唾液乳杆菌在类风湿性关节炎疾病进展中的作用_袁飞.pdf
《唾液乳杆菌在类风湿性关节炎疾病进展中的作用_袁飞.pdf》由会员分享,可在线阅读,更多相关《唾液乳杆菌在类风湿性关节炎疾病进展中的作用_袁飞.pdf(6页珍藏版)》请在咨信网上搜索。
1、目的 探讨唾液乳杆菌在类风湿关节炎(,)发病中的作用及其机制方法选取 只 级雄性 大鼠,将大鼠分为健康对照组、模型组(胶原诱导型(,)大鼠模型)、唾液乳杆菌干预组、甲氨蝶呤组,每组各 只;观察大鼠外观形态,行 评分、足跖容积测量及 染色,应用宏基因检测乳杆菌种类及丰富度结果与模型组相比,唾液乳杆菌干预可明显改善 大鼠组织病理状态,减低关节炎严重程度,改善关节肿胀;与模型组相比,唾液乳杆菌干预组和甲氨蝶呤组的相似度、丰富度()、均匀度()和 指数()均显著升高结论 唾液乳杆菌对类风湿性关节炎可能有一定的治疗效果和预防作用,可为类风湿性关节炎的治疗提供新思路关键词:大鼠;类风湿性关节炎;唾液乳杆菌
2、中图分类号:文献标志码:收稿日期:基金项目:东莞市社会科技发展重点项目()作者简介:袁 飞(),男,主任医师,硕士生导师,主要从事肠道菌群与自身免疫性疾病相关研究,:;通信作者:黄暖琴(),女,主治医师,主要从事肠道菌群与自身免疫性疾病相关研究,:,(;,):()(,),(),(),(),:;类风湿性关节炎(,)是一种慢性全身性自身免疫性疾病,主要侵犯全身各处关节,呈多发性和对称性,由此引起关节软骨和关节囊的破坏,最后导 致 关 节 强 直 畸形 在临床上是一种常见慢性的炎症性疾病,初期主要表现为关节僵硬(尤其是晨僵)、关节肿胀疼痛,甚至关节出现畸形 目前,的发病机制尚不明确众所周知,多种微生
3、物在人体内共生,对人体的免疫功能发挥着重要调控作用有研究表明,多种细菌与 的发生发展存在相关性肠道是人体最大的微生物寄居地,肠道微生态系统是由上皮细胞、肠道固有菌群、肠黏膜免疫系统组成的,肠道内种类繁多的微生物和谐共生有研究表明,机体免疫功能受肠道微生态平衡的影响,参与免疫应答,肠道内黏膜可阻止有害物质进入,其不仅是保护屏障,也是主要的抗体分泌和免疫球蛋白的“工厂”,因此,肠道菌群失调可导致多种疾病的发生已有研究发现:发病与大肠埃希杆菌、奇异变形杆菌、结核分枝杆菌等细菌感染相关;在 患者关节中亦检测到细胞壁肽聚糖成分和肠道细菌降解的,同时,人肠道细菌的细胞壁可诱发实验动物产生关节炎;许多肠道细
4、菌的其他成分亦能激发类风湿因子抗体的分泌,这表明肠道细菌可能影响 发病有研究通过测序技术发现肠道菌群在调节机体免疫能力方面发挥着重要作用肠道菌群紊乱将导致肠道菌群多样性发生变化(致病菌增加,有益菌群减少),进而导致 的发生和发展唾液乳杆菌属于乳杆菌科、乳杆菌属,广泛地存在于人和动物的肠道中,是肠道菌群的重要成员之一,在多种疾病发生和发展中发挥着重要作用,但其在 中的作用研究较少本研究主要探讨唾液乳杆菌在 进展中的作用,旨为 的预防和治疗提供新的思路和方向 材料与方法 唾液乳杆菌和甲氨蝶呤制备唾液乳杆菌(,北京北纳创联生物技术研究院)配制:在厌氧环境下培养 ,活菌计数,采用无菌生理盐水配制菌液为
5、 甲氨蝶呤(上海上药信谊药厂有限公司)配制:取 片甲氨蝶呤片(共 ),加入少量 羧甲基纤维素钠()混悬液研磨,待充分研磨后,继续加 混悬液至 ,得 的甲氨蝶呤混悬液 动物实验 动物准备及饲养 大鼠(广东省医学实验动物中心,动物使用许可证号:(粤)饲养条件:检疫期间 只大鼠 箱,群养;试验期间 只大鼠 箱,饲养温度为 ,湿度为,采用 昼夜交替照明,自动抽风;自由进食和饮水,饲料为全价颗粒饲料(广东省医学实验动物中心),饮水为广东省医学实验动物中心制备的纯净水本实验经广东省医学实验动物中心实验动物伦理委员会批准()动物分组及预防性给药选用 只雄性 大鼠,采用先预防给药,再造模,将其随机分为唾液乳杆
6、菌组、甲氨蝶呤组,胶原诱导型(,)模型对照组、健康对照组,每组 只分组结束后,测量所有动物双后肢足趾体积 次,测量完成后,各组开始给药健康对照组直接灌胃细菌培养基 (次只),次 周;模型组亦直接灌胃细菌培养基 (次只),次 周;唾液乳杆菌干预组灌胃给予唾液乳杆菌()(次只),次周;甲氨蝶呤组灌胃给予甲氨蝶呤(),次周,连续 周分组及给药情况见表 模型建立本实验在预防灌胃给药 周后测量所有动物双后肢足趾体积 次,记为第零天的情况第 天开始首次造模,除健康对照组外,其余 组动物使用 注射器在动物尾根部 处皮下进针,距尾根部 处皮下注射乳化剂(胶原弗氏完全佐剂混合乳化后),每只 第 天加强造模,除
