蚊母树叶瘿蚜分子鉴定及种群遗传分化研究_徐湘潭.pdf
《蚊母树叶瘿蚜分子鉴定及种群遗传分化研究_徐湘潭.pdf》由会员分享,可在线阅读,更多相关《蚊母树叶瘿蚜分子鉴定及种群遗传分化研究_徐湘潭.pdf(4页珍藏版)》请在咨信网上搜索。
1、湖南农业科学(HUNAN AGRICULTURAL SCIENCES)2023 年 2 月16-生物技术 遗传育种湖南农业科学(HUNAN AGRICULTURAL SCIENCES)引用格式:徐湘潭,何衍彪,李意成,等.蚊母树叶瘿蚜分子鉴定及种群遗传分化研究 J.湖南农业科学,2023(2):16-19.DOI:10.16498/ki.hnnykx.2023.002.0042023(2):16-19蚊母树(Distylium racemosum Sieb.et Zucc)隶属于金缕梅科蚊母树属,是一种常绿灌木或中乔木,在华南、华中地区常作园林绿化植物,多年来一直受到蚜虫的危害,在叶片上形成大
2、量的虫瘿。前人研究发现,危害蚊母树引起虫瘿的主要是蚊母新胸蚜/矢日本扁蚜(Neothoracaphis yanonis Matsumura)和杭州新胸蚜(Neothoracaphis hangzhouensis Zhang)1-2。这 2 种蚜虫形态、习性都非常相似,后者已被作为前者的次异名处理3。据报道,湖南长沙、吉首等地危害蚊母树引起叶片虫瘿的是蚊母新胸蚜4-5,江苏南京市蚊母树叶片上的虫瘿主要由杭州新胸蚜造成,其次是蚊母新胸蚜2,6。安徽省合肥市杭州新胸蚜同时危害蚊母树(D.racemosum)和杨梅叶蚊母树(Distylium myricoides Hemsl),引起虫瘿7。虽然湖南吉
3、首、安徽合肥等地都有蚊母树叶片虫瘿的相关报道,但关于蚊母树叶瘿蚜形态学、分子鉴定的文章鲜见报道,关于各地蚊母树叶瘿蚜种群之间亲缘关系或遗传分化的研究也未见报道。为了快速鉴定湖南娄底等地的蚊母树叶瘿蚜类别,明确蚊母树叶瘿蚜各地理种群的遗传距离和亲缘关系,笔者收集了湖南、重庆、江苏、浙江 4 地区的蚊母树叶瘿蚜标本,提取其 DNA 进行线粒体 COI、COII 蚊母树叶瘿蚜分子鉴定及种群遗传分化研究 徐湘潭1,何衍彪1,2,李意成1,李佳1,刘建宏1(1.湖南人文科技学院农业与生物技术学院,湖南省高校农作物有害生物绿色防控重点实验室,湖南 娄底 417000;2.娄底市农业科学研究所,湖南 娄底
4、417000)摘要:为了明确我国蚊母树叶片虫瘿致瘿蚜虫的种类及其种群遗传分化情况,从湖南、重庆、江苏、浙江 4 地区的蚊母树叶瘿蚜标本中提取 DNA 进行线粒体 COI、COII 基因片段序列分析,结合 GenBank 同源序列进行了分子鉴定,并构建了基于COI、COII 基因序列的蚜虫分子系统进化树。结果表明:南京中山植物园蚊母树叶瘿蚜基因片段序列与湖南省长沙、娄底、永州种群的完全相同,即共享 1 个单倍型;重庆、杭州地理种群存在一定的遗传分化,但仍以长沙、南京标本的单倍型为主,且各单倍型样本之间的遗传距离非常小。序列分析结果支持 4 地区 6 个城市的蚊母树叶瘿蚜均为蚊母新胸蚜(Neoth
5、oracaphis yanonis Matsumura),杭州新胸蚜(N.hangzhouensis)是蚊母新胸蚜的同物异名。关键词:蚊母树;叶瘿蚜;分子鉴定;同物异名中图分类号:S433.3文献标识码:A文章编号:1006-060X(2023)02-0016-04Molecular Identification and Genetic Differentiation of the Leaf Gall-Inducing Aphids of Distylium racemosum XU Xiang-tan1,HE Yan-biao1,2,LI Yi-cheng1,LI Jia1,LIU Jian
6、-hong1(1.College of Agriculture and Biotechnology,Hunan University of Humanities,Science and Technology;Key Laboratory of Green Control of Crop Pests in Hunan Higher Education,Loudi 417000,PRC;2.Loudi Institute of Agricultural Science,Loudi 417000,PRC)Abstract:To identify the species of leaf gall-in
