miR-107在变应性鼻炎小鼠鼻黏膜中的表达及作用.pdf
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1、:./.论著 在变应性鼻炎小鼠鼻黏膜中的表达及作用崔玲 刘双 赵黎阳项目来源:辽宁省自然基金资助计划(编号:)作者单位:辽宁省大连市友谊医院耳鼻咽喉头颈外科 【摘要】目的 探讨 在变应性鼻炎()小鼠鼻黏膜中的表达及其作用机制 方法采用卵清蛋白()腹腔注射及滴鼻建立 模型实验分为 组(腹腔注射.氯化钠溶液、滴鼻处理)、组、组(致敏后用带有 的腺病毒注射入小鼠腹腔)、组(致敏后用带有 过表达载体的腺病毒注射入小鼠腹腔)每组 只 法检测外周血、鼻黏膜组织中 表达量采用视觉模拟评分量表()评估鼻部症状试剂盒检测血清 特异性免疫球蛋白()水平 法检测、水平 检测 炎性小体相关蛋白(、)表达量 结果 与
2、组比较 组外周血、鼻黏膜组织中 表达水平、水平降低(.)鼻部症状评分、蛋白水平升高(.)血清 特异性、水平升高(.)与 组、组比较 组外周血、鼻黏膜组织中 表达水平、水平升高(.)鼻部症状评分、蛋白水平降低(.)血清 特异性、水平降低(.)结论 小鼠中 表达下调 过表达可抑制炎性反应、调节免疫功能其作用机制与抑制 炎性小体活化有关【关键词】变应性鼻炎卵清蛋白 样受体家族蛋白 凋亡相关微粒蛋白【中图分类号】.【文献标识码】【文章编号】().【】().().(.)()()().().().()().().(.)(.).(分表明造模成功.实验分组:只小鼠随机选取 只作为 组仅腹腔注射.氯化钠溶液、滴
3、鼻处理 其余小鼠均进行造模造模成功后随机分为 组、组、组每组 只 组:致敏后用带有 的腺病毒注射入小鼠腹腔(/)连续作用 组:致敏后用带有 过表达载体的腺病毒注射入小鼠腹腔(/)连续作用 .采集血液、组织样本:组小鼠处理完成后采用水合氯醛()腹腔注射(./)麻醉 碘伏消毒眼部周围皮毛用毛细管穿刺收集末端血液 置于肝素钠抗凝管中一份经 /转速离心 取上层血浆另一份 放置 下后在 /离心 取上清液保存至超低温冰箱 取血完成后用脱颈椎法处死小鼠去除毛皮、软腭采用眼科剪剪开左右鼻骨鼻腔软骨暴露后呈现完整鼻腔黏膜取黏膜组织.检 测 的 表 达 水 平:用 提取试剂盒提取外周血、鼻黏膜组织总 试剂盒将目标
4、 反转 录 合 成 用 荧 光 定 量 试 剂 盒 在 荧光定量 仪上选择性扩增目标采用 法计算 表达量.鼻部症状评分:采用视觉模拟评分量表()评估鼻部症状包括鼻塞、喷嚏、流清涕等根据严重程度评分无明显症状记为 分分值范围 分分值越高表示症状越严重.检测血清 特异性 水平:参照试剂盒说明书检测血清 特异性 水平严格按照试剂盒说明书操作.法检测、水平:采用 法检测血清、水平按照试剂盒说明书操作.检测、蛋白表达量:提取鼻黏膜组织总蛋白分离胶进行 恒定电压电泳当电泳至分离胶时选用 电泳若指示剂转移至凝胶下端时停止电泳 分离胶上蛋白转印至 膜脱脂牛奶封闭 用稀释度分别为、的一抗(、)与稀释度为 的内参
5、 孵育 膜 ()洗膜用 稀释的二抗孵育 ()暗室内曝光显影用 扫描图像以目的蛋白与内参 蛋白灰度值的比值反映蛋白相对表达量.统计学分析 应用 .统计软件计量资料以 表示多组间比较采用单因素方差分析两两比较采用 检验.为差异有统计学意义 结果.在变应性鼻炎小鼠模型中表达水平与 组比较 组外周血、鼻黏膜组织中 河北医药 年 月 第 卷 第 期 表达水平降低(.)与 组、组比较 组外周血、鼻黏膜组织中 表达水平升高(.)见表 表 在变应性鼻炎小鼠模型中表达水平 组别外周血 鼻黏膜 组.组.组.组.值.值.注:与 组比较.与 组比较.与 组比较.过表达 对变应性鼻炎小鼠模型鼻部症状评分的影响 与 组比
6、较 组鼻部症状评分升高(.)与 组、组比较 组鼻部症状评分降低(.)见表 表 组小鼠鼻症状评分的比较组别鼻症状评分 组.组.组.组.值.值.注:与 组比较.与 组比较.与 组比较.过表达 对变应性鼻炎小鼠模型血清中 特异性 的影响 与 组比较 组血清 特异性 水平升高(.)与 组、组比较 组血清 特异性 水平降低(.)见表 表 组小鼠血清中 特异性 表达水平比较/组别 特异性 组.组.组.组.值.值.注:与 组比较.与 组比较.与 组比较.过表达 对变应性鼻炎小鼠模型炎性反应的影响与 组比较 组血清、水平升高(.)水平降低(.)与 组、组比较 组血清、水平降低(.)水平升高(.)见表.过表达
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