HPV阳性宫颈癌组织中IGF2BP2和RPRD1B的表达水平及临床价值研究.pdf
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1、121现代检验医学杂志第 38 卷第 5 期2023 年 9 月J Mod Lab Med,Vol.38,No.5,Sept.2023HPV 阳性宫颈癌组织中 IGF2BP2 和 RPRD1B 的 表达水平及临床价值研究沈华,盛晓鹃(南通市海门区人民医院妇产科,江苏南通 226100)摘要:目的研究人乳头瘤病毒(human papilloma virus,HPV)阳性宫颈癌组织中胰岛素样生长因子 2 结合蛋白 2(insulin-like growth factor2 binding protein 2,IGF2BP2)与细胞核前 mRNA 结构域调节因子 1B(regulatory nucl
2、ear pre-mRNA domain containing 1B,RPRD1B)的表达及临床价值。方法选取自 2018 年 1 月 2019 年 1 月期间于南通市海门区人民医院诊治的 82 例 HPV 阳性宫颈癌患者的癌组织和癌旁组织,以 41 例 HPV 阴性宫颈癌组织为对照。应用免疫组织化学分析组织中 IGF2BP2,RPRD1B 蛋白表达。Spearman 秩相关分析 IGF2BP2 与 RPRD1B 蛋白表达的相关性。Kaplan-Meier 生存分析 IGF2BP2,RPRD1B 蛋白表达对生存预后的影响。COX 比例风险模型分析影响 HPV 阳性宫颈癌患者生存预后的因素。结果H
3、PV 阳性癌组织 IGF2BP2,RPRD1B 蛋白阳性率高于 HPV 阴性癌组织(67.07%vs 9.76%,6.10%)及癌旁正常组织(70.73%vs 17.07%,7.32%),差异具有统计学意义(2=35.978,65.705;31.582,62.290,均 P0.05)。IGF2BP2 与 RPRD1B 蛋白表达呈显著正相关(r=0.717,P0.05)。肿瘤 FIGO 分期 A 期、伴淋巴结转移 HPV 阳性宫颈癌组织中 IGF2BP2(82.61%,90.63%),RPRD1B(86.95%,93.75%)蛋白阳性率分别高于 A B期(47.22%,52.00%)、无淋巴结转
4、移组织(50.00%,56.00%),差异均具有统计学意义(2=11.450 13.432,均 P 0.05)。IGF2BP2 阳性组三年累积生存率低于 IGF2BP2 阴性组(65.45%vs 88.89%)、RPRD1B 阳性组三年累积生存率低于 RPRD1B 阴性组(65.32%vs 91.67%),差异具有统计学意义(Log Rank 2=6.487,5.192,均 P0.05)。FIGO分期 A 期(OR=1.579,95%CI=1.042 2.393)、并发淋巴结转移(OR=1.960,95%CI=1.180 3.256),IGF2BP2阳性(OR=1.786,95%CI=1.22
5、6 2.602)和 RPRD1B 阳性(OR=1.602,95%CI=1.119 2.293)是影响 HPV 阳性宫颈癌患者生存预后的独立危险因素。结论宫颈癌中IGF2BP2和RPRD1B表达升高,两者与FIGO分期、淋巴结转移有关,是影响 HPV 阳性宫颈癌患者预后的独立危险因素。关键词:人乳头瘤病毒;宫颈癌;胰岛素样生长因子 2 结合蛋白 2;细胞核前 mRNA 结构域的调节因子 1B中图分类号:R737.33;R730.43文献标识码:A文章编号:1671-7414(2023)05-121-06doi:10.3969/j.issn.1671-7414.2023.05.023Express
6、ion and Clinical Value of IGF2BP2 and RPRD1B in HPV Positive Cervical Cancer TissuesSHEN Hua,SHENG Xiaojuan(Department of Obstetrics and Gynecology,Nantong Haimen District Peoples Hospital,Jiangsu Nantong 226100,China)Abstract:ObjectiveTo study the expression and clinical significance of insulin-lik
7、e growth factor 2 binding protein 2(IGF2BP2)and regulatory nuclear pre-mRNA domain containing 1B (RPRD1B)in HPV-positive cervical cancer tissues.MethodsFrom January 2018 to January 2019,82 cases of HPV-positive cervical cancer tissues and paracancerous tissues collected in Nantong Haimen District Pe
8、oples Hospital were selected as the study subjects,and 41 cases of HPV-negative cervical cancer tissues were selected as the control.Immunohistochemistry was used to analyze the expression of IGF2BP2 and RPRD1B protein in tissues.Spearman rank correlation analysis was used to analyze the correlation
