针灸对肠易激综合征大鼠平滑...能及皮层肌动蛋白表达的影响_赵嘉伟.pdf
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1、年月第卷第期,【论 著】湖北中医药大学学报?针灸对肠易激综合征大鼠平滑肌收缩功能及皮层肌动蛋白表达的影响赵嘉伟,王华(湖北中医药大学针灸治未病湖北省协同创新中心,湖北武汉)摘要:目的观察针灸对腹泻型肠易激综合征()大鼠 平 滑肌收缩功能及皮层肌动蛋白(、)表达的影响。方法将只月龄级雌性大鼠随机分为空白组、模型组、针刺组、针灸组组,每组只。以急性应激与慢性应激相结合的方法制备大鼠模型。针刺组选取内关、足三里、关元进行针刺干预,每次干预持续,连续;针灸组在针刺干预的基础上,同时进行艾灸干预。采用蛋白免疫印迹法检测远端 结肠组织蛋白表达水平以及比值。结果与空白组比较,模型组大鼠肠推进率、结肠收缩最大
2、张力、远端结肠组织蛋白表达水平及比值均升高();与模型组相比,针刺组、针灸组均表现出肠推进率、离体结肠收缩最大张力明显降低(),达量及的比值明显降低();与针刺组相比,针灸组的肠推进率、离体结肠收缩最大张力明显降低(),表达量及的比值明显降低()。结论针刺干预与针刺艾灸联合干预均能明显改善模型大鼠的肠道动力,并均能明显改善模型大鼠的肠道动力相关重要分子的表达,说明针灸对的 治疗作用与其对皮层肌动蛋白表达水平的调控有关;与单纯针刺干预相比,针刺艾灸联合干预在改善模型大鼠的肠道动力分子指标方面存在更为明显的作用,在改善模型大鼠的肠道动力方面存在明显优势。关键词:肠易激综合征;针灸;肌动蛋白;标本配
3、穴中图分类号:;文献标识码:,(,):(,)()():,;,基金项目:国家自然科学基金面上项目(项目编号:);国家中医药管理局岐黄工程项目(国 中医药人教函号)。作者简介:赵嘉伟(),男,湖北中医药大学 级针灸推拿学专业硕士研宄生,研宄方向:针灸效应机制的研究。通信作者:王华(),男,湖 北中医药大学教授,研 宄方向:针灸效应机制的研究,:。湖北中医药大学学报 年月第卷第期?,()(),();,?(),(户),:;肠易激综合征(,)作为慢性发作性肠道疾病的一种 常见病症,其以腹痛、胃胀及大便习惯改变为主要特征。肠易激综合征包含腹泻型、便秘型、混合型以及不 定型在内的种亚型。中 国的 患病 率因
4、地区、年龄、性别等因素有所区别;其中成人的 患病 率约为。本实验所研宄的亚型是(,腹泻 型肠易激综合征);大多数研宄表明,在我国是的主要亚型。随着现代生活方式的改变以及生活节奏的加快,的发病率越来越高;研宄显示,年龄、性别、肠道菌群失调、饮食习惯、胃肠道感染史、内源性大麻素系统异 常、文化程度、维生素缺乏、家庭收入、精神压力等因素均与的发病相关。以腹痛、腹泻、解稀便(糊状便或水样便为主要临床表现,虽然无性命之虞,但可对患者的曰常社会生活造成不小的困扰。作为临床常见的消化功能紊乱性疾病,己成为针灸科的 临床优势病种。现代医学对于的治疗策略首推采用个体化管理,注重建立包含患者教育、饮食建议、缓解压
