桃叶珊瑚苷-硼酸共聚印迹整体柱的制备及其分子识别性能.pdf
《桃叶珊瑚苷-硼酸共聚印迹整体柱的制备及其分子识别性能.pdf》由会员分享,可在线阅读,更多相关《桃叶珊瑚苷-硼酸共聚印迹整体柱的制备及其分子识别性能.pdf(8页珍藏版)》请在咨信网上搜索。
1、第期陈双扣,等:基于分子对接虚拟筛选铜绿假单胞菌胞外酶抑制剂的研究第卷第期年月化 学 研 究 与 应 用 ,文章编号:()桃叶珊瑚苷硼酸共聚印迹整体柱的制备及其分子识别性能罗晓癑,邓文,肖真仪,李辉,(吉首大学化学化工学院,湖南吉首;(吉首大学)杜仲综合利用国家与地方联合工程实验室,湖南吉首)摘要:以桃叶珊瑚苷为模板,乙烯基苯基硼酸为功能单体,制备了桃叶珊瑚苷硼酸共聚印迹整体柱。考察了分子印迹整体柱的通透性、选择保留性能、吸附及固相萃取性能。结果表明,整体柱通透性好,当使用体积比为 的甲醇混合溶液为流动相时,其对模板具有最强的保留能力和较高的选择性,容量因子高达,选择因子最高达。前沿分析表明整
2、体柱的饱和吸附量达 。分析显示印迹材料主要有两类吸附位点。当分子印迹柱用于从杜仲籽薟粗提物中分离纯化桃叶珊瑚苷时,可获得含量高于的产品。当整体柱用于分离分析时,方法的检出限和定量限分别为 和 ,且整体柱可重复使用。关键词:分子印迹整体柱;共价印迹;硼酸亲和性;桃叶珊瑚苷;分子识别中图分类号:文献标志码:,(,;,):()(),(),:;收稿日期:;修回日期:基金项目:国家自然科学基金项目()资助;湖南省大学生创新课题项目()资助联系人简介:李辉(),男,教授,主要从事生命科学中的分离分析新方法研究。:化学研究与应用第卷图分子印迹聚合物的制备流程 桃叶珊瑚苷是杜仲等植物中广泛存在的一种具有抗菌抗
3、癌等生物活性的环烯醚萜类天然产物。该种化合物主要从植物中提取而获得,但由于植物基体成分的复杂性,采用传统分离材料及方法从植物中提取桃叶珊瑚苷工艺复杂,效率不高,。分子印迹聚合物已广泛用于色谱分离、固相萃取、化学生物传感、分子催化及药物传输等领域。分子印迹聚合物的制备方法主要有非共价印迹法及共价印迹法,前者基于模板分子与功能单体间的非共价作用力而构建印迹位点,这样产生的印迹位点因其作用强度较低而具有较高的吸附可逆性,但易于产生非选择性的键合作用,且非印迹法生成的吸附位点能量分布不均,专一性结合性能受限,。后者基于模板功能单体间的共价作用而构建印迹位点,这类吸附位点通过共价作用吸附目标化合物,吸附
4、强度大,专一性程度高,但共价键结合强度高,吸附可逆性较差,吸附在印迹位点的目标化合物常需要比较苛刻的化学反应才能释放目标物。硼酸分子中含有杂化的原子和羟基,极易与二醇基化合物共价结合,但这种共价配合物的稳定性严重依赖于介质,当介质高于硼酸时,硼酸与二醇基化合物共价结合,而当介质调至酸性时,生成的共价配合物又容易发生离解,释放含二醇基的化合物。基于硼酸分子的这种性质,它是二醇基化合物(如糖类化合物等)的良好配体,可用于多醇基化合物的分离富集。尤其是将硼酸亲和性与分子印迹技术结合起来,便可构建具有可逆共价亲和的专一性印迹识别位点,极大提高分子印迹聚合物的吸附选择性和萃取分离应用性能。本工作将以功能
