月柿果醋对D-半乳糖致衰老模型小鼠肝肾功能的影响.pdf
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1、第 36 卷第 3 期2023 年 6 月华 夏 医 学Acta Medicinae SinicaVol.36 No.3Jun.2023DOI:10.19296/ki.1008-2409.2023-03-003论 著ORIGINAL ARTICLE月柿果醋对 D-半乳糖致衰老模型小鼠肝肾功能的影响卢晓琳1,李咏春1,王 钦1,莫 玲1,2,俞小珍1,李晶晶1(1.桂林医学院公共卫生学院,广西卫健委全生命周期健康与保健研究重点实验室/广西环境暴露组学与全生命周期健康重点实验室,广西 桂林 541199;2.江南大学食品学院,江苏 无锡 214122)摘要 目的:观察月柿果醋对 D-半乳糖致衰老小
2、鼠肝肾组织抗氧化能力的影响。方法:比色法测定小鼠血清、肝脏和肾脏组织中总超氧化物歧化酶(T-SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性以及总抗氧化能力(T-AOC)和丙二醛(MDA)水平;HE 染色观察肝肾组织的病理变化。结果:月柿果醋可提高模型小鼠血清、肝脏和肾脏中 T-SOD、T-AOC 水平,降低模型小鼠血清、肝脏和肾脏中 MDA 含量,差异有统计学意义(P0.05);月柿果醋可促进衰老模型小鼠的肝脏和肾脏组织损伤恢复。结论:月柿果醋可能通过提高模型小鼠的抗氧化能力,缓解 D-半乳糖引起的肝肾损伤。关键词:月柿果醋;衰老;肝脏损伤;肾脏损伤;抗氧化中图分类号:R363 文献标志码:
3、A 文章编号:1008-2409(2023)03-0014-05Effects of persimmon vinegar on liver and kidney functions in aging miceinduced by D-galactoseLU Xiaolin1,LI Yongchun1,WANG Qin1,MO Ling1,2,YU Xiaozhen1,LI Jingjing1(1.Guangxi Health Commission Key Laboratory of Entire Lifecycle Health and Care/Guangxi KeyLaboratory o
4、f Enviromental Exposomics and Entire Lifecycle Health,School of Public Health,GuilinMedical University,Guilin 541199;2.School of Food Science and Technology,Jiangnan University,Wuxi214122,China)Abstract Objective:To observe the effect of persimmon vinegar on the antioxidant capacity of liver andkidn
5、ey tissues in aging mice induced by D-galactose.Methods:The activities of total superoxide dismutase(T-SOD),glutathione peroxidase(GSH-Px),total antioxidant capacity(T-AOC),and malondialdehyde(MDA)in serum,liver,and kidney tissues of mice were measured by colorimetry.HE staining was usedto observe t
6、he pathological changes of liver and kidney tissues.Results:Persimmon vinegar increased thelevels of T-SOD and T-AOC in serum,liver,and kidney of model mice,and reduced the content of MDA41基金项目:国家大学生创新创业训练计划项目(202010601033);广西自然科学基金项目(2014GXNSFBA118124);广西高等学校千名中青年骨干教师培育计划项目(桂教教师:2020,58 号)。第一作者简介:卢
7、晓琳,本科生在读,研究方向为食品卫生与营养学。通信作者:李晶晶,Email:lijingjing 。第 3 期卢晓琳等:月柿果醋对 D-半乳糖致衰老模型小鼠肝肾功能的影响第 36 卷in serum,liver,and kidney of model mice,with a statistically significant difference(P 0.05).Persimmon vinegar could promote the recovery of liver and kidney tissue damage in aging model mice.Conclusion:Persimm
