女土家族湖南永顺人吉首大学副教授博士研究方向:植物资源高值化利用通信作者:贺建武()男土家族湖南溆浦人副教授博士研究方向:可持续生态学和生物资源可持续利用:.引言在食品工业中为提高食品的品质延长其货架期需要添加一定量的食品添加剂但化学添加剂存在一定的安全隐患人们迫切需要使用天然、安全和高效的食品添加剂来满足这一需求 因此从植物中提取活性成分是一种适当的方法有研究表明植物提取物具有杀菌、抗氧化、降三高和抗肿瘤等作用目前已广泛应用于化妆品、食品加工、饲料添加剂中杜仲(.)又名思仲、思仙、胶树等单科单属多年生落叶
4、乔木阔叶材是我国特有的经济树种 传统以皮入药但现代研究表明杜仲叶与杜仲皮具有类似的化学成分及活性富含环烯醚萜类、苯丙素类、总黄酮类、杜仲多糖、抗真菌蛋白、氨基酸等具有抗氧化、降糖、抗衰老和抑菌等作用 研究表明杜仲叶具有抗氧化活性不同提取方式的杜仲叶中活性成分和抗氧化作用存在一定差异杜仲叶醇提物主要聚焦在对其药用价值的研究对其抗菌抗氧化的深入研究还较少 因此本研究以慈利县杜仲叶为原料系统研究了不同杜仲叶水提物和醇提物的抑菌和抗氧化活性的效果旨在为杜仲叶在食品添加剂方面的应用提供基础数据 年国家把湖南省和河南省作为试点省份将杜仲叶列为药食同源材料 这为杜仲叶在食品工业的发展开辟了新的通道也为进一步
5、综合开发利用杜仲叶提供了可能材料与方法.材料与试剂实验以湖南省慈利县江垭林场采摘的杜仲叶为原料大肠杆菌()、金黄色葡萄球 菌()、沙 门 氏 菌()和黄曲霉均由乐山师范学院微生物实验 室 提 供 二 苯 基 三 硝 基 苯 肼()、铁氰化钾、邻二氮菲、三氯化铁和阿尔玛蓝()等为分析纯.仪器与设备 超声波清洗器(昆山是超声仪器有限公司)型高速多功能粉碎机(浙江省永康市松青五金厂)培养箱(上海智诚分析仪器制造有限公司)多功能酶标仪(山东莱恩德智能科技有限公司)高压蒸汽灭菌器(山东博科生物产业有限公司).试验方法.提取物的制备将新鲜的杜仲叶片用蒸馏水冲洗干净烘干后粉碎待用剪碎装入 的三角瓶中分别加入
6、水、乙醇和 乙醇室温下超声波提取 次每次 减压抽滤将 次滤液合并后减压浓缩冷冻干燥即得 种不同杜仲叶提取物置于条件下保存备用.抗菌活性评价杜仲叶提取物对致病菌金黄色葡萄球菌、沙氏杆菌、大肠杆菌和黄曲霉菌抗菌活性进行测试参考 等的 实验法以 值表达抗菌活性 金黄色葡萄球菌、沙氏杆菌、大肠杆菌和黄曲霉菌接种在 的 培养基中孵化 ()将菌悬液在 的吸光度的光学密度()调整到.(采用 调整)表示其菌悬液浓度大约为./的测定采用 孔微滴板每孔加入 然后将初始体积为 的实验化合物加入到相应的孔中然后依次稀释从最高到最低达到理想的浓度 加入待测化合物后每孔加入.浓度为./的菌悬液使终浓度为达到/混合液在 孵
7、育 后 ()试剂被添加到微孔中并轻轻摇动再孵化 ()摇匀后在酶标仪中测定每孔在 和 的吸光度 对照组为 单独(空白)、稀释 实验化合物和(阴性)、细菌细胞和(阳性)是根据制造商的配方(每个实验孔 的吸光度差除以阳性对照的差值)计算 的减少百分比来确定的 试验进行了 个重复 测定的 被定义为使 降低 的实验化合物的最低浓度并在添加 后 形成略带紫色的孔.自由基清除的测定参考张强等方法略有改动 取./的 乙醇溶液.加入适量提取液用乙醇补足 静置 在 处测定吸光度清除率 ()/其中:为加提取液后 溶液的吸光度为提取液的吸光度为未加提取液时 溶液的吸光度.清除超氧阴离子自由基(.)的测定取适量样品溶液
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