胞内分枝杆菌肺病患者耐药谱及临床特征分析.pdf
《胞内分枝杆菌肺病患者耐药谱及临床特征分析.pdf》由会员分享,可在线阅读,更多相关《胞内分枝杆菌肺病患者耐药谱及临床特征分析.pdf(5页珍藏版)》请在咨信网上搜索。
1、Drug resistance profiles and clinical characteristics of Mycobacterium intracellular pulmonary diseaseGulibikeMulati1,GUOCan2,RENWeicong2,SHANGYuanyuan2,PANGYu2,KONGZhongshun2,MABingxi1*(1The Eighth Affiliated Hospital of Xinjiang MedicalUniversity,Urumqi,830049,China;2Beijing Chest Hospital,Capital
2、 Medical University,Beijing,100000,China)Abstract:ObjectiveTo investigate the drug resistance profiles and drug resistance-related genes of 100 clinicalisolates strains ofMycobacteria intracellular in Chinaand toprovide scientific basis for the treatment of M.intracellular pulmonary disease.MethodsA
3、total of 100 M.intracellular clinical strains stored at the department of bacteriology and immunology of Beijing Chest Hospital were finallyincluded.All strains were isolated from respiratory specimens of suspected tuberculosis or NTM patients in nine TB specialized hospitals.专题研究胞内分枝杆菌肺病患者耐药谱及临床特征分
4、析古丽比克 木拉提1,郭灿2,任卫聪2,尚媛媛2,逄宇2,孔忠顺2,麻斌喜1*(1新疆医科大学第八附属医院,乌鲁木齐 830049;2首都医科大学附属北京胸科医院,北京 100000)基金项目:北京市临床重点专科项目(项目编号:ZYLX202122)。作者简介:古丽比克 木拉提,女,主管检验师,研究方向:结核病实验室诊断。通信作者:麻斌喜,男,硕士,主任药师,研究方向:药学,公共卫生学。E-mail:。摘要:目的分析 100 株胞内分枝杆菌临床株耐药谱及耐药相关基因,为治疗胞内分枝杆菌提供科学依据。方法对来自全国 9 家医院,保存于北京胸科医院细菌免疫实验室并初步鉴定为胞内分枝杆菌的 100
5、株临床株进行 13 种药物的药物敏感实验并对克拉霉素和阿米卡星耐药的临床株进行耐药相关突变位点的分析。结果100 株胞内分枝杆菌临床分离株药物敏感性实验显示,克拉霉素,阿米卡星,利奈唑胺对胞内分枝杆菌有很好的抗菌活性。耐药率分别为 11%(11/100),13%(13/100)和 35%(35/100)。暂未发现与克拉霉素和阿米卡星耐药相关的突变位点。在胞内分枝杆菌肺病患者中以老年男性患者为多见,合并症以慢性阻塞性肺病与支气管扩张为主。结论胞内分枝杆菌对各种药物的敏感性有差异,因此临床治疗前应进行耐药性检测,以实现个性化治疗。关键词:胞内分枝杆菌;微生物敏感性试验;抗药性中图分类号:R521文
6、献标识码:A文章编号:10015183(2023)0550705新疆医学会结核病学专业委员会主任委员:麻斌喜,中共党员,主任药师,硕士研究生导师。现任新疆医科大学第八附属医院党委委员、副院长。担任中国防痨协会常务理事、中国防痨协会结核病转化医学分会副主任委员、中华医学会结核病学分会委员、北京结核病诊疗技术创新联盟药事工作委员会副主任委员、中国防痨协会学术工作委员会委员、中国防痨杂志 编委、新疆医学会理事、新疆医学会医疗事故技术鉴定专家库成员。近年来主持参与多项国家级合作项目、国家自然科学基金项目、新疆维吾尔自治区科研项目,国家科技重大专项,中国科协“一带一路”国际科技组织合作平台建设项目,自治
7、区科技厅区域协同创新专项(上海合作组织科技伙伴计划)项目。第 53 卷第 5 期2023 年 5 月新疆医学XINJIANG MEDICAL JOURNALVol.53No.5May.2023新疆医学第 53 卷非结核分枝杆菌(nontuberculosis Mycobacteri-um,NTM)是一种重要的条件致病菌,在自然环境中广泛存在,有可能在人类和动物中引起疾病。鸟胞内分枝杆菌复合群(Mycobacterium avium com-plex,MAC)是一种常见的非结核分枝杆菌1,包含十余种亚种,以鸟分枝杆菌和胞内分枝杆菌最为常见2。研究表明,我国主要流行的非结核分枝杆菌是鸟胞内分枝杆菌
8、复合群,其中,胞内分枝杆菌为优势菌种3。然而,胞内分枝杆菌对常用抗结核药物的高耐药性,对临床治疗带来了诸多困难。因此,可靠的药敏试验对指导胞内分枝杆菌肺病的临床用药有重要作用4。目前,我国对肺部胞内分枝杆菌临床株药物敏感性的研究报道尚少。本研究对来自我国多个省份的胞内分枝杆菌临床株进行表型药物敏感性检测,同时对耐药相关基因进行测序分析,进一步了解胞内分枝杆菌生物学特征并指导临床用药。1 材料与方法1.1 菌株来源和一般资料菌株为首都医科大学附属北京胸科医院细菌免疫实验室保存,并采用溶解曲线法鉴定为胞内分枝杆菌的临床分离株,共 100 株。菌株分别来源于我国不同地区的 9 家医院,分别为广州市胸
