多脂鳞伞P-YD01的菌丝生物学特性及引种驯化栽培试验.pdf
《多脂鳞伞P-YD01的菌丝生物学特性及引种驯化栽培试验.pdf》由会员分享,可在线阅读,更多相关《多脂鳞伞P-YD01的菌丝生物学特性及引种驯化栽培试验.pdf(7页珍藏版)》请在咨信网上搜索。
1、山东农业大学学报(自然科学版),2023,54(5):650-656VOL.54 NO.5 2023Journal of ShandongAgricultural University(Natural Science Edition)doi:10.3969/j.issn.1000-2324.2023.05.002多脂鳞伞多脂鳞伞 P-YD01 的菌丝生物学特性及引种驯化栽培试验的菌丝生物学特性及引种驯化栽培试验吴耀越,程欣荣,黄宇柯,朱仁启,陈文思,张大川,初 洋*烟台大学生命科学学院,山东 烟台 264005摘摘 要要:对采自烟台大学校园的一株多脂鳞伞(P-YD01)进行了形态学及 ITS
2、序列分析鉴定,并对其菌丝生物学特性、最佳培养基配方及驯化栽培进行等进行了研究。结果表明,P-YD01 的最适碳源、氮源分别为 D-果糖、牛肉膏,最佳培养温度为 25-30,最适生长 pH 在 5.0。研究发现 P-YD01 以玉米粉作为母种培养基时生长最快,最适出菇季节应为秋冬季,最适栽培培养基为棉籽壳培养基。搔菌操作可以明显提高多脂鳞伞其出原基整齐度和子实体匀称度。关键词关键词:多脂鳞伞;菌丝生物学特性;培养基;驯化;栽培中图法分类号中图法分类号:S736.15文献标识码文献标识码:A文章编号文章编号:1000-2324(2023)05-0650-07Mycelial Biological
3、Characteristics and Domestication,CultivationExperiment of Pholiota adiposaP-YD01WU Yao-yue,CHENG Xin-rong,HUANG Yu-ke,ZHU Ren-qi,CHEN Wen-si,ZHANG Da-chun,CHU Yang*College of Life Sciences/Yantai University,Yantai 264005,ChinaAbstract:A strain of Pholiota adiposa(P-YD01)taken from the campus of Yan
4、tai University was analyzed and identified bymorphological identification and ITS sequence analysis,and its mycelial biological characteristics,optimal mediumformulation and domestication and cultivation were studied.The results show that the optimal carbon and nitrogen sources ofP-YD01 are D-fructo
5、se and beef extract,and the optimal culture temperature is 25C-30C,and the optimal growth pH is at5.0.It is found that P-YD01 grows fastest in cornmeal primary medium,the optimal mushroom season should be fall,and theoptimal cultivation medium is cottonseed shell medium.In addition,scratching myceli
6、um operation for Pholiota adiposa cansignificantly improve its primodium emergence neatness and fruiting body homogeneity.Keywords:Pholiota adiposa;mycelial biological characteristic;culture medium;domestication;cultivation大型真菌,又称蕈菌,在自然界中种类繁多,分布广泛,且具有丰富营养1,2。同时,许多野生大型真菌具有药用价值,可用于治疗疾病和提高免疫力3。野生菌的采摘、加