8、on vinegar may alleviate liver and kidney damage caused by D-galactose by improvingthe antioxidant capacity of model mice.Keywords:persimmon vinegar;senility;liver injury;kidney injury;antioxidant 衰老是不可抗拒的生物学过程,但随着人们生活方式和健康水平的提高,越来越多的老年人仍然身体健壮、精力充沛。现代医学对衰老机制的研究尚无定论,但“自由基损伤理论”为国际学术界公认的衰老学说之一。衰老时,由于线粒
9、体功能紊乱以及机体抗氧化能力下降1-2,活性氧(reactive oxygenspecies,ROS)在体内大量堆积,包括超氧阴离子自由基(O-2)、过氧化氢(H2O2)、羟自由基(OH)、一氧化氮(NO)、单线态氧(1O2)等引起氧化应激。目前认为3,氧化应激是衰老和许多衰老相关疾病的共同作用机制。体内抗氧化酶类在清除过量自由基的过程中发挥重要作用,适度增加生物体内保护性酶类的活性,或增加抗氧化功能的生物活性物质,可延缓衰老过程和防治老年性疾病4。广西壮族自治区恭城瑶族自治县是月柿的主要产区,已有几百年的月柿种植、加工历史。恭城月柿富含单宁、黄酮、三萜和甾醇等活性化合物,其中单宁含量最为丰富
10、,有较强的清除二苯基苦酰肼基自由基(diphenyl picryl hydrazinyl radical,DPPH)和OH 自由基的作用5。月柿果醋是恭城月柿的加工产品之一。研究结果表明6,月柿果醋富含多糖、单宁和黄酮等活性物质能改善衰老模型小鼠的学习记忆能力。本研究探讨月柿果醋对 D-半乳糖诱导的衰老模型小鼠的抗氧化能力和肝肾组织损伤的修复作用,为月柿果醋在抗衰老及预防老年性疾病方面的应用提供依据。1 材料与方法1.1 材料与试剂自制月柿果醋(酸度 4.13%)6;D-半乳糖(购于北京索莱宝生物科技有限公司);BCA 蛋白定量试剂盒(购于上海碧云天生物技术有限公司);总超氧化物歧化酶(T-S
11、OD)试剂盒、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)试剂盒、总抗氧化能力(T-AOC)试剂盒和丙二醛(MDA)(购于南京建成生物工程研究所);雄性昆明(KM)小鼠(购于湖南斯莱克景达实验动物有限公司),动物许可证号:SCXK(湘)2016-0002。SCXK(湘)2016-0002。本研究所用的实验动物经桂林医学院实验动物使用伦理委员会批准(批准编号:GLMC202003320)。1.2 仪器与设备台式低速自动平衡离心机 L600(购于湖南湘仪实验室仪器开发有限公司);Biomate3S 型紫外可见光分光光度仪,LUX 型多功能性 酶 标 仪(购 于Thermo Fisher Scientific
12、 公司)。1.3 实验方法1.3.1 衰老模型的建立雄性 KM 小鼠 40 只,3 周龄,体重1417 g,在 SPF 级动物房观察饲养1 周,参照文献7-8建立 D-半乳糖致衰老小鼠模型,每日注射 D-半乳糖(120 mg/kg),连续 4 周后,随机分为 5组,每日继续注射 D-半乳糖的同时,衰老对照组小鼠每日按 10 ml/kg 蒸馏水灌胃(蒸馏水为溶剂),维生素 C 组(阳性药物组)按 100 mg/kg 维生素 C 灌胃,月柿果醋低剂量、高剂量组分别按 10 ml/kg 月柿果醋灌胃(低剂量组取果醋原液稀释 80 倍,高剂量组稀释 40 倍),另设正常对照组,持续干预 4 周,每周根
13、据小鼠体重变化调整注射及灌胃剂量。1.3.2血样本采集及脏器指数测定小鼠禁食24 h,乙醚麻醉后,采集腹主动脉血样本;颈椎脱臼法处死小鼠,迅速取出肝脏和肾脏组织称重,计算肝脏指数和肾脏指数。脏器指数(g/kg)=组织重(g)/小鼠体重(kg)。1.3.3生化指标测定小鼠腹主动脉采集的血样本,在 4 下,以 3000 r/min 速度离心 15 min,取血清,-80 保存。分别取部分肝脏和肾脏组织用0.9%氯化钠溶液制成 10%的组织匀浆液,-80 保存。严格按照试剂盒说明书测定小鼠血清和肝肾组织中氧化还原相关指标。51第 3 期华 夏 医 学第 36 卷1.3.4病理学检查小鼠肝脏和肾脏组织
14、用 10%乙醛固定,然后进行梯度脱水、石蜡包埋、切片、苏木精-伊红(HE)染色,显微镜下观察病理学变化。1.4 统计学方法数据采用 SPSS 18.0 软件分析,计量资料以(xs)表示,采用单因素方差分析和 LSD 法分析。P0.05表示差异有统计学意义。2 结果2.1 小鼠脏器指数衰老对照组小鼠肝脏和肾脏指数低于正常组,差异有统计学意义(P0.05),而月柿果醋组和维生素 C 组小鼠肝脏指数与肾脏指数均高于衰老对照组(P0.05),且月柿果醋高剂量组肝脏指数高于维生素 C 组(P0.05),见表 1。表 1 小鼠肝脏指数和肾脏指数分析(g/kg)组别n肝脏指数肾脏指数正常组843.942.7
15、616.431.02衰老对照组836.615.1913.131.79维生素 C 灌胃组846.844.3517.071.55月柿果醋低剂量灌胃组843.813.8014.440.48月柿果醋高剂量灌胃组849.435.5216.771.082.2 血清生化指标衰老对照组 T-SOD、GSH-Px 及 T-AOC 水平低于正常组,MDA 水平高于正常组(P0.05),而月柿果醋高剂量组和维生素 C 组血清中 T-SOD、T-AOC 水平高于衰老对照组,MDA 水平低于衰老对照组(P0.05),见表 2。表 2 小鼠血清中 T-SOD、GSH-Px 酶活性与 T-AOC、MDA 水平(n=8)组别
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