NY∕T 3091-2017 化学农药 蚯蚓繁殖试验准则(农业).pdf
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1、ICS 65.020 B 17 NY 中华人民共和国农业行业标准/T 3091-2017 化学农药耻蚓繁殖试验准则Chemical pesticide- Guideline for earthworm reproduction test 2017 -06-12发布2017-10-01实施飞/, 1 . 中华人民共和国农业部发布NY/T 3091- 2017 前言本标准按照GB/T 1. 1 2009给出的规则起草。本标准主要技术内容等效采用了经济合作与发展组织OECD)化学品测试导则No.222(蜓蚓繁殖试验。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。本标准
2、由农业部种植业司提出并归口。本标准起草单位:农业部农药检定所、环境保护部南京环境科学研究所。本标准主要起草人:姜锦林、flH兹在、|、元卿、周欣欣、程?挝、周艳明、单正车。I NY/T 3091-2017 化学农药蜓蚓繁殖试验准则1 范围本标准规定了蜒蚓繁殖试验的术语和l定义、供试物信息、试验概述、试验方法、数据处理与分析、质量控制、试验报告等的基本要求。3 3.1 3 3 3.4 3.5 本标准适用于为化学农药登记j1H耐直商军董事誓就总唔他类型的农药可参!自使用。本标准不适町始和结束时对试验体注单位半致死浓度给定的试验期限内注全致死浓度totally lethal 给定的试验期限内,引起受
3、试生物全部死亡的最小供试物浓度,用LCIOO表示。注.单位为毫克有效成分得千克干土(mga. i. /kg干土)。最低可观察效应浓度lowest observed effect concentration 本文给定试验期限内,与空白对!fl组相比,供试物对受试生物产生具有统计学显著性差异的不利效应CP0.05)的最低浓度.lllJ供试物对受试生物有不利影响的最低浓度,用LOEC表示。注:单位为毫克有效J/i;分每千克干土Cmga. i. /kg干土)。1 NY/T 3091-2017 3.6 无可观察效应浓度no observed effecl concenlralion 给定试验期限内,与空
4、白对!l组相比,未观察到供试物对受试生物产生具有统计学显著性差异的不利效应(PO.O日的供试物最高浓度,一般为仅低于LOEC的供试物最高浓度,用NOEC表示。注单位为?克有效成分每千克干士Cmga. i. !kg干土) 3 7 成蚓adull worms 身体前剖:I-:现生殖带的成年国丘蚓。3.8 生殖带c1ilcllum 成蚓前端表皮的一个腺体,呈马鞍形或环状,通常有明显不同的颜色。3.9 繁殖率reproduction rate 试验期内每条成蚓生产的幼蚓数量的平均值。3. 10 行为症状behavioral symptoms 供试物引起蜓蚓ri毒后的非正常生物学行为的tN述指标。一般包
5、括在二土壤表面翻滚、僵硬缩短、IIgL做脉冲式运动,或者在土壤中停止活动,缩成一团。自丘蚓在测试容器中的每一个可辨别的明显变化。3.11 死亡mortalily 用细小的针刺供试贩蚓的前部和尾部,没有明显反应的生物个体。由于蜓蚓死亡后分解很快,在密闭实验容器的土攘中引入活蜓蚓数量的损失也可认定为死亡发生。4 试验概述通过不同浓度的供试物溶液与定量的人工配制土壤混合,号|入定茧健康、具稳定繁殖力的成蚓,;11在4周内观察试验土壤中成蚓死亡率和生长受影响状况,移出观察到的成蚓,继续暴露4用,观察、统计土攘中的子代姐蚓数量。供试物浓度范围的选择应包括在8月1试验期间可能会引起亚致死和致死效应的浓度,