9、科医院,重庆市公共卫生医疗救治中心,广西壮族自治区龙潭医院,安徽省胸科医院,西安市胸科医院,厦门大学附属第一医院,郑州市第六人民医院,长沙市中心医院,湖南省胸科医院。年龄范围 24 岁-95 岁;其中男 69 例(69%),女 31 例(31%)。1.2 研究方法(1)药物敏感性实验:将保存于-80的菌株接种在罗氏培养基上,37培养 3 周-4 周。刮取培养基斜面上的菌落于生理盐水中,超声分散制备浓度为 0.5 标准麦氏单位的细菌悬液。将制备好的细菌悬液取 100l 加到 10ml 肉汤培养基中,每孔接种 100l 菌悬液到 96 孔药敏板购自赛默飞世尔科技(中国)有限公司 中,封口贴膜,放入
10、 37培养箱,培养三周后读取最小抑菌浓度(minimal in-hibitory concentration,MIC)和药敏结果。药敏板含有13 种预制冻干药物:克拉霉素,环丙沙星,链霉素,多西环素,乙硫异烟胺,利福布汀,乙胺丁醇,异烟肼,莫西沙星,利福平,复方新诺明,阿米卡星,利奈唑胺。耐药临界浓度见表 1,其中克拉霉素,阿米卡星,莫西沙星,利奈唑胺耐药临界浓度参考文献5,利福平,利福布汀,乙胺丁醇和链霉素耐药临界浓度参考文献6-9,另 5 种药缺少胞内分枝杆菌耐药临界浓度,因此本研究无法进行药敏分析。并统计出抑制 50%细菌生长的最低药物浓度(MIC50)和抑制90%细菌生长的最低药物浓度
11、(MIC90)。(2)PCR 扩增与 DNA 测序:将胞内分枝杆菌临床株菌悬液置于金属浴上,80灭活 2 h,采用CTAB 法提取基因组 DNA。采用 23SrRNA、16SrRNA两对引物扩增,23SrRNA 上游引物 5-TCAAC-CATAGACTCGGCGAA-3;下游引物为 5-TTCC-CGCTTAGATGCTTTCAG-3。16SrRNA 上游引物为5-TCATGCCCCTTATGTCCAGG-3;下游引物为5-AGGTGATCCAGCCGCACCTTC-3。由上海生工生物有限公司合成。23SrRNA 反应产物为 770bp;16SrRNA 反应产物为 338bp;反应体系如下所
12、示:模板 DNA 2l,上游引物(浓度 10M)和下游引物(浓度 10M)各 1.5l,2Taq PCR Master Mix 25l,The minimal inhibitory concentration(MIC)of strains to 13 drugs was tested.Strains resistant to clarithromycin and amikacinwerescreenedand the mutated sites of drug-resistant genes of rrl and rrswere tested.In addition,The demograph
13、ic and clinicalcharacteristics of patients with NTM lung diseases caused by M.intracellularwere analyzed.ResultsThe drug susceptibility testing of100 clinical isolates of M.intracellularindicated that Clarithromycin,Amikacin and Linezolid had good antibacterial activityagainstthem.The drug resistant
14、 rates of M.intracellular to Clarithromycin,Amikacin and Linezolid were 11%(11/100),13%(13/100)and 35%(35/100),respectively.Clarithromycin,Amikacin and Linezolid demonstrated in vitro antimicrobial activity against most of M.intracellulareisolates.Strains resistant to Clarithromycin and Amikacin had
15、 no mutation sites associated with known drug resistance ingenes of rrl and rrs.Clinical cases of M.intracellularlung diseases were similar to be found in the elderly malesand patients with chronicobstructive pulmonary disease and bronchiectasis comorbidity.ConclusionDrug resistance profiles of M.in
