尿液中环境内分泌干扰物暴露水平检测方法建立及应用.pdf
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1、第 卷第 期 年 月健 康 研 究.收稿日期:基金项目:绍兴市卫生计生科技计划项目()作者简介:周芳()女浙江绍兴人本科主任医师临床观察:./.周芳黄芳刘杰等.尿液中环境内分泌干扰物暴露水平检测方法建立及应用.健康研究():.尿液中环境内分泌干扰物暴露水平检测方法建立及应用周 芳黄 芳刘 杰欧阳械华马 良陈 佳(.诸暨市中医医院 儿科浙江 绍兴.杭州汉库医学检验所有限公司浙江 杭州)摘要:目的 建立尿液中 种环境内分泌干扰物()暴露水平的超高效液相色谱串联质谱检测方法并应用于可能 暴露的低龄人群的尿液样本检测以助于临床诊断及暴露预防 方法取 尿液样本用缓冲盐调节 值为 加入 内标在 条件下经
2、葡萄糖醛酸苷酶酶解 酶解产物进行酸化、乙酸乙酯萃取取乙酸乙酯层冻干用甲醇复溶使用 色谱柱以 乙酸/水溶液 氨水/乙腈溶液为流动相梯度洗脱使用 离子源负离子模式进行选择性离子扫描应用所建立方法对 例 岁有临床症状人群的样本进行检测 结果 种环境内分泌干扰物在 /浓度范围内均有良好的线性相关性(均 )检出限(/)为 /定量限(/)为 /检测结果重复性(连续 天)值均小于 低、中、高浓度加标回收率在 之间 临床样本的、检出率为 检出率为 检出率为 检出率为 结论所建立方法具有样本使用量少、检测灵敏度高、方法重复性准确性良好、分析时间短、分析通量高的优势适用于临床样本暴露筛查检测关键词:环境内分泌干扰
3、物超高效液相色谱串联质谱尿液暴露水平中图分类号:文献标志码:文章编号:()(.):().()././.(.)./.(/)./(/)./.().:环境内分泌干扰物()是指能够干扰人体内分泌系统的外源性化学物质能被人体吸收并且会通过食物链不断富集导致人的生殖系统、内分泌系统、神经系统、免疫系统等出现多种病变、癌变、畸变对人体健康危害极大尤其是婴儿、幼儿、儿童可能造成不可逆的身体损害例如性早熟、肥胖、发育迟缓等环境内分泌干扰物暴露已成为人们日益关注的重大环境问题因此建立环境内分泌干扰物质的快速准确检测方法尤为重要目前关于人体 暴露水平检测的文献报道较多但存在检测物质种类较少、实际样本检测数量少、未实
4、际应用于临床等问题 本文建立方法同时检测尿液中 种 包括防腐剂、邻苯二甲酸酯类化合物、双酚类化合物、烷基酚类化合物、激素类药物残留涵盖目前主要暴露 类别中的主要物质并应用于 例 岁人群临床尿液样本的检测以期为临床诊断及暴露预防提供依据 材料与方法 主要试剂和仪器 邻苯二甲酸甲酯、邻苯二甲酸丁酯、邻苯二甲酸乙基己基酯、双酚 、双酚、辛基酚、壬基苯酚、己烯雌酚、乙炔基雌二醇、对羟基苯甲酸丁酯、双酚、邻苯二甲酸甲酯(德国 公司纯度均大于)邻苯二甲酸乙酯(美国 公司纯度 )对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丙酯(法国 公司纯度均大于)对羟基苯甲酸乙酯、双酚(加拿大 公司纯度均大于)辛基酚
5、、乙炔雌二醇(加拿大 公司纯度均大于)仪器条件及参数 定量检测采用 超高效液相色谱串联质谱仪(美国安捷伦公司美国 公司)液相色谱条件:色谱柱(美国沃特斯公司)流动相为 乙酸/水溶液 氨水/乙腈溶液进样量为 流速为 /柱温为 流动相 质谱条件:电喷雾离子源()负离子检测模式()()()()()()检测方式 质谱检测参数如表 所示 第 期 周 芳等:尿液中环境内分泌干扰物暴露水平检测方法建立及应用表 种环境内分泌干扰物质谱参数 化合物名称母离子/(/)子离子/(/)去簇电压/碰撞能/对羟基苯甲酸甲酯()/对羟基苯甲酸乙酯()/对羟基苯甲酸丙酯()/对羟基苯甲酸丁酯()/邻苯二甲酸甲酯()/邻苯二甲
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