GB∕T 38517-2020 颗粒 生物气溶胶采样和分析 通则.pdf
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1、书 书 书犐 犆犛 犃 中 华 人 民 共 和 国 国 家 标 准犌犅犜 颗粒生物气溶胶采样和分析通则犘 犪 狉 狋 犻 犮 狌 犾 犪 狋 犲犅 犻 狅 犪 犲 狉 狅 狊 狅 犾 狊狊 犪犿狆 犾 犻 狀 犵犪 狀 犱犪 狀 犪 犾 狔 狊 犻 狊犌犲 狀 犲 狉 犪 犾狆 狉 犻 狀 犮 犻 狆 犾 犲 狊 发布 实施国 家 市 场 监 督 管 理 总 局国 家 标 准 化 管 理 委 员 会发 布目次前言引言范围规范性引用文件术语和定义生物气溶胶采样 概述 生物气溶胶采样方法 生物气溶胶采样方法的选择 生物气溶胶采样器的选择 采样辅助器材 采样程序生物气溶胶分析 生物气溶胶的定性分析
2、生物气溶胶的定量分析附录(资料性附录)生物气溶胶采样器的性能和选择原则 附录(资料性附录)生物气溶胶采样和定量分析(培养分析法)记录 参考文献 犌犅犜 前言本标准按照 给出的规则起草。本标准由全国颗粒表征与分检及筛网标准化技术委员会( )提出并归口。本标准起草单位:军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所、青岛众瑞智能仪器有限公司、中国科学院过程工程研究所、中国疾病预防控制中心环境与健康相关产品安全所、中国检验检疫科学研究院、山东农业大学、复旦大学、安徽宾肯电气股份有限公司、北京拓普天成科技发展有限公司、天津市春信净化制冷设备有限公司。本标准主要起草人:李劲松、李娜、何春雷、李兆军、周兰、胡
3、凌飞、杨文慧、刘凡、胡孔星、柴同杰、隋国栋、张柯、靳爱军、叶佳、王洋、李秋实。犌犅犜 引言本标准为环境空气中细菌、病毒、真菌和毒素等不同特性的生物气溶胶(也称之为空气微生物)的采样提供了采样方法和生物气溶胶的分析,其中,采样方法包括采样原理、采样器的选择和采样过程中应关注的问题;分析方法包括分析方法的类型、方法的适用性、分析结果的表达方式。在附录中提供采样器性能和选择的原则;在附录中提供生物气溶胶采样全过程的记录表格。犌犅犜 颗粒生物气溶胶采样和分析通则警示 在使用本标准过程中可能涉及有危害性的生物成分、操作和设备。本标准没有包含使用本标准时应注意的生物安全问题,使用者在使用本标准前应当根据采
4、样目的和采样环境的生物危害风险,采取适当的生物安全防护措施。范围本标准规定了环境空气中细菌、病毒、真菌和毒素等不同特性的生物气溶胶的采样和分析方法的通用原则。本标准适用于环境空气中的生物气溶胶的采样和分析。规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。 医药工业洁净室(区)浮游菌的测试方法 医药工业洁净室(区)沉降菌的测试方法 室内空气中溶血性链球菌卫生标准 公共场所卫生检验方法第部分:空气微生物 洁净室施工及验收规范术语和定义下列术语和定义适用于本文件。 微生物犿 犻
5、犮 狉 狅 狅 狉 犵 犪 狀 犻 狊犿个体难以用肉眼观察的一切微小生物的统称。注:引自全国科学技术名词审定委员会公布的微生物学名词 (第二版) 。注:本标准所指微生物仅包括细菌、真菌、病毒。 细菌犫 犪 犮 狋 犲 狉 犻 犪以细胞壁含胞壁酸,膜脂为酯键脂、聚合酶无型启动子等为主要特征的原核生物的总称。注:引自全国科学技术名词审定委员会公布的微生物学名词 (第二版) 。 病毒狏 犻 狉 狌 狊由或及蛋白质等组成的,专营细胞内感染和复制的一大类结构简单的微生物。注:引自全国科学技术名词审定委员会公布的微生物学名词 (第二版) 。 真菌犳 狌 狀 犵 犻无叶绿素、有细胞壁、营吸收营养的真核生物。
6、普遍以有性和无性两种方式产生孢子进行繁殖,通犌犅犜 常为丝状且有分枝的体细胞结构,一般都有细胞壁。注:引自全国科学技术名词审定委员会公布的微生物学名词 (第二版) 。 孢子狊 狆 狅 狉 犲真菌或细菌中能直接发育成新个体的微小繁殖单元。注:引自全国科学技术名词审定委员会公布的微生物学名词 (第二版) 。 毒素狋 狅 狓 犻 狀生物产生的、对他种生物体有毒性的产物。注:改写自全国科学技术名词审定委员会公布的微生物学名词 (第二版) 。注:毒素从来源分有微生物毒素、植物毒素和动物毒素三类。 生物气溶胶犫 犻 狅 犪 犲 狉 狅 狊 狅 犾含有生物性成分的固体或液体微粒悬浮于气体介质中形成的稳定分散
