罗汉果总黄酮对慢性睡眠剥夺小鼠抗氧化能力及炎症反应的影响.pdf
《罗汉果总黄酮对慢性睡眠剥夺小鼠抗氧化能力及炎症反应的影响.pdf》由会员分享,可在线阅读,更多相关《罗汉果总黄酮对慢性睡眠剥夺小鼠抗氧化能力及炎症反应的影响.pdf(10页珍藏版)》请在咨信网上搜索。
1、动物营养学报,():罗汉果总黄酮对慢性睡眠剥夺小鼠抗氧化能力及炎症反应的影响李浩雨 徐兴军,李雪涵 张伟伟,邵淑丽,(齐齐哈尔大学生命科学与农林学院,齐齐哈尔;抗性基因工程与寒地生物多样性保护黑龙江省重点实验室,齐齐哈尔)摘 要:本试验旨在探究罗汉果总黄酮对慢性睡眠剥夺()小鼠抗氧化能力及炎症反应的影响。将 只 周龄无特定病原体()级雄性 小鼠按体质量随机分为 组,每组 只,组间体质量差异不显著()。空白对照组不进行慢性睡眠剥夺,其他 组使用改良多水平台睡眠剥夺法进行为期 的慢性睡眠剥夺,以构建 模型。造模成功后灌胃 周,其中低、中、高浓度罗汉果总黄酮组(分别简称低、中、高酮组)分别灌胃、()
2、的罗汉果总黄酮(溶于 的 溶液),空白对照组与模型对照组灌胃 的生理盐水,阳性对照组灌胃 ()的褪黑素(溶于 的 溶液),二甲基亚砜()对照组灌胃 的 溶液。利用相应试剂盒测定 小鼠血清和大脑中总抗氧化能力()、丙二醛()含量、血红素氧合酶()活性、核因子()和肿瘤坏死因子()含量,利用实时荧光定量 测定血清和大脑中核因子 相关因子()、相对表达量。结果显示:)低、中、高酮组 小鼠大脑中 显著高于模型对照组(),中、高酮组 小鼠大脑中 活性显著高于模型对照组和 对照组()。低、中、高酮组 小鼠血清中、活性显著高于模型对照组和 对照组(),大脑和血清中、含量显著低于模型对照组和 对照组()。)低
3、、中、高酮组 小鼠大脑和血清中 相对表达量显著高于模型对照组及 对照组();中、高酮组 小鼠大脑和血清中 相对表达量显著高于模型对照组及 对照组();低、中、高酮组 小鼠大脑和血清中、相对表达量显著低于模型对照组及 对照组()。综上所述,罗汉果总黄酮可提高 小鼠大脑、血清中抗氧化酶活性及相关基因 相对表达量,降低大脑、血清中 与炎症因子含量及相关基因 相对表达量,改善 小鼠的氧化应激及炎症反应。关键词:罗汉果总黄酮;慢性睡眠剥夺;抗氧化;炎症因子中图分类号:文献标识码:文章编号:()收稿日期:基金项目:黑龙江省省属本科高校基本科研业务费面上项目()作者简介:李浩雨(),女,黑龙江齐齐哈尔人,硕
4、士研究生,从事动物生理生态学研究。:通信作者:徐兴军,教授,硕士生导师,:人约有 的时间是在睡眠中度过的,在睡眠期间,身体的生理功能会发生许多变化,如细胞修复、激素分泌及免疫防御功能调节等,因此,保持充足的睡眠至关重要。而在现代社会,由于压力、睡前使用电子设备等因素导致褪黑激素分泌的变化,从而导致睡眠不足,即睡眠剥夺。睡 期李浩雨等:罗汉果总黄酮对慢性睡眠剥夺小鼠抗氧化能力及炎症反应的影响眠剥夺分为短期的急性睡眠剥夺(,)和 长 期 的 慢 性 睡 眠 剥 夺(,),急性睡眠剥夺一般持续几小时至几十小时不等,而慢性睡眠剥夺则是指持续数天乃至数个月的连续剥夺。慢性睡眠剥夺会导致氧化应激损伤以及一
5、系列炎症反应的产生,最终引发各种疾病。等研究表明,慢性睡眠剥夺会使小胶质细胞处于持续激活的状态,促进其吞噬活动,可能使大脑受到进一步伤害。等研究表明,慢性睡眠剥夺激活神经胶质细胞,促进促炎细胞因子释放,抑制抗炎细胞因子释放。张晓宁研究表明,慢性睡眠剥夺可诱导小鼠体内氧化应激反应产生,最终导致慢性炎症。以上研究表明,慢性睡眠剥夺严重影响动物生命健康。目前治疗睡眠障碍及缓解其损伤的常用药物为褪黑素,但褪黑素是一种内源性激素,虽可调节生物昼夜节律、保障睡眠,但长期使用的安全性并不明确,因此寻找安全有效的药物缓解或治疗慢性睡眠剥夺带来的损伤十分重要。总 抗 氧 化 能 力(,)是人体内各种抗氧化物质和
