新型溶瘤病毒HSV-1-ab-VISTA的构建及其抗肿瘤作用.pdf
《新型溶瘤病毒HSV-1-ab-VISTA的构建及其抗肿瘤作用.pdf》由会员分享,可在线阅读,更多相关《新型溶瘤病毒HSV-1-ab-VISTA的构建及其抗肿瘤作用.pdf(3页珍藏版)》请在咨信网上搜索。
1、米粒子生姜囊泡组均对人骨肉瘤HO S细胞具有较大的杀伤力,这是受金纳米粒子光热效应的影响.这些结果验证了该方法用于治疗骨肉瘤的可行性,为后续体内实验奠定了基础.基于生姜囊泡包被金纳米粒子的光热疗法作为一种新型肿瘤治疗方法,在生物医药领域具有巨大的应用前景.该方法的侵入性小、局部治疗、选择性高、疗效好等特点,解决了传统骨肉瘤治疗中创伤大、毒副作用大、疗效差等问题.同时,该方法具有通用性,适用范围广,可用于其他肿瘤的治疗.未来,我们将结合生姜囊泡结构特点,进一步设计合成功能化的生姜囊泡,构建具有靶向功能的治疗方案,以实现靶向治疗的可能.另外,我们也将结合其他治疗方法,构建多模式协同治疗策略,以进一
2、步提高骨肉瘤治疗疗效.参考文献M a nF,M e n gC,L i uY,e t a l T h e s t u d yo f g i n g e r d e r i v e de x t r a c e l l u l a r v e s i c l e s a s an a t u r a l n a n o s c a l e d r u g c a r r i e r a n d t h e i r i n t e s t i n a l a b s o r p t i o ni nr a t sJ AA P SP h a r m S c iT e c h,():王威,毕文志骨肉瘤治
3、疗现状与展望 J解放军医学院学报,():L i n d s e yBA,M a r k e l JE,K l e i n e r m a nES O s t e o s a r c o m aO v e r v i e wJ R h e u m a t o lT h e r,():H a nH,C h o iK A d v a n c e si nn a n o m a t e r i a l m e d i a t e dp h o t o t h e r m a l c a n c e rt h e r a p i e s:t o w a r dc l i n i c a la p p l
4、 i c a t i o n sJ B i o m e d i c i n e s,():L iX H,L o v e l l JF,Y o o nJY,e ta l C l i n i c a ld e v e l o p m e n ta n dp o t e n t i a l o fp h o t o t h e r m a la n dp h o t o d y n a m i ct h e r a p i e sf o rc a n c e rJ N a tR e vC l i nO n c o l,():Y a n gY,Z h e n gX,C h e nL,e t a l M
5、 u l t i f u n c t i o n a l g o l dn a n o p a r t i c l e s i nc a n c e rd i a g n o s i s a n d t r e a t m e n tJ I n t JN a n o m e d i c i n e,():S h k r y lY,T s y d e n e s h i e v aZ,D e g t y a r e n k oA,e ta l P l a n te x o s o m a l v e s i c l e s:p e r s p e c t i v e i n f o r m a
6、t i o nn a n o c a r r i e r s i nb i o m e d i c i n eJ A p p lS c i,():U r z O,R a i m o n d oS,A l e s s a n d r oR E x t r a c e l l u l a rv e s i c l e s f r o mp l a n t s:c u r r e n t k n o w l e d g e a n do p e nq u e s t i o n sJ I n t JM o l S c i,():基础研究新型溶瘤病毒H S V a b V I S T A的构建及其抗肿
