DB37∕T 4093—2020 用于核酸提取的鱼类样本野外采集、处理及保存技术规范(山东省).pdf
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1、TCS 65.150 B 50 DB37 山东省山巳ET且,万标准DB37/T 4093-2020 用于核酸提取的鱼类样本野外采集、处理及保存技术规范Technical specification for collection, processing and storage of fish samples for nucleic acid extraction in nature environment 2020 - 08 -20发布2020 - 09 -20实施山东省市场监督管理局发布DB37/T 4093-2020 目次前言. . . . . . . . . . . . . . . . .
2、 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 11 1范围. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1 2规范性引用文件. . . .
3、 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1 3术语和定义. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1 4缩回各i吾. . . . . . . .
4、 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1 5样本采集前准备.2 5. 1采集方案设计.2 5. 2稀有或珍惜物种的采集.2 5. 3采集工具和材料.2 6鱼类获取.2 6.1获取方法.2 6. 2鱼类信息记录.2 6. 3拍照规范.2 7样本采集及处理. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
5、. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3 7. 1消毒.3 7. 2鱼的预处理. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3 7. 3取样3 7. 4样本处理.4 7. 5取样量. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
6、. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 4 8编码规则.5 8.1鱼类凭证编号. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 5 8. 2组织样本编号. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
7、 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 5 9样本运输.5 9.1运输要求. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 5 9. 2样本包装. . 5 9. 3干冰需求量. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
8、 . . . 6 10样本储存. . . . . . 6 11质量控制. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 6 附录A(规范性附录)野外鱼类采集信息表. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 7 附录B(规范性附录)拍照例图.8
9、 附录c(规范性附录)鱼体各器官对应的英文缩写. I 目IJ昌本标准按GB!T1. 1-2009给出的规则起草。本标准白山东省海洋局提出并组织实施。本标准由山东省海洋标准化技术委员会归口o本标准负责起草单位:青岛华大基因研究院。本标准主要起草人:张梦琪、刘姗姗、王萌萌、苏小珊、孟亮。DB37/T 4093-2020 II DB37/T 4093-2020 用于核酸提取的鱼类样本野外采集、处理及保存技术规范1 范围本标准规定了用于核酸提取的鱼类样本野外采集、处理及保存的技术规范及其相关要求。本标准适用于在野外获取分子生物学、基因组学相关研究的鱼类样本。2 规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是
10、必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。HJ 628 生物遗传资源采集技术规范3 术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3. 1 野外nature environment 泛指市场、码头、养殖场、海水以及淡水水域等非实验室环境。3. 2 用于核酸提取的鱼类样本fish sample for nucleic acid 在鱼体上采集到的、可进行高质量核酸提取并应用于分子生物学、基因组学相关研究的组织和器官。3. 3 伤害性取样destructive samp i ing 将鱼体进行有效麻醉或低温休克,通过解
11、剖来获得新鲜鱼类组织、器官等样本的取样方法。3.4 轻微伤害性取样non-destructive sampl ing 将鱼体进行有效麻醉或低温休克,通过来集血液、鳝条等组织,保证鱼体存活并对其生理机能和生命不产生重大影响的取样方法。3.5 尾静脉ta i I ve i n 尾静脉是指紧贴于鱼体尾椎骨下方的静脉血管。4缩略i吾下列缩略i吾适用于本文件。DNA:脱氧核糖核酸CDeoxyribonucleicAcid) RNA:核糖核酸CRibonucleicAcid) DB37/T 4093-2020 MS-222:间氨基苯甲酸乙醋甲E黄酸盐C3-Aminobenzoicacid ethyl es
12、ter methanesulfonate) 5 样本采集前准备5. 1 采集方案设计采集鱼类之前应制定完整的采集方案,了解野外采集区域鱼类的分布,根据当地自然情况制定采集路线,避免无目的的采集活动破坏鱼类的自然栖息地。5.2 稀有或珍惜物种的采集若需采集的鱼类属于稀有或珍惜物种,应当按照相关法律法规的要求,向相关主管部门提出申请,获得批准后方可实施采集。5.3 采集工具和材料5.3.1 样本处理器材医用剪刀、解剖刀、摄子、解剖盘、乳胶于套、医用口罩、毛巾、酒精棉球、j去存管、冻存管盒、封口袋、封口膜、注射器、巴民吸管、液氮罐。器材应进行洗净并消毒,确保无核酸酶污染。5.3.2 处理和保存试剂0
13、.65 %生理盐水(淡水鱼用)、1.2%生理盐水(海水鱼用)、75%乙醇、无水乙醇、抗i疑剂、MS-222、无RNA酶水、RNA保存液。5.3.3 记录工具抗冻标签纸、拍照背号恨、比色卡、标尺(量程20cm、分度值O.1 cm)、蓄电电子秤、高清相机、记号笔、铅笔等。5.3.4 运输耗材泡沫箱、棉花、冰袋、干冰。6 鱼类获取6. 1 获取方法在市场、码头、养殖场、自然水域等地,通过购买、垂钓、捕捞等方法获取。6. 2 鱼类信息记录现场获取到新鲜活体鱼类后,填写野外鱼类采集信息表),详见附录Ao6. 3 拍照规范2 DB37/T 4093-2020 选取干净的白色平板作为背景板,同批鱼类尽量保证
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