7、健 康 对 照 组 外,其 余 组 动 物 使 用 注射器在动物尾根部 处皮下进针,距尾根部 处皮下注射乳化剂(胶原弗氏不完全佐剂混合乳化后),每只 造模成功后,对应各组持续给药 周实验结束时,处死动物,留取左侧踝关节,中性甲醛固定,行组织病理学检查 造模评分(第 天),测量所有动物四肢足趾体积 次,并依照表 进行评分第 期袁 飞,等:唾液乳杆菌在类风湿性关节炎疾病进展中的作用表 各组给药情况()()组别受试物给药方式剂量健康对照组细菌培养基灌胃 (次只),次 周 模型组细菌培养基灌胃 (次只),次 周唾液乳杆菌干预组唾液乳杆菌()灌胃 (次只),次 周甲氨蝶呤组甲氨蝶呤灌胃 ,次 周表 大鼠
8、模型关节炎评分标准 分值评分标准正常踝关节有红斑及轻微肿胀踝关节至趾关节或掌关节有红斑及轻微肿胀踝关节至趾关节或掌关节有红斑及中度肿胀踝关节至趾关节或掌关节有红斑及重度肿胀 检测指标)一般观察:每天观察动物状态,并进行记录)各组体质量测量:实验期间,每周测量体质量 次)各组 评分:造模开始后每周依照表 进行双人独立关节炎评分 次)足跖体积测量:造模开始后,每周测量双后肢足肿胀体积 次)各组粪便采集及粪便菌群 检测:第 周、第 周、第 周分别采集无菌采集动物粪便 次,每只动物 粒(冻存),初次免疫后的第 天进行粪便菌群 检测根据大鼠粪便 提取试剂盒操作步骤提取粪便菌群 取各组粪便样品 ,置于预冷
9、的离心管内,加入 玻璃珠、裂解液和 蛋白酶,混匀 ,水浴 ,期间 次颠倒混匀,离心 ;取上清于另一离心管内,加入 萃取分离液,混匀 ,孵育 ,离心 ;取上清 至离心管内,加入 含无水乙醇的结合液,混匀,离心 ;弃去管内液体,并将离心柱置于新的管内,并加入 漂洗液,离心;弃去管内液体,再将离心柱置于新的管内,加入 洗涤液,离心;弃去管内液体,离心 ;转移离心柱于离心管内,加入 洗脱液后,室温条件下温育,然后 离心 ;得到肠道菌群,以下低温保存采用乳杆菌属特异性引物进行荧光定量,检测肠道乳杆菌属种类及数量)染色实验:染色主要用于观察足跖病理学变化,结果显示,大鼠足跖组织损伤程度加大;处死各组大鼠,
- 配套讲稿:
如PPT文件的首页显示word图标,表示该PPT已包含配套word讲稿。双击word图标可打开word文档。
- 特殊限制:
部分文档作品中含有的国旗、国徽等图片,仅作为作品整体效果示例展示,禁止商用。设计者仅对作品中独创性部分享有著作权。
- 关 键 词:
- 唾液 杆菌 类风湿性关节炎 疾病 进展 中的 作用 袁飞
1、咨信平台为文档C2C交易模式,即用户上传的文档直接被用户下载,收益归上传人(含作者)所有;本站仅是提供信息存储空间和展示预览,仅对用户上传内容的表现方式做保护处理,对上载内容不做任何修改或编辑。所展示的作品文档包括内容和图片全部来源于网络用户和作者上传投稿,我们不确定上传用户享有完全著作权,根据《信息网络传播权保护条例》,如果侵犯了您的版权、权益或隐私,请联系我们,核实后会尽快下架及时删除,并可随时和客服了解处理情况,尊重保护知识产权我们共同努力。
2、文档的总页数、文档格式和文档大小以系统显示为准(内容中显示的页数不一定正确),网站客服只以系统显示的页数、文件格式、文档大小作为仲裁依据,平台无法对文档的真实性、完整性、权威性、准确性、专业性及其观点立场做任何保证或承诺,下载前须认真查看,确认无误后再购买,务必慎重购买;若有违法违纪将进行移交司法处理,若涉侵权平台将进行基本处罚并下架。
3、本站所有内容均由用户上传,付费前请自行鉴别,如您付费,意味着您已接受本站规则且自行承担风险,本站不进行额外附加服务,虚拟产品一经售出概不退款(未进行购买下载可退充值款),文档一经付费(服务费)、不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。
4、如你看到网页展示的文档有www.zixin.com.cn水印,是因预览和防盗链等技术需要对页面进行转换压缩成图而已,我们并不对上传的文档进行任何编辑或修改,文档下载后都不会有水印标识(原文档上传前个别存留的除外),下载后原文更清晰;试题试卷类文档,如果标题没有明确说明有答案则都视为没有答案,请知晓;PPT和DOC文档可被视为“模板”,允许上传人保留章节、目录结构的情况下删减部份的内容;PDF文档不管是原文档转换或图片扫描而得,本站不作要求视为允许,下载前自行私信或留言给上传者【自信****多点】。
5、本文档所展示的图片、画像、字体、音乐的版权可能需版权方额外授权,请谨慎使用;网站提供的党政主题相关内容(国旗、国徽、党徽--等)目的在于配合国家政策宣传,仅限个人学习分享使用,禁止用于任何广告和商用目的。
6、文档遇到问题,请及时私信或留言给本站上传会员【自信****多点】,需本站解决可联系【 微信客服】、【 QQ客服】,若有其他问题请点击或扫码反馈【 服务填表】;文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“【 版权申诉】”(推荐),意见反馈和侵权处理邮箱:1219186828@qq.com;也可以拔打客服电话:4008-655-100;投诉/维权电话:4009-655-100。