DB62∕T 4671-2023 草木樨香豆素含量的测定(甘肃省).pdf
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1、ICS 65.020CCS B 05B62甘 肃 省 地 方 标 准DB62/T 46712023草木樨香豆素含量的测定Determination of coumarin content in Melilotus spp.2023-03-28 发布 2023-05-01 实施甘肃省市场监督管理局 发布DB62/T 4671 2023目 次前言.III1范围.12规范性引用文件.13术语和定义.14原理.14.1高效液相色谱法.14.2荧光光谱法.14.3紫外光谱法.14.4近红外光谱法.14.5电化学分析法.15试剂或材料.25.1无水甲醇.25.2 无水乙醇.25.3 标准品溶液(对照品).
2、25.4 标准品储备液.25.5 微孔滤膜.25.6 乙醇/水溶液.25.7 四丁基四氟硼酸钱.25.8 N,N-二甲基甲酰胺.25.9 电解质溶液.26仪器设备.26.1高效液相色谱仪.26.2 分析天平.26.3 旋转蒸发仪.26.4 振荡器.36.5超声波清洗器.36.6 荧光光谱仪.36.7 紫外分光光度计.36.8 近红外光谱仪.36.9 电化学工作站.37试样制备与保存.38分析步骤.38.1 提取.38.2标准曲线的制定.39测定.49.1高效液相色谱法测定.49.2 荧光光谱法测定.49.3 紫外光谱法测定.5IDB62/T 4671 20239.4 近红外光谱法测定.59.5
3、电化学分析测定.510实验数据处理.511 允许差.6附录A(资料性)香豆素标准样品液相色谱图.7附录B(资料性)香豆素标准样品荧光光谱图.8附录C(资料性)不同样品香豆素近红外预测模型.9附录D(资料性)香豆素标准样品电化学差分脉冲伏安图.10IIDB62/T 4671 2023*I-1刖 B本文件按照GB/T L 12020标准化工作导则 第1部分:标准化文件的结构和起草规则的规定 起草。本文件由甘肃省林业和草原局提出并监督实施。本文件由甘肃省草业标准化技术委员会归口。本文件起草单位:兰州大学草地农业科技学院、中国科学院兰州化学物理研究所、农业部牧草与草 坪草种子质量监督检验测试中心(兰州
4、)、兰州市农业科技研究推广中心。本文件主要起草人:张吉宇、董树清、王艺蒙、彭文静、闫启、王彦荣、邵士俊、王朋磊、张正社。本文件由兰州大学草地农业科技学院负责解释。IIIDB62/T 4671 2023草木樨香豆素含量的测定1范围本文件规定了草木樨中香豆素含量的色谱、光谱、电化学等测定方法。本文件适用于草木樨中香豆素含量的测定和定量分析。2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文件,仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本 文件。GB/T 14699.1饲料采样NY/T2129饲草产品抽样
5、技术规程3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1香豆素coumarin2H-1-苯并毗喃2酮,分子式为C9H6。2,相对分子质量146.13,熔点:68。73。(lit.),呈白色结 晶固体,具有抗肿瘤、抗菌、抗凝血等作用,可提高植物的抗逆性。4原理4.1 高效液相色谱法利用反相色谱柱分离,以保留时间定性,外标法定量。4.2 荧光光谱法利用香豆素在激发波长为660nm,发射波长660nm750nm的荧光强度进行荧光光谱分析测定。4.3 紫外光谱法利用香豆素在300nm600nm光谱区的分子吸收来进行紫外光谱分析测定。4.4 近红外光谱法利用香豆素中的化学键的泛频振动或转动对近红外光的吸收
6、特性,以漫反射或透射方式获得在近 红外区的吸收光谱或透射光谱。4.5 电化学分析法1DB62/T 4671 2023利用香豆素在特定的电位下的电解液中发生氧化还原反应,产生相应电极电流,进行香豆素的电化 学分析检测。5试剂或材料5.1无水甲醇CH3OHCAS号:65-56-1,色谱纯;光谱纯;分析纯。5.2无水乙醇C2H6O,CAS号:64-17-5,色谱纯;光谱纯;分析纯。5.3 标准品溶液(对照品)香豆素,C9H6。2,CAS 号:91-64-5,纯度沙8%。5.4 标准品储备液香豆素为干态标准品,准确称量标准香豆素0.0146g,用甲醇定容至100mL的容量瓶中,并稀释1000 倍至浓度
7、为0.146Rg/mL,超声处理10mm后经0.45叩1滤膜过滤并作为标准品储备液备用,现配现用。5.5 微孔滤膜尼龙滤膜或性能相当者,孔径0.45即。5.6 乙醇/水溶液800mL乙醇与200mL水超声混匀。5.7 四丁基四氟硼酸锻Ci6H36BF4N,CAS号:429-42-5,纯度N98%。5.8 N,N-二甲基甲酰胺C3H7NO,CAS号:68-12-2,纯度38%。5.9 电解质溶液称取相应重量的四丁基四氟硼酸镂,以N,N-二甲基甲酰胺为溶剂配制成的电解质溶液。6仪器设备6.1高效液相色谱仪柱温箱、二极管阵列检测器(DAD)。6.2 分析天平精确度:O.OOOlgo6.3 旋转蒸发仪
8、2DB62/T 4671 2023旋转速度范围:0r/min 1200r/min 水浴锅控温范围:099。(3。6.4振荡器振幅:4.5mm。转速范围:0rpm3000rpm。6.5 超声波清洗器超声频率:40kHz06.6 荧光光谱仪发射波长范围:35Onm8OOnm6.7 紫外分光光度计波长范围:300nm600nm。6.8 近红外光谱仪波长范围:1400nm2600nmo6.9 电化学工作站三电极系统:工作电极(玻碳电极)、对电极、参比电极。电压范围:2.0Vo精确度:0.3%。转换速率:OV/slV/s。7试样制备与保存按GB/T 14699.1和NY/T2129-2012的规定采集牧
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