5、力的良好医患关系;若患者没有良好反馈,则 需给予药物或非药物的治疗方案。治疗常用药物多选用抗生素,同时使用益生菌来调节肠道微生物群以缓解症状。然而,运用处方药物治疗往往会伴随严重的副作用,而且患者服药过后病 情少有明显改善。多项临床试验表明?,针灸等中医疗法改善了患者的治疗效果,并减少了副作用。有研宄表明,针灸治疗的 临床疗效明显优于西药,对腹痛、腹胀、大便次数及大便异常等均有显著 改善,并且复发率更低。近年来针对病理机制的研宄结 果表明,皮层肌动 蛋白结合蛋白()与肌动 蛋白()、肌动 蛋白()共同作用,通过调节肌动蛋白细胞骨架的结构改变肠道平滑肌细胞的功能,从而改变病理进程中的结肠功 能。
6、本研宄以大鼠为研宄对象,以“标本配穴”针灸治疗为干预手段,通过探讨针灸对肠平滑肌收缩功 能及皮层肌动 蛋白表达的影响,为“标本配穴”针灸治疗的科学内涵提供实验依据。现将研究结 果报道如下。材料与方法实验动物及分组只月龄级雌性大鼠,体质量(),由斯贝福(北京)生物技术有限公司提供,动物许可证号:(京)。放置于环境温度,湿度 环境中适应性喂养周,采用随机数字法分为空白组、模型组、针灸组、针刺组各只,实验严格遵守科技部号文件关于善待实验动物的指导性意 见要求。主要仪器及试剂 生物机能实验系统(成都泰盟科技有限公司);生物张力传感器(成都泰盟软件有限公司);电泳仪电源、垂直电泳槽、电转仪(北京六一仪器
7、厂);酶标仪();中研太和一次性使用针灸针(北京中研太和医疗器械有限公司);季福 堂细艾条(岳阳市艾健堂生物科技有限公司)。兔多抗(杭州贤至生物有限公司,批号:);兔多抗(北京博奥森生物技术有限公司,批号:);兔多抗(北京博奥森年月第卷第期,湖北中医药大学学报?生物技术有限公司,批号:);兔多抗(武汉三鹰生物技术有限 公司,批号:)。模型 制备以急性应激与慢性应激相 结合的方法制备大鼠模型,参照文献方法,将大鼠暴露于种不同的压力源:()禁水;()禁食;()夹尾巴;()暴露于(:环境丨;()放置于(:水中游泳;()白天和夜晚倒置;()水平振动()。上述应激方案每随机应用,且连续无重复特定的压力源
8、,制备时间持续周。随后休息 喂养周,在第天时进行急性束缚应激,包裹肩部,上肢前肢和胸廓。干预方法自制鼠衣固定大鼠,参照实验针灸学和实验动物常用穴位名称与定位第部分:大鼠?,选取内关、足三里、关元。“内关”穴位于大鼠前肢内侧、离腕关节约左右的尺桡骨缝间;“关元”位于大鼠肚脐下 约处;“足三里”穴位于膝关节下 外侧,腓骨小头下方约处。针刺组:选用中研太和一次性针灸针(北京中研太和医疗器械有限公司)直刺,针刺深度为,以平补平泻手法行针,每隔行针,重复次,最后次行针毕后取针,每次干预持续,连续。针灸组:在针刺干预的基础上,同时将直径为季福堂细艾条(岳阳市艾健堂生物科技有限 公司)悬放于穴位上约处,刺激
9、强度以大鼠耐受情况而定,每 次干预持续,连续。空白组和模型组不行干预治疗。指标检测肠推进率:干预治疗结束后,大鼠剥夺食物,在取材前检测各组大鼠小肠推进率。配置营养性半固定糊状物,用其对大鼠进行灌胃处理并等待,随后用颈椎脱白法将大鼠处死,开腹,分离出胃部及小肠部,用手术缝合线结扎幽门处和回盲部肠段,将肠道平铺在操作台上,测量两结扎部位间长度,即小肠全长,记为;测量幽门和糊状物到达小肠最远处的距离,记为;通过计算可得,小肠推进率。离体结肠平滑肌条收缩实验:用颈椎脱白法将大鼠处死,开腹,在盲肠下处,剥 离并修剪出约的结肠肠管,以手术缝合线将其一端与固定钩连接,以纵行肌方向悬挂于浴槽中,浴槽中盛有温度
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