阿尔兹海默症患者外周血miR-19b-3p和PTEN的表达及临床意义.pdf
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1、基金项目:新疆维吾尔自治区自然科学基金项目(2 0 1 9 D 0 1 C 2 8 8)作者简介:哈尼克孜阿不都热依木(1 9 7 9-),女,护师,研究方向:健康管理与老年病。通信作者:阿力木江亚森,男,主任医师,研究方向:重症与老年病,E-m a i l:l a n g a r q q.c o m。本文引用:哈尼克孜阿不都热依木,王 燕,努尔比亚米尔扎木,等.阿尔兹海默症患者外周血m i R-1 9 b-3 p和P T E N的表达及临床意义J.新疆医科大学学报,2 0 2 3,4 6(1 1):1 4 6 3-1 4 6 8,1 4 7 3.d o i:1 0.3 9 6 9/j.i s
2、 s n.1 0 0 9-5 5 5 1.2 0 2 3.1 1.0 0 9阿尔兹海默症患者外周血m i R-1 9 b-3 p和P T E N的表达及临床意义哈尼克孜阿不都热依木1,王 燕1,努尔比亚米尔扎木1,阿力木江亚森2(1新疆医科大学第一附属医院健康管理中心,乌鲁木齐 8 3 0 0 5 4;2新疆维吾尔自治区第四人民医院重症医学科,乌鲁木齐 8 3 0 0 0 0)摘要:目的 探究阿尔兹海默症(A l z h e i m e r s d i s e a s e,A D)患者外周血微小R NA-1 9 b-3 p(m i R-1 9 b-3 p)和磷酸酶及张力蛋白同源物(P h o
3、s p h a t e a n d t e n s i o n h o m o l o g y d e l e t e d o n c h r o m-s o m e t e n,P T E N)的表达及临床意义。方法 选取2 0 2 0年2月-2 0 2 3年2月新疆医科大学第一附属医院健康管理中心和新疆维吾尔自治区第四人民医院重症医学科收治的9 7例A D患者纳入A D组,选取同期6 3例体检健康老年人纳入对照组,检测并比较对照组与A D组血清m i R-1 9 b-3 p和P T E N mR NA表达水平。根据A D患者不同病情程度分为轻度组和中重度组,采用L o g i s t i
4、c回归分析A D病情严重程度的影响因素。采用S p e a r m a n相关性分析血清m i R-1 9 b-3 p、P T E N mR-NA水平与A D病情严重程度的相关性。采用RO C曲线分析血清m i R-1 9 b-3 p、P T E N mR NA水平对A D病情严重程度的预测价值。结果 与对照组比较,A D组血清m i R-1 9 b-3 p、P T E N mR-NA表达水平均降低,差异有统计学意义(P0.0 5)。9 7例A D患者中5 9例轻症,2 5例中症及1 3例重症。与轻度组比较,中、重度组组血清m i R-1 9 b-3 p、P T E N mR NA表达水平均降
5、低,差异有统计学意义(P0.0 5)。L o g i s t i c回归分析结果显示,血清m i R-1 9 b-3 p、P T E N mR NA低水平是影响A D病情严重程度的独立危险因素(P0.0 5)。S p e a r m a n相关性分析结果显示,血清m i R-1 9 b-3 p、P T E N mR NA水平与A D严重程度均呈负相关(r=-0.6 1 0,P0.0 5;r=-0.8 7 0,P0.0 5)。RO C分析结果显示,血清m i R-1 9 b-3 p、P T E N mR NA水平及二者联合评估A D病情严重程度的A U C值(9 5%C I)分别为0.7 5 7
6、(0.6 6 00.8 3 9)、0.7 1 8(0.6 1 70.8 0 4)、0.8 6 1(0.7 7 60.9 2 3),二者联合预测效能高于各项单独检测(Z=2.0 8 8、2.6 1 8,P0.0 5)。结论 A D患者血清m i R-1 9 b-3 p、P T E N水平异常降低,与A D病情严重程度呈负相关,m i R-1 9 b-3 p联合P T E N mR NA检查对于评估A D病情严重程度具有较高价值。关键词:阿尔兹海默症;微小R NA-1 9 b-3 p;磷酸酶及张力蛋白同源物中图分类号:R 7 4 9.1+6 文献标识码:A 文章编号:1 0 0 9-5 5 5 1
7、(2 0 2 3)1 1-1 4 6 3-0 7d o i:1 0.3 9 6 9/j.i s s n.1 0 0 9-5 5 5 1.2 0 2 3.1 1.0 0 9E x p r e s s i o n a n d c l i n i c a l s i g n i f i c a n c e o f m i R-1 9 b-3 p a n d P T E N i n p e r i p h e r a l b l o o d o f p a t i e n t s w i t h A l z h e i m e r s d i s e a s eH a n i k e z i A b
8、u d u r e y i m u1,WA N G Y a n1,N u e r b i y a M i e r z h a m u1,A l i m u j i a n g Y a s e n2(1C e n t e r o f H e a l t h M a n a g e m e n t,T h e F i r s t A f f i l i a t e d H o s p i t a l o f X i n j i a n g M e d i c a l U n i v e r s i t y,U r u m q i 8 3 0 0 5 4,C h i n a;2D e p a r t
