双歧杆菌乳杆菌三联活菌片联合二甲双胍对2型糖尿病小鼠糖代谢的影响.pdf
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1、14Journal of Xiangnan University(Medical Sciences)Jun.2023 Vol.25 No.2双歧杆菌乳杆菌三联活菌片联合二甲双胍对 2 型糖尿病小鼠糖代谢的影响李海龙,马文萱,谢兆涌,王建腾,高 天,杨 光*(石河子大学药学院,新疆 石河子 832000)摘 要:目的 探讨双歧杆菌乳杆菌三联活菌片联合二甲双胍对 2 型糖尿病(T2DM)小鼠糖代谢的影响。方法 选取昆明小鼠 80 只,给予高脂饲料+10%蔗糖溶液喂养 2 周,采用四氧嘧啶 200 mg/kg 腹腔注射建立糖尿病小鼠模型,并将造模后小鼠的饮水更换为 25%蔗糖溶液。在四氧嘧啶腹腔注射
2、后的第 7 天,测定小鼠餐后 2 h 血糖,以餐后 2 h 血糖水平 7.8 mmol/L 视为模型建立成功。造模成功后的小鼠分别给予 0.9%氯化钠溶液(模型组),二甲双胍(400 mg/kg)(二甲双胍组),二甲双胍联合双歧杆菌乳杆菌三联活菌片剂量低(1107 CFU/kg)(低剂量组)、中(2107 CFU/kg)(中剂量组)、高(3107 CFU/kg)(高剂量组)灌胃,连续 3 周后检测小鼠餐后 2 h 血糖,进行小鼠胰腺组织病理学检查及小鼠肠道菌群的丰富度分析。结果 给药后,与模型组比较,给药组餐后 2 h 血糖均下降(均 P0.05);与二甲双胍组比较,高剂量组的餐后 2 h 血
3、糖下降程度有统计学意义(P0.05);高剂量组对 T2DM 小鼠的胰腺组织病理学评分与模型组比较有统计学意义(P0.05);高剂量组小鼠肠道菌群 Chao1 指数高于低、中剂量组和二甲双胍组且具有统计学意义(P0.05)。结论 与单用二甲双胍比较,高剂量双歧杆菌乳杆菌三联活菌片(3107 CFU/kg)联用二甲双胍能增加小鼠肠道菌的丰富度,更好地保护小鼠胰腺组织,发挥调节 T2DM 小鼠糖代谢作用,从而控制血糖水平。关键词:双歧杆菌乳杆菌三联活菌片;益生菌;肠道菌群;2 型糖尿病;血糖中图分类号:R587.1 文献标志码:A 文章编号:1673-498X(2023)02-0014-06doi:
4、10.16500/ki.1673-498x.2023.02.003Effect of bifidobacterium lactobacillus triple viable tablets combined with metformin on glucose metabolism in type 2 diabetes miceLi Hailong,Ma Wenxuan,Xie Zhaoyong,et al.(School of Pharmacy,Shihezi University,Shihezi,Xinjiang 832000,China)Abstract:Objective To inve
5、stigate the effect of bifidobacterium lactobacillus triple viable tablet combined with metformin on glucose metabolism in type 2 diabetes mice.Methods 80 Kunming mice were fed with high-fat diet plus 10%sucrose solution for 2 weeks.The diabetes mice model was established by intraperitoneal injection
6、 of alloxan 200 mg/kg,and the drinking water of the mice was changed to 25%sucrose solution after modeling.On the 7th day after intraperitoneal injection of alloxan,the 2 h postprandial blood glucose levels of mice were measured,and a 2 h postprandial blood glucose level of 7.8 mmol/L was considered
7、 as a successful model establishment.After successful modeling,mice were given 0.9%sodium chloride solution(model group),metformin(400 mg/kg,metformin group),and a low dose of metformin combined with bifidobacterium lactobacillus triple viable tablets(1107CFU/kg)(low-dose combination therapy group),