5、化的硼酸分子为功能单体,以桃叶珊瑚苷为模板,构建基于共价印迹的分子印迹整体柱,探讨其对目标化合物桃叶珊瑚苷的分子识别和分离应用效能。实验部分 仪器和试剂高效液相色谱仪(,日本岛津公司)。型超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)。紫外分光光度计(上海天美科技有限公司)。桃叶珊瑚苷(,)、京尼平苷(,)、喇叭葡萄糖苷(,)和车前草葡萄糖苷(,)购自中国药品生物制品鉴定所。乙烯基苯基硼酸()、乙二醇二甲基丙烯酸酯(,)、十二醇、偶氮二异丁腈()及,二氧六烷()购自上海阿拉丁试剂有限公司。石油醚()、甲醇()、乙腈()、浓硫酸、浓盐酸、氨水和乙醇()购自天津市福晨化学试剂厂。空不锈钢柱管()购自日本。
6、杜仲籽薟购自中国中药材市场。杜仲粗提物样品溶液的制备按照修改的文献方法进行。称取 干燥的杜仲籽薟粉末,加入 石油醚,于 下回流,趁热过滤,脱除脂类化合物,稍冷后,固体重新加入 乙醇中于 下提取次,每次,过滤后合并滤液,减压蒸馏除去溶剂后再用少量甲醇溶解,得到杜仲粗提物样品溶液,备用。实验方法精确称取 桃叶珊瑚苷和 第期罗晓癑,等:桃叶珊瑚苷硼酸共聚印迹整体柱的制备及其分子识别性能乙烯基苯基硼酸,溶于 ,二氧六烷中,滴加滴浓硫酸,于 回流反应,得预聚体。将预聚体置于 试管中,加入 十二醇、和 ,混合后通氮气。移取 溶液于空不锈钢柱管中,两端用螺母封闭后,将柱管置于 水浴中反应,卸下柱两端的螺母,
7、装上柱筛板后,接入液相色谱系统中,用甲醇(,)混合溶液为流动相,设定流速 ,洗脱色谱柱直至基线平衡,得到分子印迹整体柱,制备流程如图。制备非印迹整体柱时,直接将 乙烯基苯基硼酸溶于 ,二氧六烷中,滴加滴浓硫酸,即可得预聚体,其他步骤与分子印迹整体柱的制备方法相同。保留性能测试将分子印迹整体柱接入液相色谱系统,以不同体积比的甲醇混合溶液为流动相,采用等度洗脱模式测定保留性能。设定流速为 ,检测波长,进样体积。丙酮用于测定死时间。容量因子()和选择因子()按方程()和()进行计算。()()()式中,为化合物保留时间,为死时间,和为模板及结构类似物的容量因子。前沿分析及吸附等温线的测定前沿分析用于测
8、定整体柱的吸附量。以含不同底物浓度的甲醇(,)混合溶液为流动相(设定流速为 ),连续流经柱子后,发生前沿展开,当流出曲线构建稳定的平台后,完成一次突破,突破体积用半高法获得并按文献方法计算吸附量。更换底物浓度更高的流动相,再次进行前沿展开,根据各流出曲线的突破体积计算不同浓度下的吸附量。分子印迹固相萃取分子印迹固相萃取以梯度洗脱方式进行,流动相为甲醇混合溶液,体积比依次为,;,;,。流动相流速 。进样体积:。萃取时,根据标准物质的保留时间,收集一定时间范围的流出液,减压蒸馏脱除溶剂后再溶解于少量溶剂中,用高效液相色谱测定目标物含量。高效液相色谱分析高效液相色谱分析在柱(,)上进行。流动相为甲醇
9、乙酸混合溶液(,),流动相流速 ,进样体积,检测波长。标准曲线法用于定性和定量分析。结果与讨论 分子印迹整体柱的制备图给出了桃叶珊瑚苷印迹聚合物的制备流程图。选用乙烯基苯硼酸为功能单体,其首先与桃叶珊瑚苷分子发生共价结合生成环状硼酸酯化合物。然后再与交联剂通过热引发产生聚合,生成高度交联的桃叶珊瑚苷硼酸共聚物,为提高整体柱的通透性,制备时加入一定量的十二醇作为致孔剂。将所得共聚物柱接入液相色谱系统中,以甲醇(体积比 )为流动相洗脱色谱柱直到产生稳定的基线为止,得到桃叶珊瑚苷硼酸共聚印迹整体柱。整体柱性能评价 通透性通透性是分子印迹整体柱的重要指标,色谱应用中可通过测试柱压进行评价。当以不同体积
