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SN∕T 4043-2014 蚊类携带丝虫(班氏丝虫、马来丝虫)的PCR检测方法(出入境检验检疫).pdf
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1、书 书 书中华人民共和国出入境检验检疫行业标准犛犖犜 蚊类携带丝虫(班氏丝虫、马来丝虫)的犘犆犚检测方法犘犆犚犿犲 狋 犺 狅 犱 狊犳 狅 狉犱 犲 狋 犲 犮 狋 犻 狀 犵犠狌 犮 犺 犲 狉 犲 狉 犻 犪犫 犪 狀 犮 狉 狅 犳 狋 犻犪 狀 犱犅狉 狌 犵 犻 犪犿犪 犾 犪 狔 犻犻 狀犿狅 狊 狇 狌 犻 狋 狅 犲 狊 发布 实施中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发 布书 书 书前言本标准按照 给出的规则起草。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位:中华人民共和国辽宁出入境检验检疫局、中国检验检疫科学研究院、中华人民共和国甘肃出入境检验检疫局、中华
2、人民共和国四川出入境检验检疫局。本标准主要起草人:田虹、刘丽娟、刘芳、高玉峰、陈肖潇、张红兵。犛犖犜 蚊类携带丝虫(班氏丝虫、马来丝虫)的犘犆犚检测方法范围本标准规定了国境口岸蚊类携带班氏丝虫和马来丝虫的检测方法,包括样本检测程序、检测方法、结果判定及报告。本标准适用于检验检疫机构对蚊类携带班氏丝虫和马来丝虫的检测。规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。 实验室生物安全通用要求 微生物和生物医学实验室生物安全通用准则 国境口岸蚊类监测规程 入出境航空器医学媒介生物
3、监测规程 入出境船舶医学媒介生物监测规程 入出境车辆医学媒介生物监测规程 医学媒介生物标本采集、制作及保存规程术语和定义下列术语和定义适用于本文件。 丝虫犉 犻 犾 犪 狉 犻 犪是由吸血节肢动物传播的一类寄生性线虫。成虫寄生在脊椎动物终宿主的淋巴系统、皮下组织、腹腔、胸腔等处。幼虫在某些吸血节肢动物中间宿主体内进行发育。当这些中间宿主吸血时,成熟的感染期幼虫即自其喙逸出,经皮肤侵入终宿主体内发育为成虫。寄生于人体的丝虫主要有种,我国流行的主要以班氏丝虫(犠狌 犮 犺 犲 狉 犲 狉 犻 犪犫 犪 狀 犮 狉 狅 犳 狋 犻)和马来丝虫(犅狉 狌犵 犻 犪犿犪 犾 犪 狔 犻)为主。二者形态相
4、似,虫体皆为乳白色丝状,体表光滑,雌、雄异体。 蚊类犕狅 狊 狇 狌 犻 狋 狅班氏丝虫的主要传播媒介为淡色库蚊(犆狌 犾 犲 狓狆 犻 狆 犻 犲 狀 狊狆犪 犾 犾 犲 狀 狊)和致倦库蚊(犆狓狆 犻 狆 犻 犲 狀 狊狇 狌 犻 狀 狇 狌 犲 犳 犪 狊 犮 犻 犪 狋 狌 狊) ,马来丝虫病的主要媒介为中华按蚊(犃狀 狅 狆 犺 犲 犾 犲 狊狊 犻 狀 犲 狀 狊 犻 狊)和嗜人按蚊(犃狀犪 狀 狋 犺 狉 狅 狆 狅 狆 犺 犪 犵 狌 狊)等。 犘犆犚技术狆 狅 犾 狔犿犲 狉 犪 狊 犲犮 犺 犪 犻 狀狉 犲 犪 犮 狋 犻 狅 狀技术是体外酶促合成特异片段的一种方法,由高
5、温变性、低温退火及适温延伸等几步反应组成一个周期,循环进行,使目的得以迅速扩增,具有特异性强、灵敏度高、操作简便、省时等犛犖犜 特点。本文件中采用技术,参考 等的文献( 犅狉 狌犵 犻 犪犿犪 犾 犪 狔 犻 犠狌 犮 犺 犲 狉 犲 狉 犻 犪犫 犪 狀 犮 狉 狅 犳 狋 犻 ) ,分别合成马来丝虫和班氏丝虫的特异引物 和 ,扩增目标片段为 和 的方法。缩略语下列缩略语适合于本文件。:脱氧核苷三磷酸( ):聚合酶链反应( ):十二烷基磺酸钠( )犜犪 狇酶:犜犪 狇聚合酶(犜犪 狇 )检测对象出入境交通工具、集装箱、货物以及口岸等场所捕获的媒介蚊虫,主要以淡色库蚊(犆狌 犾 犲 狓狆 犻
6、狆 犻 犲 狀 狊狆犪 犾 犾 犲 狀 狊) 、致倦库蚊(犆狓狆 犻 狆 犻 犲 狀 狊狇 狌 犻 狀 狇 狌 犲 犳 犪 狊 犮 犻 犪 狋 狌 狊) 、中华按蚊(犃狀 狅 狆犺 犲 犾 犲 狊狊 犻 狀 犲 狀 狊 犻 狊)及嗜人按蚊(犃狀犪 狀 狋 犺 狉 狅 狆 狅 狆犺 犪犵狌 狊)为主。生物安全要求实验过程中生物安全要求如下: 检测工作中的个人防护参照 ; 实验室应遵循 和 对生物安全级( )实验室的生物安全要求; 使用过的实验用品应遵循 对废弃物的处理要求进行无害化处理。主要试剂主要试剂如下: 样本处理液:在新鲜配制的 中加入 热灭活 的胎牛血清、的青链霉素(青霉素 、链霉素 )
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