7、工和销售都是一种重要的产业,可创造就业机会和增加经济收入4.多脂鳞伞是鳞伞属(Pholiota)的一种大型真菌,具有丰富的营养,是一种高蛋白低脂肪的健康食品5。此外,多脂鳞伞还有较高的药用价值。Peng Deng 等在其胞内多糖的体外抗氧化实验中,发现多脂鳞伞胞内多糖是一种有潜力的可增强特异性免疫的抗氧化剂6;贺智杰等同样发现多脂鳞伞具有良好的抗氧化活性和对小鼠免疫的调节功能7;Basaran Dulger 探究了多脂鳞伞提取物的抗菌活性,实验发现其 60%甲醇提取物对包括大肠杆菌(Escherichia coli)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)在内的六种细菌以及两种酵母
8、具有抑制作用8;多脂鳞伞的多糖成分和麦角固醇类衍生物被证实具有抗糖尿病活性9,10;另外,其多糖亦对小鼠 H22 肝癌细胞具有抑制作用11。提取自多脂鳞伞的多种酶类,亦在生产上可发挥重要作用12,13。关于多脂鳞伞的栽培研究,国内最早可检索到杨占国等和苗长海在 1985 年进行的试验14,15。总体来看,相关研究较少且大多集中在较为基础的菌丝生物学特性方面16-18,但关于具体栽培技术研究较少且不够深入。本文在研究了菌丝生物特性的基础上,进一步探究其具体栽培技术,并将菌丝生物学研究的成果与栽培技术相融合。旨在探明完整且较优的多脂鳞伞栽培体系,一定程度上填补了相关栽培技术的空白。收稿日期收稿日期
9、:2023-07-17修回日期修回日期:2023-11-11基金项目基金项目:烟台大学大学生创新实践训练计划(X202211066081)第第 1 作者简介作者简介:吴耀越(2001-),男,本科生在读,研究方向为食用菌栽培.E-mail:L*通讯作者通讯作者:Author for correspondence.E-mail:第 5 期吴耀越等:多脂鳞伞 P-YD01 的菌丝生物学特性及引种驯化栽培试验6511材料与方法材料与方法1.1供试菌株供试菌株野生多脂鳞伞采自于烟台大学校园中的一棵柳树上。组织分离后保存菌种,编号为 P-YD01。1.2实验用培养基实验用培养基1.2.1 基础培养基 基
10、础培养基配方:葡萄糖 20 g,蛋白胨 3 g,琼脂 20 g,KH2PO40.5 g,MgSO47H2O1 g,K2HPO43H2O 1 g,水 1000 mL。1.2.2 母种实验培养基 土豆培养基:马铃薯 200 g;土豆综合培养基:马铃薯 200 g,硫酸镁 0.5g,磷酸二氢钾 1.5 g;玉米粉培养基:玉米粉 40 g,氮源 1 g,硫酸镁 0.5 g,磷酸二氢钾 1.5 g。棉籽壳培养基:棉籽壳 100 g,麦麸 10 g,硫酸镁 0.5 g,磷酸二氢钾 1.5 g。以上各配方均加入最适碳源 20 g,琼脂 20 g,水 1000 mL19。1.2.3 栽培培养基 a.棉籽壳培养
11、基:78%棉籽壳;b.杂木屑棉籽壳培养基:39%杂木屑、39%棉籽壳;c.柳木屑培养基:78%柳木屑。以上各配方均添加 20%麦麸,1%蔗糖,1%石膏。1.3形态学鉴定形态学鉴定参照中国大型真菌描述20,通过观察 P-YD01 的子实体形态、孢子印、菌丝及孢子的形态、菌丝间的锁状联合和分生孢子等显微结构。根据这些特征,进行了初步的形态学鉴定。1.4分子标分子标记记鉴定鉴定使用CTAB法提取DNA后用引物ITS1(5TCCGTAGGTGAACCTGCGG3),ITS4(5TCCTCCGCTTATTGATATGC3)对其中 ITS 序列进行 PCR 扩增,PCR 反应体系:DNA 模板 2 L,d
12、dH2O 10.44 L,10PCR buffer 2L,dNTP(10 mmol/L)0.1 L,MgCl21.2 L,ITS1(2 mol/L)与 ITS4(2 mol/L)各 2 L,TaqE 0.26 L。PCR 反应程序:94 预变性 5 min,开始循环,94 变性 50 s,50 退火 45 s,72 复性 50 s,30个循环,72 延伸 10 min。经电泳检验后,将扩增后的产物送至华大基因测序部进行克隆测序,将测序结果与 NCBI 网站基因库中的有关 ITS 片段进行比对,分析确定野生真菌的种类。1.5菌丝生物学特性实验菌丝生物学特性实验碳源实验分别以蔗糖、D-果糖、麦芽糖
13、、可溶性淀粉、乳糖替代基础培养基中的葡萄糖(CK);氮源实验分别以酵母浸膏、牛肉膏、硫酸铵、硝酸铵替代基础培养基中的蛋白胨(CK)。温度实验以基础培养基接种后分别于 5、10、15、20、25、30、35 恒温培养箱进行培养。培养基 pH 实验分别以 HCl 和 NaOH 调节基础培养基为 5.0、6.0、7.0、8.0、9.0。每种处理重复 5 次。在培养期间,先后于培养第 2 d 和第 10 d 对接种后平板的菌丝生长情况进行菌丝生长划线,采用十字交叉法测两次划线时的菌丝生长半径差值以计算菌丝生长速度,并观察菌丝长势。1.6母种培养基实验母种培养基实验母种培养基所使用碳源、氮源、培养温度和