6、目标ECxtl且也应在该浓度范围内,使得ECx(J9fi1势是来自内插法而不是外推法。通过统计分析供试物处理组和空白对!自组繁殖率的差异,确定LOEC和NOEC,或通过回归模型来估算ECx(如ECIO和EC,o)。5 试验方法5 1 材料和条件5. 11 供试生物本标准使用赤子爱胜蚓CEiseniafoetida)和安德爱胜蚓CEiseniaandrei)作为受试生物,选择具有生殖带的两个月至一年大小的成蚓,来自同一生长环境,大小均匀、年龄一致(差别不宜超过4周)。试验前,如蚓在供试人工土l!l环境中驯养至少1d ,型11养期间使用的食物应和l正式试验中的食物保持一致。娅蚓培养方法参见附录A。
7、驯养后的成蚓用去离子水消洗干净,用滤纸吸去多余水分,每10条蜓蚓为一组,每组单独称重,每条蜓蚓的重量应控制在250mg600 mg。称重后成蚓在试验开始前随机分配到各试验培养容器中。5.12 供试物2 NY/T 3091-2017 供试物可使用农药制剂、原药。到i溶于水的供试物可月1少量对贩蚓低毒的有机溶剂助浴,或直接用适量对蜕蚓低毒有机溶剂(如l丙翻)溶解。供试物应至少给出下列信息:a) 化学结构式;b) 纯度,c) 水溶性,d) 7j(中和光中的稳定性,e)辛醉水分配系数;f) 蒸汽压。5. 1.3 参比物质5. 1.5.4 5 1.5.5 5. 1.5.6 5 1.5 7 5. 16 试
8、验条件试验混度为(20土中充气,视IJ土攘的含水盘。必要时,始含水盐的10%。5.2 试验操作5.2. 1 染毒5. 2. 1. 1 基本要求,50 f-Lm-200m 口pH应在6.0土燥成分进行g试验叶飞去荒)来监的范围不超过初根据测试目的来选择染毒方式,一般可将供试物溶液与试验人工士攘均匀混合。在设计更细致的染毒试验中,也可直接将供试物施于土壤表面,或与常规农业操作一致(例如,1质酒液体制剂,或使用一些特殊的剂型如颗粒剂和种衣剂时)。当供试物或参比物质染毒过程中使用有机浴剂I时,有机溶剂应对蜓蚓低毒,且在试验设计中应以最大溶剂使用量设置浴剂对!l组。5.2. 1 2 土壤混合染毒3 NY
9、/T 3091-2017 使用均匀混合法染毒时,根据供试物理化特性可按下列3种情况进行,a) 供试物易溶于水试验开始前,按设计浓度能耍,配制足够的供试物去离子水溶液,使;l主可以满足一个处理所有重复组的使用iiL将各浓度的适盐药液加入到人工土楼中,补充去离子水以便土壤最终含水量达到其最大持水蓝的40%60%,混合均匀后放入试验容都叶待用。b) 供试物难济于71.,将供试物用少i让适宜有相L溶剂(如l丙酬)溶解,均匀喷洒或混入少盐纠11石英砂巾,12于迎风橱巾至少数分钟,使有机济剂蒸发。之后将处理过的石英砂与预先湿润的人工土攘配料混合均匀,补充去离子水,使土攘最终含水盐达到其最大持水茧的40%6
10、0%,混合均匀后放入试验容帮中待用。c) 供试物不溶于水和有机溶剂:将10g纬l石夹在与供试物混合,制成均匀混合物,然后将该混合物均匀混入预先湿润的其他人工土攘配料中,补充去离子水以便土模最终含水量达到其最大持水位的40%60%,混合均匀后放入试验容器中待用.5.2. 1.3 土攘表面染毒夺配i空好的人工土壤置于容都巾,然后将蜓蚓|宜于土攘表层。通常健康的班蚓会立即钻入土中,若15 min后还未钻入土中的蜓蚓则视为受伤,应予更换,所有更换和被更换的姐蚓应称茧,以确保试验开始H才处理组蜒蚓总重和加上容器一起的总重iH均为已知.当如l人的蜓蚓均转入士攘后,使用适宜l质洲3主51将配J1好的供试物各
11、浓度组药液分别定盐均匀喷洒在土壤表丽,施用前应先移去容器盖子,并向容都内)111一个衬里,以避免供试物1!9f洒到试验容然壁上。上述操作过程应避免姐蚓|与供试物药液直接皮肤接触,且室内温度应保将在(20士2)C,药液l质施盐应控制在600L/m2800L/m,药液l愤施主I应用适宜方法进行校准。染王在后,试验容都在1h内勿盖上盖子,以便所用的溶剂蒸发,但应采取有效措施防止蜓蚓爬出逃逸。5.22 浓度设计供试物正式试验的浓度的设计,可通过急性主导性数据和/或浓度范阁筛选试验获得,直1111前进行浓度范ffil筛选试验,可按几何级数设置较大范网的不同浓度组,如O.1 mg a. i. / kg干土
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