血液透析、腹膜透析患者预后与肠道菌群的相关性分析_张红.pdf
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1、12贺媛,代欣,梁雅慧,等.吞咽造影定量分析对卒中后吞咽障碍及功能的评估价值J.分子诊断与治疗杂志,2020,12(5):651-655.13王黎帆,刘建军,张雁,等.重复经颅磁刺激治疗脑瘫患儿的疗效观察J.中国康复,2020,35(2):91-94.14汪萃,瞿广玲,毛鹭,等.基于短视频及影像的微课联合翻转课堂教学在脑卒中偏瘫患者早期康复护理 中的应用J.中华医学教育探索杂志,2021,20(10):1215-1218.15林国清,郑薏,姚跃英,等.康复治疗学儿童康复方向专业课程体系的理论构建与实践研究J.中华医学教育探索杂志,2022,21(8):1000-1003.16Parikh TK
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4、2.(收稿日期:2022-10-18;修回日期:2023-02-02)(本文编辑:彭 羽)血血液液透透析析、腹腹膜膜透透析析患患者者预预后后与与肠肠道道菌菌群群的的相相关关性性分分析析张 红1,丁涵露1,2,陈 瑾1,2(1.西南医科大学附属医院临床医学院,四川 泸州 646000;2.四川省医学科学院四川省人民医院,四川 成都 610072)摘要 目的 探讨血液透析(HD)患者、腹膜透析(PD)患者及健康者肠道菌群的变化。方法 收集 36 例 HD 患者、27例 PD 患者及 57 例健康对照者的粪便,采用 16SrRNA 测序,评估其粪便微生物群组成的差异。结果 与对照组比较,PD 组、H
5、D 组患者肠道菌群总数显著降低(P0.01)。PD 组与对照组、HD 组与对照组之间的 chao 指数比较,差异有统计学意义(P0.001),HD 组与对照组群落多样性差异有统计学意义(P0.01),对照组的群落多样性更高。普雷沃特拉菌水平与透析患者生存时间呈负相关(P=0.04)。结论 PD、HD 患者的肠道菌群发生了改变,HD 患者的肠道菌群变化较 PD 患者更为显著。关键词 慢性肾脏病;肠道菌群;血液透析;腹膜透析中图分类号 R574;R378 文献标志码 A 文章编号 1672-6170(2023)03-0070-05Correlation analysis between progn
6、osis and intestinal flora of patients with hemodialysis andperitoneal dialysis ZHANG Hong1,DING Han鄄lu1,2,CHEN Jin1,2(1.School of Clinical Medicine,Southwest Medical University,Luzhou 646000,China;2.Sichuan Academy of Medical Sciences&SichuanProvincial Peoples Hospital,Chengdu 610072,China)Correspon
7、ding author CHEN JinAbstract Objective To investigate the changes in the intestinal flora of hemodialysis(HD)patients,peritoneal dialysis(PD)patients,and healthy people.Methods The feces of 36 HD patients,27 PD patients and 57 healthy controls were collected.The differences in fecal microbiota compo
8、sition were evaluated by 16SrRNA sequencing.Results Compared with the healthy controlgroup,the total number of intestinal flora in the PD group and the HD group was significantly reduced(P0.01).There weresignificant differences in chao index between the PD and the control groups and between the HD g
9、roup and the control group(P0.001).There were significant differences in bacterial community diversity between the HD group and the control group(P0.01).The control group had higher community diversity.There was an inverse correlation between Pretiella and survival time(P=0.04).Conclusions The intes
10、tinal flora of PD and HD patients are changed,and the intestinal flora changes in HD patients are moresignificant than those in PD patients.Key words Chronic kidney disease;Intestinal flora;Hemodialysis;Peritoneal dialysis 慢性肾脏病是指多种原因导致的慢性肾脏结构和功能障碍(肾脏损害病史大于 3 个月),其中包括肾小球滤过率(glomerular filtration rat