14、培养基 pH 皆为 1.5 实验中生长速率最快的处理。每种处理重复 5 次。1.7栽培培养基实验栽培培养基实验按照 1.2.3 中的配方按料水比 1:1.4 进行拌料装袋,每袋折合干料 400 g,灭菌接种等按常规,接种后 25 恒温培养,培养期间先后划线记录菌丝生长情况,测量和记录菌丝生长速度,菌丝满袋后转入菇房出菇管理按常规,本实验统计两潮菇产量。培养期间先后划线记录菌丝生长情况,测量和记录菌丝生长速度及产量。每种处理重复 10 次。1.8出菇季节实验出菇季节实验出菇季节实验选择春季和秋季,培养基为 1.2.3 中提到的培养基 a,菇房采用自然温度,人工控652山东农业大学学报(自然科学版
15、)第 54 卷制湿度在 90%左右,通风等其他管理按常规。其中,春季出菇实验在 3 月中旬接种,4 月中旬开袋,5 下旬及 6 月上旬出菇,出菇时期室内温度在 25 左右;秋季出菇实验 9 月中旬接种,10 月中旬开袋,11 月中旬出菇,出菇时期室内温度在 15 左右。1.9搔菌出菇对照实验搔菌出菇对照实验搔菌出菇实验培养基选取及培养步骤同 1.8。移至菇房后,对照组正常开袋出菇,搔菌组开袋后用镊子刮去老旧菌丝后出菇。2结果与分析结果与分析2.1鉴定结果鉴定结果2.1.1 形态学鉴定 参照中国大型真菌20初步确定 P-YD01 是多脂鳞伞(Pholiota adiposa),属于担子菌门、伞菌
16、纲、伞菌目、球盖菇科、鳞伞属。如图 1 所示,该真菌菌盖和菌柄呈黄色,菌盖呈凸透镜形,表面具粘液和三角形鳞片,平均菌盖直径 6.7 cm;菌柄具鳞片,实心,无菌托,菌柄中生,平均菌柄长 6.1 cm,平均菌柄粗 1.1 cm;菌褶呈褐色,不等长,密度中,延生;菌褶呈辐射状排列,产生孢子量较大,孢子印印迹清晰,孢子锈色,表面光滑椭圆形,平均长度 10 m,平均宽度 5 m。担子呈棒状具四个担子梗,囊状体纺锤形。菌丝具有锁状联合,隔膜清晰。菌丝生长时间长会产生分生孢子。(注:.子实体.孢子印 A.担子体 B.囊状体 C.锁状联合 D.隔膜 E.孢子 F.分生孢子)图图 1 P-YD01 子实体形态
- 配套讲稿:
如PPT文件的首页显示word图标,表示该PPT已包含配套word讲稿。双击word图标可打开word文档。
- 特殊限制:
部分文档作品中含有的国旗、国徽等图片,仅作为作品整体效果示例展示,禁止商用。设计者仅对作品中独创性部分享有著作权。
- 关 键 词:
- 多脂鳞伞 YD01 菌丝 生物学 特性 引种 驯化 栽培 试验
1、咨信平台为文档C2C交易模式,即用户上传的文档直接被用户下载,收益归上传人(含作者)所有;本站仅是提供信息存储空间和展示预览,仅对用户上传内容的表现方式做保护处理,对上载内容不做任何修改或编辑。所展示的作品文档包括内容和图片全部来源于网络用户和作者上传投稿,我们不确定上传用户享有完全著作权,根据《信息网络传播权保护条例》,如果侵犯了您的版权、权益或隐私,请联系我们,核实后会尽快下架及时删除,并可随时和客服了解处理情况,尊重保护知识产权我们共同努力。
2、文档的总页数、文档格式和文档大小以系统显示为准(内容中显示的页数不一定正确),网站客服只以系统显示的页数、文件格式、文档大小作为仲裁依据,平台无法对文档的真实性、完整性、权威性、准确性、专业性及其观点立场做任何保证或承诺,下载前须认真查看,确认无误后再购买,务必慎重购买;若有违法违纪将进行移交司法处理,若涉侵权平台将进行基本处罚并下架。
3、本站所有内容均由用户上传,付费前请自行鉴别,如您付费,意味着您已接受本站规则且自行承担风险,本站不进行额外附加服务,虚拟产品一经售出概不退款(未进行购买下载可退充值款),文档一经付费(服务费)、不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。
4、如你看到网页展示的文档有www.zixin.com.cn水印,是因预览和防盗链等技术需要对页面进行转换压缩成图而已,我们并不对上传的文档进行任何编辑或修改,文档下载后都不会有水印标识(原文档上传前个别存留的除外),下载后原文更清晰;试题试卷类文档,如果标题没有明确说明有答案则都视为没有答案,请知晓;PPT和DOC文档可被视为“模板”,允许上传人保留章节、目录结构的情况下删减部份的内容;PDF文档不管是原文档转换或图片扫描而得,本站不作要求视为允许,下载前自行私信或留言给上传者【自信****多点】。
5、本文档所展示的图片、画像、字体、音乐的版权可能需版权方额外授权,请谨慎使用;网站提供的党政主题相关内容(国旗、国徽、党徽--等)目的在于配合国家政策宣传,仅限个人学习分享使用,禁止用于任何广告和商用目的。
6、文档遇到问题,请及时私信或留言给本站上传会员【自信****多点】,需本站解决可联系【 微信客服】、【 QQ客服】,若有其他问题请点击或扫码反馈【 服务填表】;文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“【 版权申诉】”(推荐),意见反馈和侵权处理邮箱:1219186828@qq.com;也可以拔打客服电话:4008-655-100;投诉/维权电话:4009-655-100。