6、抗氧化酶等共同构成的总的抗氧化水平,通常用来评价生物活性物质的抗氧化能力,可一定程度上反映机体清除活性氧(,)的能力。积累过多会诱导脂质过氧化的产生,是脂质过氧化的终产物,可作为反映脂质过氧化程度的指标。核因子 相关因子(,)被视为氧化应激反应的内源性主要调节因子,可协调下游抗氧化因子和相解毒酶的表达来对抗环境伤害和内源性应激源,以适应不同应激条件。血红素氧合酶(,)是一种重要的内源性抗氧化剂,可以在 的调控下通过清除羟自由基、超氧阴离子或单线态氧来抑制脂质或蛋白质的过氧化反应,发挥其抗氧化作用。核因子(,)是一种多功能核转录因子,诱导细胞促炎因子如肿瘤坏死因子(,)等及一氧化氮合酶(,)、环
7、氧合酶(,)等的表达,导致炎症反应和细胞损伤的产生。可通过多种机制负性调控 信号通路,如 诱导细胞活性增加降低细胞内 水平来抑制氧化应激介导的 激活。以上研究表明,及其所调控的下游抗氧化因子在机体对抗氧化应激损伤及炎症反应产生的过程中发挥关键作用,同时 可受到节律基因和 的双向调节,使生物节律发生改变,进而影响睡眠。因此,保证氧化还原系统内稳态对维持生物昼夜节律稳定及睡眠具有重要作用。罗汉果()为葫芦科多年生藤本植物,主要产于我国广西壮族自治区,其果实是一种重要的药食两用材料,含多种营养元素及活性成分。邵佩等研究表明,罗汉果中提取的黄酮类物质具有良好的体外抗氧化作用。陈功等研究表明,罗汉果黄酮
8、增加运动大鼠供血能力,并提高氧运输能力。但应用罗汉果黄酮治疗慢性睡眠剥夺造成的氧化损伤及炎症反应的研究尚未见报道。因此,本试验使用不同浓度的罗汉果总黄酮对慢性睡眠剥夺小鼠进行灌胃,从基因及酶学等水平上探究罗汉果总黄酮能否通过调控慢性睡眠剥夺小鼠血清及大脑中、等抗氧化因子与、等炎症因子及其相关基因的表达,缓解慢性睡眠剥夺对机体造成的氧化应激损伤及炎症反应。材料与方法 试验材料 试验材料:罗汉果总黄酮(纯度为),购自成都某生物科技有限公司。试验动物:以购自长春市亿斯实验动物技术有限责任公司的 只 周龄无特定病原体()级雄性 小鼠为研究对象,体质量()。仪器设备:酶标仪(帝肯上海贸易有限公司)、恒温
9、干燥箱(天津市南郊区东泥沽铁工厂)、()超低温冰箱(北京天地精仪科技有限公司)、旋涡混合器(德国 公司)、电子天平(德国赛多利斯股份公司)、大功率磁力加热搅拌器(江苏省金坛市荣华仪器制造有限公司)、实时荧光定量 仪(美国应用生物系统公司)、高速台式冷冻离心机(湖南湘仪实验室仪器开发有限公司)、数显恒温水浴锅(上海三发科学仪器有限公司)、离心机(上海安亭科学仪器厂)、可见分光光度计(上海精密科学仪器有限公司)。主要试剂:蛋白定量试剂盒、检动 物 营 养 学 报 卷测试剂盒、检测试剂盒、酶联免疫吸附测定()检测试剂盒、小鼠 检测试剂盒、小鼠 检测试剂盒、总 提取试剂盒、反转录试剂盒,以上试剂盒均购
10、自百杰斯生物公司。试验设计 将适应性饲养 周后的 只 级 周龄雄性 小鼠按体质量随机分为 组,分别为空白对照组、模型对照组、二甲基亚砜()对照组、阳性对照组以及低、中和高浓度罗汉果总黄酮组(分别简称为低、中和高酮组),每组 只,各组间体质量差异不显著()。空白对照组不进行慢性睡眠剥夺,其他 组利用改良多水平台睡眠剥夺法对小鼠进行为期 的慢性睡眠剥夺以构建慢性睡眠剥夺模型,每日 (:至次日:)。慢性睡眠剥夺 后,各组每天定时灌胃,低、中、高酮组分别灌胃、()的罗汉果总黄酮(溶于 溶液),空白对照组及模型对照组灌胃 的生理盐水,阳性对照组灌胃 ()的褪黑素(溶于 溶液),对照组灌胃 的 溶液,各组
11、小鼠自由饮食和饮水,室温下连续灌胃 周。样品制备和检测指标 慢性睡眠剥夺小鼠大脑和血清样品制备 末次灌胃后禁食 ,采用摘除眼球法取血后将小鼠用断颈法处死,于冰上解剖后取出大脑。血液经离心处理后制备成血清,大脑用预冷过的生理盐水冲洗后滤纸吸干,置于 冰箱备用。慢性睡眠剥夺小鼠大脑和血清中抗氧化指标及炎症因子含量的测定采用试剂盒法 检 测 大 脑、血 清 中、活性以及、含量。慢性睡眠剥夺小鼠大脑和血清中抗氧化酶及炎症因子相关基因表达的测定 采用相关试剂盒提取大脑和血清中总,利用反转录试剂盒将总 反转录成。以 为模板,采用实时荧光定量 法检测目的基因 的 相 对 表 达 量。反 应 体 系 为,包