7、系。注:生物性成分包括细菌、病毒、真菌、孢子、毒素等。生物气溶胶粒子粒径在 之间。 粒子空气动力学粒径狆 犪 狉 狋 犻 犮 犾 犲犪 犲 狉 狅 犱 狔 狀 犪犿 犻 犮犱 犻 犪犿犲 狋 犲 狉某一种粒子,无论其形状、大小和密度如何,在空气中的沉降速度与一种密度为的球形粒子的沉降速度一致时的该粒子的直径。 采样介质犮 狅 犾 犾 犲 犮 狋 犻 狅 狀犿犲 犱 犻 犪用来捕获、承载生物气溶胶粒子的物质。注:采样介质一般具有稳定性、粘附性、无毒性、抗蒸发、水溶性等基本性能。 菌落犮 狅 犾 狅 狀 狔在固体基质表面或内部形成的紧密生活在一起肉眼可见的同一微生物物种的群体,或来源于同一细胞的一
8、群细胞。注:引自全国科学技术名词审定委员会公布的微生物学名词 (第二版) 。 菌落形成单位犮 狅 犾 狅 狀 狔犳 狅 狉犿 犻 狀 犵狌 狀 犻 狋;犆犉犝根据固体培养基上形成的菌落数,测定样品中活菌浓度的单位。注:引自全国科学技术名词审定委员会公布的微生物学名词 (第二版) 。注:一个菌落形成单位能从单个微生物形成,也可以是多个微生物的聚集体或者是一个或者多个微生物黏附在一个粒子上。注:生长出的菌落数量跟培养条件有关。 菌落总数犮 狅 犾 狅 狀 犻 犲 狊狀 狌犿犫 犲 狉菌落生长总数在一定条件下(如需氧情况、营养条件、培养温度和时间等)单位质量或单位体积样本所生长出来的、能被肉眼识别的
9、微生物生长物数量。 噬斑狆 犾 犪 狇 狌 犲病毒感染人工培养的单层细胞后由单个病毒粒子所产生的细胞裂解区。注:引自全国科学技术名词审定委员会公布的微生物学名词 (第二版) 。犌犅犜 噬斑形成单位狆 犾 犪 狇 狌 犲犳 狅 狉犿 犻 狀 犵狌 狀 犻 狋;犘犉犝每单位体积或重量的病毒悬液所能形成的噬斑数。注:引自全国科学技术名词审定委员会公布的微生物学名词 (第二版) 。生物气溶胶采样 概述生物气溶胶的浓度、粒径、活性等具有不确定性和不稳定性,不同的生物成分对采样过程的耐受力差异很大,生物成分的分析方法也不相同。因此,在充分考虑生物气溶胶上述特点外,结合采样环境和采样目的,决定采样方法和选用
10、采样器种类。生物气溶胶采样器的性能和选择原则参见附录。 生物气溶胶采样方法 撞击式采样利用惯性作用,通过喷嘴、喷口或裂隙的加速作用把生物气溶胶粒子采集到固体介质表面的气溶胶采集方式。 冲击式采样能够使具有足够大惯性的生物气溶胶粒子撞击液体并进入液体介质中的气溶胶采集方式。 滤膜采样生物气溶胶粒子通过各种滤材时,滤材小孔对粒子的阻留或和滤材对粒子的静电吸引阻留作用,将粒子捕获在滤材上的采集方式。 离心式采样一种让气体以高速旋转所产生的离心力将生物气溶胶粒子与气流分开并撞击到固体介质表面上或富集到液体介质里的采集方式。注:液体介质的离心采样也称之为气旋式采样。 大流量采样以 以上的采样流量把生物气
11、溶胶采集到液体里或固体介质上的采样方式。 静电吸附采样用多种方法使生物气溶胶粒子带上电荷,在电场的作用下通过静电吸附收集生物气溶胶粒子的采集方法。 自然沉降采样生物气溶胶粒子在重力作用下自然下沉降落到采样面(即微生物营养琼脂平皿表面)的采集方式。犌犅犜 生物气溶胶采样方法的选择 细菌气溶胶采样方法 细菌气溶胶定性分析采样方法细菌气溶胶的定性分析,即细菌生物学特性分析。可选择撞击式采样、冲击式采样、滤膜采样、离心式采样、静电吸附采样等方法。 细菌气溶胶定量分析采样方法细菌气溶胶的定量分析,即细菌气溶胶的细菌总数分析。可选择撞击式采样、冲击式采样、离心式采样、静电吸附采样、自然沉降采样等方法。其中