8、medium(2107CFU/kg)(medium-dose group of combination medication),high(3107CFU/kg)(high-dose group of combined drugs).After 3 consecutive weeks,the mice were tested for 2 h postprandial blood glucose,histopathological examination of the mouse pancreas and analysis of the abundance of intestinal flora
9、in mice.Results After administration,收稿日期:2023-02-04基金项目:2021 年石河子大学大学生研究训练计划项目(SRP2021149)作者简介:李海龙,男,本科在读。*通信作者:杨 光,男,讲师,E-mail:。15湘南学院学报(医学版)2023 年 6 月第 25 卷第 2 期2 型糖尿病(type 2 diabetesmellitus,T2DM)是由胰岛素分泌和(或)利用缺陷引起的以慢性高血糖为特征的代谢性疾病 1,全球约有 4.22 亿糖尿病患者,糖尿病严重威胁着人类健康,引起了全球的关注 2。糖尿病指空腹血糖值高于 6.1 mmol/L
10、或餐后 2 h 血糖值高于 7.8 mmol/L,同时伴随饮水增多、排尿增多、进食增多且体重消瘦的“三高一低”特征 3。近年来的研究 4 表明,2 型糖尿病与人体肠道菌群的组成和结构有关。白钰等 5 研究发现 T2DM 病人粪便中柔嫩梭菌类、肠球菌属、大肠埃希菌属高于健康组,但双歧杆菌属、拟杆菌属、乳酸杆菌属低于健康组,提示肠道菌群失调特别是双歧杆菌的减少可能与糖尿病发生发展相关。同时,肠道菌群的失衡可导致内毒素的增加,而引起炎症细胞因子的释放进而会导致氧化应激,从而导致胰岛细胞受损,最终导致糖尿病 6。直接口服双歧杆菌三联活菌,可补充肠道双歧杆菌丰度,调节肠道菌群,进而改善胰岛素抵抗和血糖水
11、平 7。益生菌治疗糖尿病的一项重要机制是促进了肠道内的短链脂肪酸(short-chain fatty acids,SCFAs)的产生,进而影响内分泌激素的分泌,调控体内血糖的水平 8。Yadav 等 9 的一项研究证实了某些益生菌通过增加丁酸的产生来诱导胰高血糖素样肽-1(glucagon-like peptide-1,GLP-1)分泌的作用机制,而 GLP-1 的增加不仅能促进胰岛素分泌,抑制胰高血糖素分泌,并且可以导致胃排空延迟,食欲和摄食量减少 10。因此,本研究以高糖高脂饮食联合四氧嘧啶诱导昆明小鼠 T2DM 为模型,利用不同剂量的双歧杆菌乳杆菌三联活菌片联合二甲双胍治疗 T2DM 小
12、鼠,观察其对T2DM 小鼠糖代谢的影响。1 材料与方法1.1 药物双歧杆菌乳杆菌三联活菌片(内蒙古双奇药业股份有限公司,药物批号 2021011322),每克双歧杆菌乳杆菌三联活菌片含长双歧杆菌不低于 1.0107 CFU、保加利亚乳杆菌不低于 1.0106 CFU、嗜热链球菌不低于 1.0106 CFU。其中起主要作用的为长双歧杆菌,其余两种菌株为辅助菌种。1.2 动物昆明雄性小鼠 80 只,67 周龄,体质量(302)g,购自新疆维吾尔自治区动物研究中心,动物许可证号 SCXK(新)2016-0003。动物饲养于温度(232)、湿度 40%60%的环境中,自由饮水。1.3 试剂四氧嘧啶(A
13、lloxan,ALX,南京都莱生物公司)、盐酸二甲双胍片(中美上海施贵宝制药有限公司)、0.9%氯化钠注射液(北京费森尤斯卡比医药有限公司)、蔗糖(芜湖沐晟食品有限公司)。基础饲料、高糖高脂饲料:66.5%(质量分数,后同)基础饲料、20%蔗糖、10%猪油、2.5%胆固醇、1%胆酸钠(南京市江宁区青龙山动物繁殖场)。无水乙醇、二甲苯、切片石蜡、HE 染色剂(上海跃腾生物技术有限公司)。1.4 仪器血糖仪(三诺生物传感股份有限公司)、血糖试纸(三诺生物传感股份有限公司)、分析天平、灌胃针、注射器、Leica RM2245 型半自动切片机(大连瀚高贸易有限公司)、Pannoramic MIDI 型
14、组织切片扫描仪(大连瀚高贸易有限公司)。1.5 方法1.5.1 建立糖尿病小鼠模型 昆明小鼠适应性喂养1 周,随机选取 8 只小鼠作为空白组,给予基础饲料+正常饮水喂养;其余 72 只小鼠用于建模,给予高脂高糖饲料+10%蔗糖溶液。喂养前测量血糖作为基础血糖,喂养 2 周后,模型组每只小鼠用四氧嘧啶compared with the model group,the decrease in blood glucose at 2 hours after meal in the administration group was statistically significant(P0.05);com
15、pared with the metformin group,the high-dose group had a lower and statistically significant 2-hour postprandial blood glucose decrease(P0.05);the histopathology examination and histopathological score analysis of the mouse pancreas showed that the combination of high-dose of drugs had the best prot
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