7、瘤作用福建中医药大学附属福州市中医院肿瘤科(福州 )王欣林明星陈全文肖辉煌赵向前基金项目:福州市科技计划社会发展项目医疗项目(A F Z F Z S )福建医科大学附属福州儿童医院新生儿科;福建师范大学南方生物医学研究中心;通信作者,E m a i l:z x q f j n u c o m【摘要】目的探讨携带免疫检查点V I S TA抗体的溶瘤病毒H S V a b V I S TA在小鼠(C B L/J)移植瘤模型中的抗肿瘤效果.方法利用C R I P S R C a s 基因编辑技术制备携带V I S T A分子抗体的H S V a b V I S T A溶瘤病毒;琼脂糖凝胶电泳检测V
8、I S T A抗体的基因组片段大小;蛋白免疫印迹法检测V I S T A抗体表达情况;构建小鼠移植瘤模型,游标卡尺测量溶瘤病毒治疗后瘤体大小的变化,且进行分析.结果成功构建了携带免疫检查点V I S TA抗体的溶瘤病毒H S V a b V I S T A,和野生病毒相比,病毒增殖和裂解癌细胞的能力没有差别,H S V a b V I S T A溶瘤病毒治疗显著缩小了小鼠的肿瘤大小.结论H S V a b V I S T A溶瘤病毒可抑制小鼠结直肠移植瘤的生长.【关键词】V I S TA;溶瘤病毒;H S V ;结直肠癌;C R I P S R C a s【中图分类号】R 【文献标识码】B【文
9、章编号】()结直肠癌在我国的发病率和死亡率一直处于上升趋势,其中免疫抑制型的肿瘤微环境是结直肠癌发生发展的重要因素 .近年来,随着免疫检查点理论的出现,以程序性死亡蛋白及其配体和细胞毒性T淋巴细胞相关蛋白抗体为代表的抗体药物相继被用于肿瘤治疗,使得通过免疫疗法改善肿瘤微环境成为癌症治疗的主要趋势 .T细胞活化V域免疫球蛋白抑制因子(v d o m a i ni mm u n o g l o b u l i ns u p p r e s s o ro fTc e l l a c t i v a t i o n,V I S T A)是B 家族中的一员,近年被证明是一种免疫检查点分子,广泛表达于肿瘤
10、微环境中的免疫细胞胞膜和胞浆中.研究表明,V I S TA分子不仅可以抑制C D 和C D 等淋巴细胞产生I L 和干扰素,还可以诱导原始T淋巴细胞转变成T r e g s而抑制肿瘤浸润淋巴细胞功能.因此,阻断V I S T A信号通路有望通过解除肿瘤局部免疫抑制细胞的功能而增强肿瘤治疗效果.近年来,以H S V 为骨架的溶瘤病毒已成为新兴的肿瘤免疫治疗方向 .溶瘤病毒疗法联合免疫检查点也已成为极具吸引力的肿瘤治疗手段.本研究旨在通过构建携带V I S T A抗体的溶瘤病毒H S V a b V I S TA,探讨其抗肿瘤效果.材料与方法 材 料:结 直 肠 癌 细 胞(MC )、非 洲 绿
11、猴 肾 细 胞(V e r o)和肾上皮细胞(T)(购自上海中科院细胞库);C B L/J小鼠周龄,雄性,S P F级,购自上海斯莱克实验动物 有限 公 司,实 验动 物 生 产 许 可 证 号S C X K(沪),质量合格证号 ;H I S抗 体(A B c l o n a l公司);P B S溶液,胰蛋白酶溶液(G i b i c o公司);牛血清(生工生物工程股份有限公司);DMEM培养福建医药杂志 年月第 卷第期F u j i a nM e dJ,J u n e ,V o l ,N o 基(G i b i c o公司);P B S溶液(北京全式金生物技术有限公司);DM S O(S i
12、 g m a公司).方法:重组病毒制备:将g的V I S TA抗体同源重组片段稳转到H S V 病毒的I C P 敲除载体 T工具细胞中,h后添加野生型H S V .细胞病变后,挑取绿色噬斑,反复感染V e r o细胞,即可得到重组H S V E G F P和H S V a b V I S T A溶瘤病毒.病毒滴度检测:将病毒上清收集,以倍浓度稀释并感染V e r o细胞,h后荧光显微镜下检测最后一个稀释倍数形成单个荧光噬斑的数量.病毒滴度(P F U/m L)平均荧光噬斑数量/稀释倍数/病毒体积.溶瘤病毒表达量和裂解癌细胞的能力检测:溶瘤病毒感染小鼠结肠癌细胞MC ,h后按照基因组提取试剂盒