7、ducing aphids of Distylium racemosum in China and explore the population genetic differentiation,the COI and COII gene sequences of the leaf gall-inducing aphids of Distylium racemosum from Hunan,Chongqing,Jiangsu and Zhejiang were obtained by PCR amplification,and then were sequenced and compared w
8、ith the homology sequences from GenBank.The phylogenetic trees based on COI and COII gene sequences of aphids were constructed by the NJ method.The results have shown that the samples from Nanjing,Changsha,Loudi and Yongzhou share the same unique haplotype.There is a certain genetic differentiation
9、in the populations from Chongqing and Hangzhou,but the haplotype of the most samples is the same as that of Changsha and Nanjing populations,and the genetic distances among different haplotypes are extremely small.The results of sequence analyses reveal that all samples from six cities of four regio
10、ns are Neothoracaphis yanonis Matsumura whose synonym is Neothoracaphis hangzhouensis Zhang.Key words:Distylium racemosum;leaf gall-inducing aphid;molecular identification;synonym收稿日期:2022-10-18 基金项目:湖南人文科技学院博士科研启动费项目(82500250)作者简介:徐湘潭(2000),女,湖南常德市人,硕士研究生,研究方向为资源利用与植物保护。通信作者:何衍彪徐湘潭等:蚊母树叶瘿蚜分子鉴定及种群遗传
11、分化研究17-生物技术 遗传育种基因片段序列分析,结合 GenBank 同源序列进行了分子鉴定,并构建了基于 COI、COII 基因序列的蚜虫分子系统进化树。1材料与方法1.1试验材料采集的蚊母树叶瘿蚜基本信息见表 1,将标本保存在 75%酒精中。COI 引物:上游,5-GGTCAACA AATCATAAAGATATTGG-3;下游,5-TAAACTT CAGGCTGACCAAAAAATCA-3。COII 引物:上游,5-CATTCATATGCAGAATTACC-3;下游,5-GAGA TCGTTACTTTGCT TTT-3。引物由武汉天一辉远生物科技有限公司合成。1.2试验方法1.2.1总
12、DNA 提取参照何衍彪等8的方法,采用 TIANamp Genomic DNA Kit 血液/细胞/组织基因组 DNA 提取试剂盒进行样本总 DNA 的提取。1.2.2PCR 扩增及序列测定PCR 反应体系(25 L):10Buffer 2.5 L,MgCl2(25 mmol/L)1.75 L,dNTP 2.25 L,上、下游引物(10 pmol/L)各1.5 L,Taq DNA 聚 合 酶(5 U/L)0.2 L,模 板DNA 23 L,剩余体积由 ddH2O 补齐。PCR 反应条件:95预变性 5 min;95变性 1 min,52退火1 min,72延伸 1 min,34 个热循环;72