12、,自然沉降采样法仅限于洁净环境或外界干扰小的环境采样。 真菌气溶胶采样方法 真菌气溶胶定性分析采样方法真菌气溶胶的定性分析,即真菌生物学特性分析。可选择撞击式采样、冲击式采样、滤膜采样、离心式采样等方法。 真菌气溶胶定量分析采样方法真菌气溶胶的定量分析,即真菌总数分析。可选择撞击式采样、冲击式采样、滤膜采样、离心式采样、自然沉降采样等方法。 病毒气溶胶采样方法 病毒气溶胶定性分析采样方法病毒气溶胶的定性分析,即病毒生物学特性分析。可选择冲击式采样、滤膜采样、离心式采样(液体介质) 、静电吸附采样、撞击式采样等方法。选择撞击式采样时,应在琼脂表面涂抹一层薄的水溶性粘质层。 病毒气溶胶定量分析采样
13、方法病毒气溶胶的定量分析,即病毒总数分析。可选择冲击式采样、滤膜采样、离心式采样(液体介质) 、静电吸附采样、撞击式采样等方法。选择撞击式采样时,应在琼脂表面涂抹一层薄的水溶性粘质层。 毒素气溶胶采样方法 毒素气溶胶定性分析采样方法毒素气溶胶的定性分析,即毒素生物学特性分析。可选择冲击式采样、离心式采样(液体介质) 、滤膜采样等方法。选择撞击式采样时,应在琼脂表面涂抹一层薄的水溶性粘质层。 毒素气溶胶定量分析采样方法毒素气溶胶的定量分析,即毒素质量分析。可选择冲击式采样、离心式采样(液体介质) 、滤膜采样、撞击式采样等方法。选择撞击式采样时,应在琼脂表面涂抹一层薄的水溶性粘质层。犌犅犜 生物气
14、溶胶采样器的选择 采样器的要求采样器应有明确的物理采样效率、生物采样效率,以及采集生物气溶胶的粒子空气动力学粒径范围,应说明采样介质类型及其对微生物存活的影响。 采样器类型 撞击式采样器通过喷嘴、喷口或裂隙的加速作用把生物气溶胶粒子采集到固体或半固体介质表面的采样器。通常分为筛孔式、狭缝式的撞击式采样器。测量生物气溶胶粒径分布宜选择六级撞击式采样器等。 冲击式采样器基于用气流对液体的冲击、清洗或雾化等原理,经空气中的生物气溶胶粒子捕获在液体介质中的采样器。通常可以选择全玻璃液体冲击式采样器、气旋冲击式采样器等。这类采样器采样流量小,适用于高浓度的生物气溶胶采样;对浓度特别低的生物气溶胶还可以选
15、择大流量采样器。 过滤式采样器把生物气溶胶粒子捕获在滤膜上的采样器。根据后续样本分析方法的需要选择滤膜。 离心式采样器通过气体高速旋转所产生的离心力将生物气溶胶粒子与气流分开并撞击到固体介质表面上或富集到液体介质里的采集装置。 大流量采样器用较大采样流量将目标粒子分离、浓缩到采样介质中的采样装置。这种采样器适用于环境空气中低浓度目标生物气溶胶的采集。 静电吸附采样器用多种方法使生物气溶胶粒子带上电荷,利用静电吸附原理,在电场的作用下收集生物气溶胶粒子的采样装置。这类采样器适用于病毒气溶胶的采集,对病毒气溶胶存活力无明显降低;大流量静电吸附采样器适用于低浓度病毒气溶胶的采集。 自然沉降采样粗略测
16、量空气微生物粒子沉降量的方法,测量细菌总数一般用营养琼脂平皿采集,测量真菌总数一般用沙氏培养基平皿采集。 采样辅助器材 概述采样辅助器材包括采样过程中所需的无菌采样介质、容器、器材等。 采样介质 在生物气溶胶采样过程中使用无菌采样介质。犌犅犜 固体采样介质包括各种固体营养琼脂、半固体营养琼脂和各种滤膜。 液体采样介质包括生理盐水、磷酸缓冲液、营养液等各种液体。 采样时,考虑生物气溶胶粒子中生物成分的活性,采用介质应选固体或半固体培养基、含有营养成分的液体、中性液体等。采样时,不考虑生物气溶胶粒子中生物成分的活性,仅考虑生物气溶胶粒子采样效率,可选择多种采样介质,如固体或半固体培养基、含有营养成
17、分的液体、中性液体、滤膜等。 样品包装器材 普通生物气溶胶采集样品包装器材应满足防污染、防破碎、防溢洒的要求。 生物气溶胶样品含有病原微生物,采集样品包装(器材)应符合国家或部委有关病原微生物样品的包装要求。 人员防护装备 采集含有病原微生物的生物气溶胶时,采样人员应按照国家或部委的病原微生物危害等级的防护要求穿戴相应防护等级的个人防护装备。 普通环境的生物气溶胶采样时,采样人员应穿戴一般个人防护用品。 特定环境(如洁净环境)的生物气溶胶采样,采样人员应按照 、 等国家相关标准或采样环境要求穿戴个人防护装备。 消毒与灭菌器材 消毒剂应选用符合卫生消毒技术规范要求的方法与技术,应有时效性。 采样
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