9、 m e n t o f C r i t i c a l C a r e M e d i c i n e,T h e F o u r t h P e o p l e s H o s p i t a l o f X i n j i a n g U y g u r A u t o n o m o u s R e g i o n,U r u m q i 8 3 0 0 0 0,C h i n a)A b s t r a c t:O b j e c t i v e T o e x p l o r e t h e e x p r e s s i o n a n d c l i n i c a l s i
10、 g n i f i c a n c e o f m i c r o r n A-1 9 B-3 P(m i R-1 9 b-3 p)a n d p h o s p h a t a s e a n d t e n s i n h o m o l o g y(P T E N)i n p e r i p h e r a l b l o o d o f t h e p a t i e n t s w i t h A l z h e i m e r s d i s e a s e 第4 6卷 第1 1期新 疆 医 科 大 学 学 报V o l.4 6 N o.1 1 2 0 2 3年1 1月J o u
11、 r n a l o f X i n j i a n g M e d i c a l U n i v e r s i t yN o v.2 0 2 3 (A D).M e t h o d s 9 7 A D p a t i e n t s a d m i t t e d t o t h e H e a l t h M a n a g e m e n t C e n t e r o f t h e h o s p i t a l f r o m F e b r u a r y 2 0 2 0 t o F e b r u a r y 2 0 2 3 w e r e i n c l u d e d
12、i n t h e A D g r o u p.A t o t a l o f 6 3 h e a l t h y e l d e r l y p a t i e n t s w e r e i n c l u d e d i n t h e c o n t r o l g r o u p.T h e mR NA e x p r e s s i o n l e v e l s o f s e r u m m i R-1 9 b-3 p a n d P T E N i n t h e c o n t r o l g r o u p a n d A D g r o u p w e r e d e
13、t e c t e d a n d c o m p a r e d.T h e p a t i e n t s w i t h A D w e r e d i v i d e d i n t o m i l d g r o u p a n d m o d e r-a t e a n d s e v e r e g r o u p a c c o r d i n g t o t h e s e v e r i t y o f t h e d i s e a s e,a n d t h e i n f l u e n c i n g f a c t o r s o f t h e s e v e
14、r i t y o f A D w e r e a n a l y z e d b y L o g i s t i c r e g r e s s i o n.S p e a r m a n c o r r e l a t i o n w a s u s e d t o a n a l y z e t h e c o r r e l a t i o n b e-t w e e n t h e l e v e l s o f m i R-1 9 b-3 p a n d P T E N mR NA a n d t h e s e v e r i t y o f A D.R O C c u r v
15、e w a s u s e d t o a n a l y z e t h e p r e d i c t i v e v a l u e o f m i R-1 9 b-3 p a n d P T E N mR NA l e v e l s o n t h e s e v e r i t y o f A D.R e s u l t s C o m p a r e d w i t h c o n t r o l g r o u p,s e r u m m i R-1 9 b-3 p a n d P T E N mR NA e x p r e s s i o n l e v e l s i n
16、A D g r o u p w e r e d e c r e a s e d,a n d t h e d i f f e r e n c e w a s s t a t i s t i c a l l y s i g n i f i c a n t(P0.0 5).Am o n g 9 7 c a s e s o f A D,5 9 c a s e s w e r e m i l d,2 5 c a s e s w e r e m o d e r a t e,a n d 1 3 c a s e s w e r e s e v e r e.C o m p a r e d w i t h m i
17、 l d g r o u p,t h e mR NA e x p r e s s i o n l e v e l s o f m i R-1 9 b-3 p a n d P T E N i n m o d e r a t e a n d s e v e r e g r o u p s w e r e d e c r e a s e d,a n d t h e d i f f e r e n c e w a s s t a t i s t i c a l-l y s i g n i f i c a n t(P0.0 5).L o g i s t i c r e g r e s s i o n a