13、延伸 10 min。PCR 反应以 ddH2O 代替模板 DNA 作空白对照。PCR 扩增产物送武汉天一辉远生物科技有限公司进行双向测序。1.2.3DNA 序列数据处理用 DNAstar 软件中的Editseq 程序进行序列编辑,用 Clustal X 2.0 软件中的 Align 程序进行 DNA 同源序列比对,并人工核对校正。从 GenBank 中下载了相关物种的 COI、COII同源序列共 18 条(表 2)一起进行比较分析。通过MEGA 6.0 软件计算出各叶瘿蚜种群间的遗传距离,以 NJ 邻接法构建进化树。2结果与分析2.1我国蚊母树叶瘿蚜的发生情况及形态蚊母树以前是一种广泛分布(或
14、种植)的园林绿化植物,目前在湖南、重庆比较常见,其他省份很多城市都已经不再种植。叶瘿蚜在我国蚊母树各种植区(生长区)均有发生,除了危害蚊母树外还可以危害杨梅叶蚊母树,但几乎不危害小叶蚊母树Distylium buxifolium(Hance)Merr。在湖南,3 月蚊母树虫瘿初为黄绿色凸起,后变成紫红色球状虫瘿,内有 1 头橙黄色干母成虫和数量不等的黄色迁移蚜若虫。4月上旬虫瘿基本成型,内常有数十头橘黄色至橙黄色 3 龄若虫,4 月中下旬开始出现迁移蚜成虫。迁移蚜成虫卵圆形,体长1.62.0 mm,头、胸棕色至黑褐色,腹部橙黄色;触角 5 节;前翅宽阔,翅痣短,中脉一分叉,后翅有斜脉,静止时翅
- 配套讲稿:
如PPT文件的首页显示word图标,表示该PPT已包含配套word讲稿。双击word图标可打开word文档。
- 特殊限制:
部分文档作品中含有的国旗、国徽等图片,仅作为作品整体效果示例展示,禁止商用。设计者仅对作品中独创性部分享有著作权。
- 关 键 词:
- 母树 叶瘿蚜 分子 鉴定 种群 遗传 分化 研究 湘潭
1、咨信平台为文档C2C交易模式,即用户上传的文档直接被用户下载,收益归上传人(含作者)所有;本站仅是提供信息存储空间和展示预览,仅对用户上传内容的表现方式做保护处理,对上载内容不做任何修改或编辑。所展示的作品文档包括内容和图片全部来源于网络用户和作者上传投稿,我们不确定上传用户享有完全著作权,根据《信息网络传播权保护条例》,如果侵犯了您的版权、权益或隐私,请联系我们,核实后会尽快下架及时删除,并可随时和客服了解处理情况,尊重保护知识产权我们共同努力。
2、文档的总页数、文档格式和文档大小以系统显示为准(内容中显示的页数不一定正确),网站客服只以系统显示的页数、文件格式、文档大小作为仲裁依据,平台无法对文档的真实性、完整性、权威性、准确性、专业性及其观点立场做任何保证或承诺,下载前须认真查看,确认无误后再购买,务必慎重购买;若有违法违纪将进行移交司法处理,若涉侵权平台将进行基本处罚并下架。
3、本站所有内容均由用户上传,付费前请自行鉴别,如您付费,意味着您已接受本站规则且自行承担风险,本站不进行额外附加服务,虚拟产品一经售出概不退款(未进行购买下载可退充值款),文档一经付费(服务费)、不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。
4、如你看到网页展示的文档有www.zixin.com.cn水印,是因预览和防盗链等技术需要对页面进行转换压缩成图而已,我们并不对上传的文档进行任何编辑或修改,文档下载后都不会有水印标识(原文档上传前个别存留的除外),下载后原文更清晰;试题试卷类文档,如果标题没有明确说明有答案则都视为没有答案,请知晓;PPT和DOC文档可被视为“模板”,允许上传人保留章节、目录结构的情况下删减部份的内容;PDF文档不管是原文档转换或图片扫描而得,本站不作要求视为允许,下载前自行私信或留言给上传者【自信****多点】。
5、本文档所展示的图片、画像、字体、音乐的版权可能需版权方额外授权,请谨慎使用;网站提供的党政主题相关内容(国旗、国徽、党徽--等)目的在于配合国家政策宣传,仅限个人学习分享使用,禁止用于任何广告和商用目的。
6、文档遇到问题,请及时私信或留言给本站上传会员【自信****多点】,需本站解决可联系【 微信客服】、【 QQ客服】,若有其他问题请点击或扫码反馈【 服务填表】;文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“【 版权申诉】”(推荐),意见反馈和侵权处理邮箱:1219186828@qq.com;也可以拔打客服电话:4008-655-100;投诉/维权电话:4009-655-100。