13、提 取 细 胞 基 因 组,P C R扩 增,琼 脂 糖 凝 胶 电 泳 分 离V I S T A片段;细胞培养皿中加入 L含蛋白酶抑制剂的R I P A细胞裂解液,提取蛋白,取 g蛋白样品跑胶、转膜、封闭,加抗H I S一抗 孵育过夜;加荧光二抗室温孵育h;应用O d y s s e y双色红外激光成像仪观察成像;以不同滴度的病毒感染MC 细胞,h后计算细胞增值形况.细胞存活率()溶瘤病毒处理后细胞数量/空白对照细胞数量 .移植瘤小鼠模型建立及分组给药:培养MC 细胞,取对数生长期的MC 细胞,离心、富集,P B S重悬细胞后按 个细胞接种于每只C B L/J小鼠的背部皮下,大约 d后可见约
14、 mm大小的瘤块.小鼠随机分组,对照组及荷瘤小鼠分为组各只小鼠,分别为P B S对照组、H S V E G F P组、H S V a b V I S T A E G F P(H S V a b V I S T A)组.各组分别瘤内注射P B S、H S V E G F P(P F U)、H S V a b V I S T A(P F U),每隔天治疗次.肿瘤大小和小鼠体质量测量:每隔周用游标卡尺测量肿瘤长、宽、高和对小鼠进行称重,以/长宽高计算瘤的体积.统计学方法:实验数据以G r a p h P a dP r i s m统计软件进行处理.计量资料采用均数标准差表示,组间比较采用单因素方差分析
- 配套讲稿:
如PPT文件的首页显示word图标,表示该PPT已包含配套word讲稿。双击word图标可打开word文档。
- 特殊限制:
部分文档作品中含有的国旗、国徽等图片,仅作为作品整体效果示例展示,禁止商用。设计者仅对作品中独创性部分享有著作权。
- 关 键 词:
- 新型 病毒 HSV ab VISTA 构建 及其 肿瘤 作用
1、咨信平台为文档C2C交易模式,即用户上传的文档直接被用户下载,收益归上传人(含作者)所有;本站仅是提供信息存储空间和展示预览,仅对用户上传内容的表现方式做保护处理,对上载内容不做任何修改或编辑。所展示的作品文档包括内容和图片全部来源于网络用户和作者上传投稿,我们不确定上传用户享有完全著作权,根据《信息网络传播权保护条例》,如果侵犯了您的版权、权益或隐私,请联系我们,核实后会尽快下架及时删除,并可随时和客服了解处理情况,尊重保护知识产权我们共同努力。
2、文档的总页数、文档格式和文档大小以系统显示为准(内容中显示的页数不一定正确),网站客服只以系统显示的页数、文件格式、文档大小作为仲裁依据,平台无法对文档的真实性、完整性、权威性、准确性、专业性及其观点立场做任何保证或承诺,下载前须认真查看,确认无误后再购买,务必慎重购买;若有违法违纪将进行移交司法处理,若涉侵权平台将进行基本处罚并下架。
3、本站所有内容均由用户上传,付费前请自行鉴别,如您付费,意味着您已接受本站规则且自行承担风险,本站不进行额外附加服务,虚拟产品一经售出概不退款(未进行购买下载可退充值款),文档一经付费(服务费)、不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。
4、如你看到网页展示的文档有www.zixin.com.cn水印,是因预览和防盗链等技术需要对页面进行转换压缩成图而已,我们并不对上传的文档进行任何编辑或修改,文档下载后都不会有水印标识(原文档上传前个别存留的除外),下载后原文更清晰;试题试卷类文档,如果标题没有明确说明有答案则都视为没有答案,请知晓;PPT和DOC文档可被视为“模板”,允许上传人保留章节、目录结构的情况下删减部份的内容;PDF文档不管是原文档转换或图片扫描而得,本站不作要求视为允许,下载前自行私信或留言给上传者【自信****多点】。
5、本文档所展示的图片、画像、字体、音乐的版权可能需版权方额外授权,请谨慎使用;网站提供的党政主题相关内容(国旗、国徽、党徽--等)目的在于配合国家政策宣传,仅限个人学习分享使用,禁止用于任何广告和商用目的。
6、文档遇到问题,请及时私信或留言给本站上传会员【自信****多点】,需本站解决可联系【 微信客服】、【 QQ客服】,若有其他问题请点击或扫码反馈【 服务填表】;文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“【 版权申诉】”(推荐),意见反馈和侵权处理邮箱:1219186828@qq.com;也可以拔打客服电话:4008-655-100;投诉/维权电话:4009-655-100。