18、 n a l y s i s s h o w e d t h a t l o w l e v e l s o f m i R-1 9 b-3 p,a n d P T E N mR NA w e r e i n d e p e n d e n t r i s k f a c t o r s f o r t h e s e v e r i t y o f A D(P0.0 5).B y S p e a r m a n c o r r e l a t i o n a n a l y-s i s,m i R-1 9 b-3 p a n d P T E N mR NA l e v e l s i n A
19、 D p a t i e n t s w e r e n e g a t i v e l y c o r r e l a t e d w i t h A D s e v e r i t y(r=-0.6 1 0,P0.0 5,r=-0.8 7 0,P0.0 5).RO C a n a l y s i s r e s u l t s s h o w e d t h a t t h e AU C v a l u e s(9 5%C I)o f m i R-1 9 b-3 p a n d P T E N mR NA a n d t h e i r c o m b i n a t i o n i n
20、e v a l u a t i n g t h e s e v e r i t y o f A D w e r e 0.7 5 7(0.6 6 00.8 3 9),0.7 1 8(0.6 1 70.8 0 4)a n d 0.8 6 1(0.7 7 60.9 2 3),r e s p e c t i v e l y.T h e p r e d i c t i o n e f f i c i e n c y o f t h e c o m b i n e d t e s t w a s h i g h e r t h a n t h a t o f e a c h s i n g l e t e
21、 s t(Z=2.0 8 8,2.6 1 8,P0.0 5)。A D组纳入标准:(1)参照 中国痴呆与认知障碍诊治指南8,患者均确诊为A D;(2)患者年龄6 0岁;(3)患者饮食正常;(4)简易精神状态(MM S E)评分1 3分;(5)患者均于本院进行治疗;(6)患者或其家属签署知情同意书。排除标准:(1)患有精神类疾病者;(2)合并其他脑部疾病;(3)近期接受认知功能训练者;(4)患有心、肺、肾功能障碍者;(5)患有恶性肿瘤者。本研究经新疆医科大学第一附属医院、新疆维吾尔自治区第四人民医院医学伦理委员会批准。1.2 方法1.2.1 血清m i R-1 9 b-3 p、P T E N mR
22、 NA水平的检测 采集对照组与A D组患者入院时的外周血液样本4 m L,3 0 0 0 r/m i n离心1 5 m i n,取上层血清加入T r i z o l采用m i R试剂盒提取血清总R NA,采用分光光度法检测R NA浓度,根据P C R试剂盒说明书配置反应体系(上下游引物各1 L,缓冲液5 L,c D NA 2 L,S Y B R 1 0 L,纯水加至2 0 L),以总R NA为模板,按照逆转录试剂盒说明书得到c D-NA,再以c D NA为模板,参考荧光定量P C R试剂盒说明书进行扩增,反应步骤设置为:9 5 3 0 s,9 5 5 s,5 6 2 0 s和 7 2 3 0
23、s,扩增4 0个循环。使用2-C T法计算m i R-1 9 b-3 p、P T E N mR NA 水平,以U 6和-a c t i n为内参,引物序列见表1。表1 引物序列基因引物序列引物长度m i R-1 9 b-3 pF o r w a r d:5 -T A A T A G T A C C G A T C T G A C T A C-3 2 1 b pR e v e r s e:5 -G T A T C A T A G C C G A A C A A G T A C-3 P T E N m R N AF o r w a r d:5 -A T G G C G T T C G G C C
24、T T A C A G-3 1 9 b pR e v e r s e:5 -A C C A C T A C A T G C G C T C G C A T-3 1.2.2 病情程度评估及分组 根据患者入院时的具体情况,综合总体退化量表(G D S)、日常生活能力量表(A D L)及临床痴呆评定量表(C D R)评估A D患者入院时的病情程度1 0,轻度:患者记忆力受到影响,但生活能够自理;中度:较为严重的记忆障碍,部分患者伴随括约肌障碍,生活自理能力受到一定影响,需要他人的照顾;重度:智力损伤严重,出现明显的括约肌障碍,失去生活自理能力,完全依赖于他人的照顾。轻度A D患者纳入轻度组,中度及重
25、度A D患者纳入中重度组。1.3 统计学处理 采用S P S S 2 0.0统计学软件进行数据分析,计数资料以例(%)表示,采用2检验;计量资料以均数标准差(x-s)表示,采用t检验。采用S p e a r m a n分析血清m i R-1 9 b-3 p、P T E N mR NA水 平 与A D严 重 程 度 的 相 关 性。采 用L o g i s t i c回归分析影响A D病情严重程度的因素;参考受试者工作特征(RO C)曲线及曲线下面积(A U C)评 估m i R-1 9 b-3 p、P T E N mR NA水 平 对A D病情严重程度的预测价值。以P0.0 5为差异有统计学意
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