10、比的甲醇混合溶液(体积比分别为 、)为流动相,流速在 范围内变化时,整体柱柱压如图。结果表明,以甲醇混合溶液为流动相,在设定的流速范围内,色谱柱背压较低。图不同流动相及不同流速下的柱压 化学研究与应用第卷 保留性能分别以体积比为 、及 的甲醇混合溶液为流动相,测试了模板及其结构类似物(、和)在分子印迹及非印迹整体柱上的保留性能,结果示于表可以发现,分子印迹整体柱对模板具有最强的保留能力,当使用体积比为 的甲醇混合溶液为流动相时,容量因子高达,远高于我们以前的研究结果,这一方面是由于印迹位点的硼酸基团与模板分子中糖苷端基上二醇羟基的强相互作用,另一方面是来源于印迹空穴结构与模板分子的大小、形状及
- 配套讲稿:
如PPT文件的首页显示word图标,表示该PPT已包含配套word讲稿。双击word图标可打开word文档。
- 特殊限制:
部分文档作品中含有的国旗、国徽等图片,仅作为作品整体效果示例展示,禁止商用。设计者仅对作品中独创性部分享有著作权。
- 关 键 词:
- 珊瑚 硼酸 共聚 印迹 整体 制备 及其 分子 识别 性能
1、咨信平台为文档C2C交易模式,即用户上传的文档直接被用户下载,收益归上传人(含作者)所有;本站仅是提供信息存储空间和展示预览,仅对用户上传内容的表现方式做保护处理,对上载内容不做任何修改或编辑。所展示的作品文档包括内容和图片全部来源于网络用户和作者上传投稿,我们不确定上传用户享有完全著作权,根据《信息网络传播权保护条例》,如果侵犯了您的版权、权益或隐私,请联系我们,核实后会尽快下架及时删除,并可随时和客服了解处理情况,尊重保护知识产权我们共同努力。
2、文档的总页数、文档格式和文档大小以系统显示为准(内容中显示的页数不一定正确),网站客服只以系统显示的页数、文件格式、文档大小作为仲裁依据,平台无法对文档的真实性、完整性、权威性、准确性、专业性及其观点立场做任何保证或承诺,下载前须认真查看,确认无误后再购买,务必慎重购买;若有违法违纪将进行移交司法处理,若涉侵权平台将进行基本处罚并下架。
3、本站所有内容均由用户上传,付费前请自行鉴别,如您付费,意味着您已接受本站规则且自行承担风险,本站不进行额外附加服务,虚拟产品一经售出概不退款(未进行购买下载可退充值款),文档一经付费(服务费)、不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。
4、如你看到网页展示的文档有www.zixin.com.cn水印,是因预览和防盗链等技术需要对页面进行转换压缩成图而已,我们并不对上传的文档进行任何编辑或修改,文档下载后都不会有水印标识(原文档上传前个别存留的除外),下载后原文更清晰;试题试卷类文档,如果标题没有明确说明有答案则都视为没有答案,请知晓;PPT和DOC文档可被视为“模板”,允许上传人保留章节、目录结构的情况下删减部份的内容;PDF文档不管是原文档转换或图片扫描而得,本站不作要求视为允许,下载前自行私信或留言给上传者【自信****多点】。
5、本文档所展示的图片、画像、字体、音乐的版权可能需版权方额外授权,请谨慎使用;网站提供的党政主题相关内容(国旗、国徽、党徽--等)目的在于配合国家政策宣传,仅限个人学习分享使用,禁止用于任何广告和商用目的。
6、文档遇到问题,请及时私信或留言给本站上传会员【自信****多点】,需本站解决可联系【 微信客服】、【 QQ客服】,若有其他问题请点击或扫码反馈【 服务填表】;文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“【 版权申诉】”(推荐),意见反馈和侵权处理邮箱:1219186828@qq.com;也可以拔打客服电话:4008-655-100;投诉/维权电话:4009-655-100。