液相色谱法测定核桃中磷脂酰胆碱含量_林淼.pdf
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1、上海电气技术 ,()上海崇明农产品区域公共品牌全产业链标准体系构建项目(编号:)收稿时间:通信作者简介:秦淑平(),女,硕士,高级农艺师,主要从事农产品安全与营养研究工作液相色谱法测定核桃中磷脂酰胆碱含量林淼陈磊时文兴秦淑平上海市农业科学院 农产品质量标准与检测技术研究所上海 上海市奉贤区农业技术推广中心上海 摘要:提出液相色谱法测定核桃中磷脂酰胆碱含量,通过试验确定具体的提取方法、提取时间、提取频率、乙醇含量。通过线性试验和加标回收试验,这一方法在 范围内具有良好的线性关系,相关因数为 ,检出限为 ,添加回收率为 ,相对偏差不大于,效果良好。关键词:液相色谱;核桃;磷脂酰胆碱;检测中图分类号
2、:文献标志码:文章编号:():,:;项目背景核桃富含脂肪、蛋白质、脂肪酸、氨基酸及矿质元素等多种营养成分,具有较高的食用价值和医疗保健价值。多项研究表明,核桃在预防和缓解心脑血管疾病、糖尿病、肥胖症方面具有重要药用价值和保健功能。随着人们生活水平的提高和社会人口结构的老龄化,消费者对食物的营养健康需求日益强烈。同时,我国核桃产业发展迅速,核桃产量位居世界第一。由此可见,深入研究核桃品质特色,挖掘核桃营养品质对人体健康的意义,对满足消费者的健康需求,推动核桃产业再发展具有重要意义。目前,国内外针对核桃营养成分的分析研究集中在主要营养成分的定量分析和影响因素方面,针对特色营养成分的系统研究则较少,
3、在核桃产品品牌升级中无法避免同质化问题。核桃主要营养成分包括粗脂肪、蛋白质、淀粉、总糖、碳水化合物,以及钾、钙、镁、铁等元素,影响因素包括品种、成熟度、贮藏条件、保鲜处理等。卵磷脂是近年来备受关注的功能营养素,在核桃的营养成分分析研究中曾有报道,但并不完善。卵磷脂被誉为与蛋白质、维生素并列的第三营养素,有必要建立核桃中磷脂酰胆碱含量的检测方法。试验材料核桃采集自新疆种植基地。色谱柱采用 柱,柱长 ,内径,粒径。流动相为乙醇、乙腈、色谱纯甲醇。试验中采用磷脂酰胆碱标准品,所用水均为超纯水,电阻率高于 。采用 注射器和 有机相 ,()上海电气技术滤膜。试验中,主要采用的仪器设备包括配紫外检测器的
4、型高效液相色谱仪、型冷冻高速离心机、型电子天平、型超纯水仪、涡旋混合器、型氮吹仪。试验方法 定量分析方法液相色谱法可以将磷脂酰胆碱和杂质峰完全分开,并且灵敏度高,定性准确,因此选用液相色谱法作为定量分析方法。色谱柱依据磷脂酰胆碱的结构特征和各类色谱柱的分离特点,选择 柱。在合适的分离条件下,磷脂酰胆碱的色谱峰能获得良好的峰宽比例,仪器响应最佳。流动相选择 柱色谱柱,流动相若仅选择乙腈和甲醇,则无论如何调整两者的比例,均无法使磷脂酰胆碱和杂质峰完全分离。在流动相中加水,可使磷脂酰胆碱和杂质峰得到较好的分离效果。试验结果表明,流动相中乙腈、甲醇、水的体积配比为 时,目标峰有良好的峰宽比例,仪器响应
5、最佳。色谱条件检测波长为 ,流动相流速为 ,柱温为,进样量为。样品处理条件 除脂因为核桃样品一般含有 的油脂,有可能会影响磷脂酰胆碱的提取及分析测定,因此称取 核桃样品共 份,其中份核桃样品称量在玻璃坩埚中,各用 丙酮淋洗除脂,除脂后在通风橱中晾干,转移至锥形瓶中继续后续提取步骤。另外份核桃样品称量在锥形瓶中,不做除脂处理。在这 份核桃样品中准确加入 乙醇,超声提取,离心 ,吸取上清液 氮吹,然后加入 色谱纯甲醇复溶,过 有机相滤膜上机。核桃样品除脂考察结果见表。由表可知,是否除脂的提取得率基本没有区别,平均值相差仅为,但是提取过程中不除脂表核桃样品除脂考察结果样品编号样品质量是否除脂磷脂酰胆
6、碱含量()丙酮除脂 丙酮除脂 丙酮除脂 丙酮除脂 丙酮除脂 丙酮除脂 不除脂 不除脂 不除脂 不除脂 不除脂 不除脂 会减少操作步骤,提高提取效率,因此在核桃样品的前处理过程中不需要进行除脂处理。提取方式核桃样品的提取方式主要为超声处理、涡旋提取、振荡提取。试验中,称取 核桃样品共 份,各选份样品分别采取超声处理、涡旋提取、振荡提取,提取时间均为 。提取后 离心 ,吸取上清液 氮吹,然后加入 色谱纯甲醇复溶,过 有机相滤膜上机。核桃样品提取方式考察结果见表。由表可知,三种提取方式中,超声提取和涡旋提取的提取得率较高,振荡提取的提取得率则最低。振荡提取时,核桃样品不能完全分散,需要用玻璃棒搅拌,
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