9、 between IGF2BP2 and RPRD1B protein expression.Kaplan-Meier survival analysis was used to analyze the effect of IGF2BP2,RPRD1B protein expression on survival prognosis in HPV-positive cervical cancer patients.COX proportional risk model was used to analyze factors affecting the survival and prognosi
10、s of HPV positive cervical cancer patients.ResultsThe positive rate of IGF2BP2 and RPRD1B protein in HPV-positive cancer tissue was significantly higher than that in HPV-negative cancer tissue(67.07%vs 9.76%,6.10%)and adjacent normal tissue(70.73%vs 17.07%,7.32%),and the differences were statistical
11、ly significant(2=35.978,65.705;31.582,69.290,all P0.05).IGF2BP2 was positively correlated with RPRD1B protein expression(r=0.717,P0.05).The positive rates of IGF2BP2(82.61%,90.63%)and RPRD1B(86.95%,93.75%)protein expression in 基金项目:江苏省科学技术厅资助项目(编号:20180537):高危型 HPVE6/E7 蛋白在宫颈癌中的作用机制研究。作者简介:沈华(1978-)
12、,女,本科,副主任医师,研究方向:妇产科临床,E-mail:。通讯作者:盛晓鹃(1979-),女,本科,副主任医师,研究方向:妇产科临床。122现代检验医学杂志第 38 卷第 5 期2023 年 9 月J Mod Lab Med,Vol.38,No.5,Spet.2023cervical cancer tissues with FIGO stage IIA and HPV positive lymph node metastasis were higher than those in stage IA to stage IB(47.22%,52.00%)and tissues without
13、lymph node metastasis(50.00%,56.00%),and the differences were statistically significant(2=11.450 13.432,all P 0.05).The 3-year cumulative survival rates of patients in the IGF2BP2 positive expression group and RPRD1B positive expression group were lower than those in the IGF2BP2 negative expression
14、group(65.45%vs 88.89%)and RPRD1B negative expression group(65.32%vs 91.67%),respectively(Log Rank 2=6.487,5.192,P0.05)。本研究经本院伦理委员会审核批准通过。1.2仪器与试剂IGF2BP2 兔单克隆抗体(Abcam公司,货号ab124930),RPRD1B兔单克隆抗体(美国 CST 公司,货号 74693),PV6000 免疫组化染色试剂盒(北京中杉金桥公司),石蜡切片机(德国徕卡公司),DM500 光学显微镜(日本奥林巴斯公司)。1.3方法1.3.1免疫组织化学检测IGF2BP
15、2,RPRD1B表达:留取 HPV 阳性组患者癌组织及癌旁组织,HPV 阴性组癌组织,按照免疫组化染色试剂盒说明进行操作。IGF2BP2,RPRD1B 一抗稀释比均为 150。镜下观察染色强度和范围,以染色强度评分(0:无染色,1:浅黄色,2:棕褐色)和染色面积评分(0:25%,1:25%50%,2:50%)的乘积作为最终免疫组化染色评分,2 分为阴性,2 分为阳性。1.3.2随访:所有患者自病理确诊后开始随访,随访三年,第 1 年 3 个月随访一次,第 2 3 年 6 个月随访一次,随访方式为门诊或电话随访。随访内容为患者生存状态及生存时间。随访截止至 2022年2月1日,随访终点为患者死亡
16、或随访时间结束。1.4统计学分析利用 SPSS23.0 软件进行统计分析。计数资料以率(百分比)n(%)表示,组间比较采用卡方检验。Spearman 秩相关分析 HPV 阳性宫颈癌组织中 IGF2BP2,RPRD1B 蛋白表达的相关性。Kaplan-Meier 生存分析 IGF2BP2,RPRD1B蛋白表达对HPV阳性宫颈癌患者生存预后的影响。COX 比例风险模型分析影响 HPV 阳性宫颈癌患者生存预后的因素。P 0.05 为差异有统计学意义。2结果123现代检验医学杂志第 38 卷第 5 期2023 年 9 月J Mod Lab Med,Vol.38,No.5,Sept.20232.1组织中
17、 IGF2BP2,RPRD1B 蛋白表达IGF2BP2蛋白棕褐色阳性染色主要位于细胞膜和细胞浆,RPRD1B 蛋白棕褐色阳性染色主要位于细胞核。见图 1。HPV 阳性癌组织 IGF2BP2 蛋白阳性率为67.07%(55/82),高于HPV阴性癌组织9.76%(4/41)及癌旁正常组织 6.10%(5/82),差异具有统计学意义(2=35.978,65.705,均 P0.05)。HPV 阳性癌组织 RPRD1B 蛋白阳性率为 70.73%(58/82),高于 HPV 阴性癌组织 17.07%(7/41)及癌旁正常组织7.32%(6/82),差异具有统计学意义(2=31.582,69.290,均
