羊肚菌菌株筛选比较试验.pdf
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1、dible fungi育 种 驯 化2023年第45卷第4期dible fungi摘要以羊肚菌母种 F1,两株子囊孢子单胞菌株Fa2、Fa67及其对应的组织分离菌株Ft2、Ft67 五株六妹羊肚菌菌株为试验材料,比较其菌丝培养基最适宜碳氮源、菌核量、产量,以期筛选优良的羊肚菌栽培菌株。结果表明,由子囊孢子选育优良羊肚菌栽培菌株的方法可行,试验为人工栽培羊肚菌优势菌株筛选与保种提供参考。关键词羊肚菌子囊孢子优势菌株菌株筛选中图分类号S646.9文章编号1000-8357(2023)04-0022-03羊肚菌 Morchella spp.,属子囊菌,菌盖表面呈蜂窝状,因具有极高的食药用价值而深受消
2、费者喜爱。野生羊肚菌资源有限,因此,人工栽培的羊肚菌将成为市场供应主力1-3。相较于平菇、木耳、香菇等食用菌,羊肚菌菌株退化速度更快,同时菌株的性状直接影响羊肚菌的产量4。因此,不断筛选优势羊肚菌菌株以获得较好的栽培效益具有现实意义。笔者比较六妹羊肚菌原始母种、子囊孢子单孢菌株及其组织分离菌株的菌丝培养性状、产量,以期筛选出优良的羊肚菌栽培菌株。1材料与方法1.1试验材料(1)羊肚菌菌株:六妹羊肚菌原母种F1,由南充世顺农业有限公司提供。以六妹羊肚菌母种F1为出发菌株栽培羊肚菌,选取一健壮子囊果,通过单孢分离技术获得子囊孢子单胞菌株Fa2、Fa67;栽培Fa2、Fa67获得健壮子囊果,组织分离
3、获得菌株Ft2、Ft67。(2)供试培养基PDA 培 养 基:土 豆 200 g,葡 萄 糖 20 g,琼 脂18 g,蒸馏水1 000 mL。基础培养基:葡萄糖20 g,硝酸钾 2 g,硫酸镁 0.5 g,磷酸二氢钾 0.5 g,氯化钠0.5 g,琼脂粉20 g,蒸馏水1 000 mL,pH7.0。碳源试验培养基:分别以等量的蔗糖、麦芽糖、可溶性淀粉代替基础培养基中的葡萄糖,其他成分不变。氮源试验培养基:分别以等量的尿素、蛋白胨、硫酸铵、硝酸铵代替基础培养基中的硝酸钾,其他成分不变。1.2试验方法1.2.1供试菌株菌丝培养基适宜碳氮源试验制备表面覆盖无菌赛璐玢膜的PDA平板,将供试羊肚菌菌株
4、分别接种于平板中央,20 培养5 d后,于无菌环境下将覆满菌丝体的赛璐玢膜剪成直径约5 mm的圆片。将供试菌株膜片分别接种在铺有无菌赛璐玢膜的含不同碳氮源培养基平板中心,每个菌株3次重复。20 培养菌丝,每24 h测1次菌落直径,并计算菌丝生长速度,菌丝生长速度=(菌落直径-菌块直径)/培养时间。结束培养后从赛璐玢膜上刮取所有菌丝,于55 烘干至恒重后,称量记录菌丝生物量。1.2.2供试菌株菌核产生能力比较将供试羊肚菌菌株分别接种在PDA培养基上,每个菌株3次重复,于20 恒温培养。待菌核产生且变黄时结束培养,收集气生菌核,于55 烘干至恒重后称量并记录,基面菌核采用Photoshop CS计
5、算其面积。1.2.3供试菌株产量比较试验地位于四川省广安市武胜县礼安镇观音坝村,海拔约 249.2 m,土壤为沙质土,土壤疏松透气。播种前清除地面杂草、乱石,撒生石灰消毒。采用厢式栽培方式,厢长 10 m、宽 1 m,沟宽 0.3 m,深 0.2 m。播种时按照 300 g/m2用种量将菌种均匀羊肚菌菌株筛选比较试验刘玥梁珍赵坤李林辉*(西华师范大学生命科学学院“西南野生动植物资源保护”教育部重点实验室,四川南充637000)收稿日期:2023-03-22一稿;2023-05-18修改稿。基金项目:武胜县2021年大中型水库移民后期扶持项目礼安镇羊肚菌高效栽培技术。作者简介:刘玥,硕士,研究方
6、向为微生物应用。联系电话:15228124717。E-mail:*通信作者:李林辉,博士,教授,研究方向为食用菌,农产 品 深 开 发。联 系 电 话:18990825076。E-mail:,2023,45(4):2224刘玥,等:羊肚菌菌株筛选比较试验22dible fungi育 种 驯 化2023年第45卷第4期撒播在厢面,并覆盖细土。播种后的管理参照文献5。待子囊果颜色变为棕黑色即可采收,记录鲜菇产量。供试羊肚菌菌株各栽培 3 个小区,每小区10 m2。1.3数据分析用Excel 2019处理试验数据,通过Spss 26.0软件进行统计学分析,采用Origin 2023软件对数据进行绘图
7、。2结果与分析2.1供试菌株菌丝培养基碳源试验结果由表1可知,含不同碳源培养基中,羊肚菌子囊孢子单胞菌株(Fa)和母本菌株(F1)的菌丝长速(日均生长速度,下同)均占优势。子囊孢子单胞菌株菌丝生物量优于母本菌株,但组织分离菌株(Ft)菌丝生物量少于母本菌株。在以葡萄糖为碳源培养基上,子囊孢子单胞菌株及母本菌株菌丝生物量多于另外三种碳源培养基。可见葡萄糖为供试菌株菌丝培养基最适碳源,且母本F1菌株、子囊孢子单胞菌株Fa菌丝生长优势更明显(图1)。DBCDEBCBCDEFCCCDDDEFBBBBUUH不同小写字母表示差异显著(P0.05),下同图1供试菌株在不同碳源培养基中的菌丝生物量表1供试菌株
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