12、括 ,引物,。反应条件:预变性 ,变性 ,退火,延伸 ,循环 次。以甘油醛磷酸脱氢酶()作内参基因,采用 法计算相关目的基因的 相对表达量。引物均由上海生物工程有限公司设计并合成,引物信息见表。表 引物信息 基因 引物序列 ()血红素氧合酶:核因子 相关因子:核因子:肿瘤坏死因子:甘油醛磷酸脱氢酶:数据统计与分析 采用 及 软件进行作图及统计学分析。试验结果进行单因素方差分析,采用 法进行组间多重比较,以平均值标准差()表示。表示差异显著,表示差异不显著。结果与分析 罗汉果总黄酮对慢性睡眠剥夺小鼠大脑中、活 性 及、含量的影响 由表 可知,低、中、高酮组大脑中 显著低于空白对照组(),显著高于
- 配套讲稿:
如PPT文件的首页显示word图标,表示该PPT已包含配套word讲稿。双击word图标可打开word文档。
- 特殊限制:
部分文档作品中含有的国旗、国徽等图片,仅作为作品整体效果示例展示,禁止商用。设计者仅对作品中独创性部分享有著作权。
- 关 键 词:
- 罗汉果 黄酮 慢性 睡眠 剥夺 小鼠 氧化 能力 炎症 反应 影响
1、咨信平台为文档C2C交易模式,即用户上传的文档直接被用户下载,收益归上传人(含作者)所有;本站仅是提供信息存储空间和展示预览,仅对用户上传内容的表现方式做保护处理,对上载内容不做任何修改或编辑。所展示的作品文档包括内容和图片全部来源于网络用户和作者上传投稿,我们不确定上传用户享有完全著作权,根据《信息网络传播权保护条例》,如果侵犯了您的版权、权益或隐私,请联系我们,核实后会尽快下架及时删除,并可随时和客服了解处理情况,尊重保护知识产权我们共同努力。
2、文档的总页数、文档格式和文档大小以系统显示为准(内容中显示的页数不一定正确),网站客服只以系统显示的页数、文件格式、文档大小作为仲裁依据,平台无法对文档的真实性、完整性、权威性、准确性、专业性及其观点立场做任何保证或承诺,下载前须认真查看,确认无误后再购买,务必慎重购买;若有违法违纪将进行移交司法处理,若涉侵权平台将进行基本处罚并下架。
3、本站所有内容均由用户上传,付费前请自行鉴别,如您付费,意味着您已接受本站规则且自行承担风险,本站不进行额外附加服务,虚拟产品一经售出概不退款(未进行购买下载可退充值款),文档一经付费(服务费)、不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。
4、如你看到网页展示的文档有www.zixin.com.cn水印,是因预览和防盗链等技术需要对页面进行转换压缩成图而已,我们并不对上传的文档进行任何编辑或修改,文档下载后都不会有水印标识(原文档上传前个别存留的除外),下载后原文更清晰;试题试卷类文档,如果标题没有明确说明有答案则都视为没有答案,请知晓;PPT和DOC文档可被视为“模板”,允许上传人保留章节、目录结构的情况下删减部份的内容;PDF文档不管是原文档转换或图片扫描而得,本站不作要求视为允许,下载前自行私信或留言给上传者【自信****多点】。
5、本文档所展示的图片、画像、字体、音乐的版权可能需版权方额外授权,请谨慎使用;网站提供的党政主题相关内容(国旗、国徽、党徽--等)目的在于配合国家政策宣传,仅限个人学习分享使用,禁止用于任何广告和商用目的。
6、文档遇到问题,请及时私信或留言给本站上传会员【自信****多点】,需本站解决可联系【 微信客服】、【 QQ客服】,若有其他问题请点击或扫码反馈【 服务填表】;文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“【 版权申诉】”(推荐),意见反馈和侵权处理邮箱:1219186828@qq.com;也可以拔打客服电话:4008-655-100;投诉/维权电话:4009-655-100。