18、 P0.05)。图 1组织中 IGF2BP2,RPRD1B 蛋白表达(免疫组化,200)2.2HPV 阳 性 癌 组 织 中 IGF2BP2 与 RPRD1B蛋白表达相关性HPV 阳性癌组织中 IGF2BP2与 RPRD1B 蛋白表达呈显著正相关(r=0.717,P0.05)。2.3IGF2BP2,RPRD1B 蛋白表达与 HPV 阳性宫颈癌临床病理参数的关系见表 1。肿瘤 FIGO 分期 A 期、伴淋巴结转移 HPV 阳性宫颈癌组织中IGF2BP2,RPRD1B 蛋白阳性率高于 A B期、无淋巴结转移组织,差异具有统计学意义(均P 0.05)。表 1 IGF2BP2,RPRD1B 蛋白表达与
19、临床病理参数的关系 n(%)类别nIGF2BP2 阳性2PRPRD1B 阳性2P年龄(岁)605030(60.000)2.5230.11232(64.00)2.8050.094 603225(78.13)26(81.25)病理类型鳞癌4833(68.75)0.1470.70136(75.00)1.0190.313腺癌3422(64.71)22(64.71)FIGO 分期 A B 期3617(47.22)11.4500.00118(50.00)13.3240.000 A 期4638(82.61)40(86.95)分化程度高中分化3924(61.54)1.0320.31026(66.67)0.59
20、40.441低分化4331(72.09)32(74.42)肌层浸润浅肌层4128(68.29)0.0550.81426(63.41)2.1210.145深肌层4127(65.85)32(78.05)淋巴结转移有3229(90.63)13.1810.00030(93.75)13.4320.000无5026(52.00)28(56.00)2.4IGF2BP2,RPRD1B 蛋白表达与 HPV 阳性宫颈癌患者生存预后的关系见图 2。随访中,死亡22 例,失访 1 例,三年生存率为 73.17%(60/82)。IGF2BP2 阳性组和阴性组患者的三年生存率分别为 65.45%(36/55),88.89
21、%(24/27)。RPRD1B阳性组和阴性组患者的三年生存率分别为 65.52%(38/58),91.67%(22/24)。IGF2BP2 阳 性 组和 RPRD1B 阳性组患者三年累积生存率分别低于IGF2BP2 阴性组和 RPRD1B 阴性组,差异具有统计学意义(Log Rank 2=6.487,5.192,P0.05)。2.5单因素及多因素 COX 比例风险回归分析影响HPV 阳性宫颈癌患者生存预后的因素见表 2,3。以 HPV 阳性宫颈癌患者预后作为因变量(0=存活,1=死亡,t=时间),单因素及多因素 COX 比例风险模型分析结果,FIGO 分期 A 期、并发淋巴结转移、IGF2BP
22、2 阳性、RPRD1B 阳性是影响 HPV阳性宫颈癌患者预后的独立危险因素。124现代检验医学杂志第 38 卷第 5 期2023 年 9 月J Mod Lab Med,Vol.38,No.5,Spet.2023图 2Kaplan-Meier 生存曲线分析 HPV 阳性宫颈癌组织 IGF2BP2,RPRD1B 蛋白表达与预后的关系表 2 单因素 COX 比例风险模型类别赋值SEWald 2POR95%CI年龄 60 岁 vs 60 岁0.4450.3761.4010.3591.5600.747 3.261病理类型鳞癌 vs 腺癌0.5820.5561.0960.5971.7900.602 5.3
23、22肌层浸润深肌层 vs 浅肌层0.2790.2371.3860.4121.3220.831 2.103分化程度低分化 vs 中/高分化0.3860.2213.0510.0641.4710.954 2.269FIGO 分期 A 期 vs A B 期0.5840.2605.0450.0001.7931.077 2.985淋巴结转移有 vs 无0.6320.2735.3590.0001.8811.102 3.213IGF2BP2阳性 vs 阴性0.5820.2067.9820.0001.7901.195 2.680RPRD1B阳性 vs 阴性0.3860.1814.5480.0001.4711.0
24、32 2.098表 3多因素 COX 比例风险模型类 别SEWald 2POR95%CIFIGO 分期0.4570.2124.6470.0001.5791.042 2.393淋巴结转移0.6730.2596.7520.0001.9601.180 3.256IGF2BP20.5800.1929.1250.0001.7861.226 2.602RPRD1B0.4710.1836.6240.0001.6021.119 2.2933讨论宫颈癌是我国女性常见恶性肿瘤,近年来其发病有年轻化的趋势,严重威胁女性健康。HPV 感染是宫颈癌发病的重要危险因素,我国女性 HPV感染亚型多为 16,18,52 和
25、537。持续的高危型HPV 感染能够导致宫颈癌前病变的发生,最终发展为宫颈癌。深入研究 HPV 阳性宫颈癌发生发展的分子机制,寻找新的肿瘤标志物,对疾病早期诊治,具有较大的临床意义。胰岛素样生长因子 2 结合蛋白 2(IGF2BP2)是胰岛素生长因子 2 mRNA 结合蛋白家族成员,参与调节 mRNA 亚细胞定位、稳定性和翻译8。研究表明,IGF2BP2 在胰腺癌9、前列腺癌10等癌症中过度表达,其作为 N6 甲基腺苷阅读器,通过 K同源性结构域识别具有GGC序列,调控基因表达,促进肿瘤恶性进展。本研究中,HPV 阳性宫颈癌中IGF2BP2 表达升高,与 FIGO 分期、淋巴结转移有关,提示
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