16、tracellularlungvaried a lotindifferent drugs,thus drug susceptibility testing should be conducted prior to clinical treatmentto guide tailored therapy.Key words:Mycobacteria intracellular;Microbial sensitivity tests;Drug resistance508第 5 期古丽比克 木拉提,等;胞内分枝杆菌肺病患者耐药谱及临床特征分析ddH2O20ul,总体积为 50ul。PCR 扩增条件如下
17、:94预变性 5min;94变性 30sec,58退火30sec,72延伸 45sec,35 个循环;72延伸 5min。经 2%琼脂凝胶回收 PCR 产物并送上海生工生物有限公司进行测序,测序结果与胞内分枝杆菌 MTCC9506 进行序列比对分析。1.3 统计学方法使用 SPSS19.0 进行数据分析。采用二元 Lo-gistic 回归分析统计数据之间的差异是否有显著性,P 值 0.05 为有统计学差异。2 结果2.1 胞内分枝杆菌对 13 种抗生素的耐药性结果100 株胞内分枝杆菌药敏结果显示,克拉霉素,阿米卡星,利奈唑胺对胞内分枝杆菌有很好的抗菌活性。其中克拉霉素 MIC50和 MIC9
18、0值分别为1g/ml,32g/ml,耐药率为 11%。阿米卡星 MIC50和MIC90值分别为 4g/ml,64g/ml,耐药率为 13%。利奈唑胺耐药率为 35%。而利福布汀,乙胺丁醇,利福平,莫西沙星,链霉素对胞内分枝杆菌的抗菌效能较差,耐药率均高于 50%。见表 2。2.2 胞内分枝杆菌感染的社会人口学及临床症状特征分析在胞内分枝杆菌肺病患者中,男性患者占69%,女性患者占 39%,65 岁以上老年患者为感染高峰人群占 48%。54%以上的患者有结核病史。合并症以慢性阻塞性肺病与支气管扩张为主。临床症状为咳嗽,发热为主。克拉霉素耐药患者中男女占比分别为 81.8%,18.2%;有结核病史
19、患者占72.7%。阿米卡星耐药患者中男女占比分别为 84.6%,15.4%;有结核病史患者占 69.2%。但均无统计学意义。见表 3,4。2.3 耐药相关位点分析我们对克拉霉素耐药相关基因 rrl 和阿米卡星耐药相关基因 rrs 的突变位点进行测序分析,发现在 11 株克拉霉素耐药株中有 6 株存在 rrl 基因的表 1 胞内分枝杆菌对不同抗生素的关键浓度药品名称复方新诺明MIC 范围(g/ml)耐药临界浓度(g/ml)0.12/0.38-8/152-克拉霉素0.06-6432异烟肼0.25-8-乙硫异烟胺0.3-20-链霉素0.5-6464环丙沙星0.12-16-多西环素0.12-16-乙胺
- 配套讲稿:
如PPT文件的首页显示word图标,表示该PPT已包含配套word讲稿。双击word图标可打开word文档。
- 特殊限制:
部分文档作品中含有的国旗、国徽等图片,仅作为作品整体效果示例展示,禁止商用。设计者仅对作品中独创性部分享有著作权。
- 关 键 词:
- 分枝杆菌 肺病 患者 耐药 临床 特征 分析
1、咨信平台为文档C2C交易模式,即用户上传的文档直接被用户下载,收益归上传人(含作者)所有;本站仅是提供信息存储空间和展示预览,仅对用户上传内容的表现方式做保护处理,对上载内容不做任何修改或编辑。所展示的作品文档包括内容和图片全部来源于网络用户和作者上传投稿,我们不确定上传用户享有完全著作权,根据《信息网络传播权保护条例》,如果侵犯了您的版权、权益或隐私,请联系我们,核实后会尽快下架及时删除,并可随时和客服了解处理情况,尊重保护知识产权我们共同努力。
2、文档的总页数、文档格式和文档大小以系统显示为准(内容中显示的页数不一定正确),网站客服只以系统显示的页数、文件格式、文档大小作为仲裁依据,平台无法对文档的真实性、完整性、权威性、准确性、专业性及其观点立场做任何保证或承诺,下载前须认真查看,确认无误后再购买,务必慎重购买;若有违法违纪将进行移交司法处理,若涉侵权平台将进行基本处罚并下架。
3、本站所有内容均由用户上传,付费前请自行鉴别,如您付费,意味着您已接受本站规则且自行承担风险,本站不进行额外附加服务,虚拟产品一经售出概不退款(未进行购买下载可退充值款),文档一经付费(服务费)、不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。
4、如你看到网页展示的文档有www.zixin.com.cn水印,是因预览和防盗链等技术需要对页面进行转换压缩成图而已,我们并不对上传的文档进行任何编辑或修改,文档下载后都不会有水印标识(原文档上传前个别存留的除外),下载后原文更清晰;试题试卷类文档,如果标题没有明确说明有答案则都视为没有答案,请知晓;PPT和DOC文档可被视为“模板”,允许上传人保留章节、目录结构的情况下删减部份的内容;PDF文档不管是原文档转换或图片扫描而得,本站不作要求视为允许,下载前自行私信或留言给上传者【自信****多点】。
5、本文档所展示的图片、画像、字体、音乐的版权可能需版权方额外授权,请谨慎使用;网站提供的党政主题相关内容(国旗、国徽、党徽--等)目的在于配合国家政策宣传,仅限个人学习分享使用,禁止用于任何广告和商用目的。
6、文档遇到问题,请及时私信或留言给本站上传会员【自信****多点】,需本站解决可联系【 微信客服】、【 QQ客服】,若有其他问题请点击或扫码反馈【 服务填表】;文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“【 版权申诉】”(推荐),意见反馈和侵权处理邮箱:1219186828@qq.com;也可以拔打客服电话:4008-655-100;投诉/维权电话:4009-655-100。