11、e,GFR)正常和不正常的病理损伤、血液或尿液成分异常,及影像学检查异常,或不明原因 GFR60 ml/min1.73m2超过 3 个 月。中 国 慢 性 肾 脏 病(chronickidney disease,CKD)患病率为10.8%1。CKD 5 期的患者采用肾脏替代治疗,但研究表明,在治疗期间依然存在毒素潴留的问题2。肠道菌群是一个具有营养和保护功能的动态共生生态系统,与宿主07 实用医院临床杂志 2023 年 5 月第 20 卷第 3 期 的代谢系统保持着持续的相互作用。病理情况下,肠道菌群的失衡,某些细菌过度生长,慢性激活免疫系统,从而引发疾病3.4。透析患者和健康对照组的肠道菌群
12、在组成和功能存在差异,然而这些结果 并 不 一 致5-8。本 研 究 比 较 了 血 液 透 析(hemodialysis,HD)、腹膜透析(peritoneal dialysis,PD)患者和健康对照者的肠道菌群差异,并进行了肠道菌群与透析患者预后相关性分析。1 资料与方法1.1 一般资料 纳入 2005 年 1 月至 2022 年 6 月在四川省人民医院随访的患者 63 例。纳入标准:在四川省人民医院随访的 HD 及 PD 患者,治疗时间大于 3 个月。排除标准:合并恶性肿瘤、肝硬化、肠手术、肠易激综合征的患者;标本采集前 1 周使用益生菌、益生元或抗生素;孕妇或肾移植受者;素食者或纯素食
13、者的患者。本研究经我院伦理委员会审核通过(编号:2018195),并由患者签署临床标本收集检测知情同意书。依据患者的治疗模式分为 PD 组 27 例、HD 组 36 例。对照组为 2018 年 6月至 2022 年 6 月于四川省人民医院体检中心体检的健康人群 57 例。所有患者随访至 2022 年 6 月或患者死亡或失访结束。1.2 方法1.2.1 一般资料采集 收集患者人口学资料,包括开始腹透时的年龄、性别、CKD 的原因。血红蛋白、血浆白蛋白、尿素、血清肌酐、尿素氮、甘油三酯、胆固醇、估算肾小球滤过率。1.2.2 粪便样本收集 在粪便标本采集前 7 天,禁止使用益生菌或食用酸奶。保持粪便
14、中部均匀部分约 1 克,避免食物残留。将粪便收集到收集管中,4 小时内放入-80 冰箱中。女性避免进行生理周期取样。1.2.3 肠道菌群检测 对 DNA 样本进行定量,并选择16S rRNA 的 V3-V4 高变区进行 PCR 扩增。使用 Trimmomatic(v 0.36)得到原始数据,然后用FLASH 软件(v1.2.11)拼接双端序列,要求序列重叠至少10 bp,采用滑动窗口法对序列做质量过滤,去除接头污染和低质量数据,将重叠的成对端读数合并到标签中(标签与 OTU 的序 列 相 似 性 为97%),使用核糖体数据库给 OTU 代表序列分配分类等级。最后,基于 OTU 和分类等级进行
15、多样性、多样性以及不同物种的筛选进行了分析。1.3 统计学方法 使用 SPSS 26.0 统计软件包进行数据分析。正态分布计量资料用均数标准差表示,偏态分布计量数据以中位数(四分位间距)表示,三组以上比较采用 ANOVA 检验,多重检验采用Bonferroni 分析。采用非参数检验(Mann Whitney U检验或 Kruskal-Wallis)对非正态分布的参数进行分析。计数资料以百分率表示,比较采用卡方检验。P0.05),而 HD 与 PD组的血肌酐、血尿素氮、血尿酸值显著升高(均 P0.001)。对照组的 BMI、胆固醇高于 HD 组与 PD 组(P0.05)。PD 组的甘油三酯高于
16、HD 组及对照组(P=0.008)。见表 1。表 1 PD 组、HD 组与对照组的一般资料比较指标HD 组(n=36)PD 组(n=27)对照组(n=57)统计量P 值年龄(岁)53.8914.0852.2614.2954.895.33F=0.5380.586性别(男/女,n)18/1819/831/262=2.1330.144BMI(kg/m2)22.273.1921.282.14*23.462.41F=6.7730.002肌酐(mol/L)882.4(780.5,1062.7)*1138.6(987.8,1305.9)*95.49(85.45,106.50)H=91.7930.001尿素氮
17、(mmol/L)22.42(20.29,27.43)*17.75(14.95,21.62)*5.52(4.62,6.48)H=20.8170.001尿酸(mol/L)451(392,532)*#403(347,448)378(307,432)H=90.3230.001甘油三酯(mmol/L)1.981.33*2.271.47*1.460.86F=4.9790.008胆固醇(mmol/L)3.811.07*#4.741.34*5.530.93F=26.550.0001*与对照组比较,P0.05;#与 PD 组比较,P0.05基金项目 四 川 省 科 技 厅 重 点 研 发 项 目(编 号:202
18、0YFS0429),成都市科技局项目(编号:2022-HM07-00049-SN),天府万人计划天府名医项目编号:TF001(2018)通讯作者陈 瑾2.2 肠道菌群类别分析 如图 1 所示,不同颜色代表不同组,每个圆圈内的数字表示各组中的 OTU 数量,重叠区域表示各组中的共同 OTU 集合。三组所共有的 OTU 数为 645,血透组、腹透组、对照组的17 实用医院临床杂志 2023 年 5 月第 20 卷第 3 期 OTU 数分别为 916、727、1405,其中透析组的 OTU数明显低于对照组,腹透组与血透组之间差距不大PCA 构建二维图(图 2),显示血透组及腹透组与对照组之间距离较远
19、,第一主成分的贡献为 12.04%,第二主成分的贡献为 8.98%。2.3 组及组间 多样性分析 健康对照组与透析患者相比,Sobs、Chao、Ace、Shannon 指数显著升高,差异有统计学意义(P 均小于 0.05)。说明健康对照组的群落均匀性和物种的多样更高,而 PD 组与HD 组的物种丰度无明显差异。见表 2。图 1 不同组别之间的 Venn 图 图 2 不同组别 OTU 丰度的主成分分析表 2 各组及组间 多样性比较 多样性指数血透组腹透组健康对照组FPSobs193.853.7*194.454.7*264.357.923.9560.0001Chao222.958.3*224.85
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